• Forum - Doses, ADN, Suspension, Quantité, Plasmide

[Biologie Moléculaire] Gros problème.....

mais la quantité d'adn ne semble pas etre un probleme sauf à grande dose car le PCR marche avec l'utre protocole d'extraction (typa maxiprep) et sur la suspension bactérienne.  [...] Tu sous entends donc que tu as dosés l'ADN de ta suspension de bactos pour m'assurer que tu as la même quantité d'ADN que dans la PCR sur plasmide miniprep Tu dilues ton plasmide dans quoi pour arriver à 20ng/ml apres la maxiprep et la miniprep H2O, TE As tu vérifié les plasmides sur gel.  [...]

[Génétique] Help! tp génétique, analyse clonage

Ensuite on a aussi fait un test de compétence avec encore une suspension de cellules compétentes à laquelle on ajoute du plasmide pur. Le tout est ensemencé sur une boite de Lb agar.  [...] L'efficacité de transfo = nombre de bactéries avec plasmides /ug d'ADN.==. bacto sur milieu sélectif / quantité d'ADN utilisé pour la transfo. Tenir compte de la dilution éventuelle des bactos avant étalement.  [...]

[Biologie Moléculaire] analyses des acides nucléique

1. Transférer la suspension bactériennes (40microlitre) en tampon A dans un tube eppendorf contenant 600microlitrede la solution de lyse (tampon c).  [...] Dans la glace avec la solution E. comme je l'ai dit, le SDS précipite au froid. De meme éventuellement,comme on est en présence de sels, les protéines aussi, ainsi que les longs acides nucléiques (comme l'ADN génomique). Les plasmides restent en suspension.  [...]

[Biologie végétale] Calcul d'activité de chlorophylle

Pour cela j'ai comme indication le coefficient directeur de cinétique en mg d'O2.L-1.sec-1 que je dois trouver à partir de la seule donnée dont je dispose c'est-à-dire ce même coefficient mais en mg d'O2.sec-1 pour 15mL de chlorophylle. 0,00264.   [...] J'ai déjà calculé ma quantité de chlorophylle dans 15mL de suspension qui est de 4×10^-4 g.  [...]

Vaccin hépatite B - Page 4

Le substrat par chromatographie par échange d'ions est purifié avec élimination de l'ADN résiduel et de l'albumine bovine du milieu de culture. Enfin la suspension d'antigènes HBs purifiée bénéficie d'un traitement par la chaleur et le formol inactivant les différentes classes de virus susceptibles d'être encore présentes dans la suspension.  [...] 2- Optimisation du rendement. c'est en g/l la quantité de protéine fabriquée par litre de fermenteur et par cycle de fabrication (un bioréacteur de 20 000 l peut réaliser 20 cycles/an).  [...]

electroporation

Faux. c'est une tension électrique qui attire les charges - le courant ne mesure que le flux (la quantité de charge en mouvement).  [...] Vu que la perforation dans le cas d'une électroporation n'est pas irréversible il ne me semble pas juste de dire que les ions trouent la membrane plasmique de la cellule, ça doit être plutôt être un échange de charges non Qui craient une affinité notamment de la tête des phospholipides.  [...]

RT PCR one step de quiagen

voila dans mon labo on fait de la RT PCR plus precisement une IC RT PCR sur du vegetal pour detecter un virus et on rencontre bcp de pb technique malgre de nombreuses precautions. du genre qu'on obtient des bandes positives pour ts nos echantillon y compris nos temoins sains et en plus de ces bandes on a le front de migration qui resort tres fortement en bas du gel (meme plus fort que les bandes positives).   [...] g fais une manip ou g change de kit et d'amorce, bref du materiel neuf et stérilisé et j'ai obtenu les memes résultats des bandes positives partout. puis une autre manip dans un autre labo mais avec notre materiel (j'ai fais autoclaver les pipettes cette fois ci) et ca a marché meme si quand meme on avait des bandes vraiment tres faible(a peine visible sur la photo) pour certains echantillons et pas pour les TS.   [...]

Transport de spores, rôle dans le pourrissement de fruits

- quantité de spores en suspension dans l'air (ça peut varier en fonction de pleins de facteurs, facteurs pouvant eux-même être liés au transport).  [...] Il faudrait voir si les levures/champignons de la pourriture des clémentines sont cultivables dans un milieu nutritif. Si c'est le cas, il faut filtrer un volume d'air connu, récupérer les spores du filtre dans une solution, et ensemencer des boîtes de milieu nutritif avec cette solution (si les colonies de moisissures sont trop proches, il faut diluer et tenir compte de la dilution pour calculer ensuite la quantité de spores pour un volume d'air donné).  [...]

Pureté de l'ADN

Re, le blanc= eau distillée autoclavé et sans nucleases. C est la.même eau dans laquelle mon ADN est en suspension pour le chlorophorme je n'en rajoute pas seul avant le précipitation de l'ADN si c'est votre question... Eclairez moi svp.  [...] '(.'( petite précision j extrait mon ADN à partir de pièce tumorale fixée dans du formol pensez vous que je l'élimine pas assez Je fais des lavages à leau physiologique et des centri...help je désespère.  [...]

[Biochimie] Protocole de purification d'une protéine, vos avis

On élimine le surnagent. Le culot est remis en suspension par une solution de sulfate d'ammonium pour éliminer la présence éventuelle d'ADN.  [...] Moi je rajouterai juste une RNASe et DNAse à ton échantillon pour me débarassé de l'ADN et l'ARN. Si tu veux garder l'activité beta-gal il ne vaux mieux pas la précipiter sinon ca risque d'etre difficile.  [...]