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[Biochimie] Dosage proteine totale sur FHN

J'evalue l'activité de certaine molécules sur deux type de cellules, les FHN et les HaCAT. Pour evaluer cette activité je fais un dosage BCA sur les culots cellulaire pour determiner le taux de proteine totale.  [...] Sur les Hacat la coloration se réalise au maximum en 20mn alors que sur les FHN la coloration se fait en minimum en 2h30mn. Tout d'abord j'aurais voulu savoir si pour certain d'entre vous le constat etait le même. Ensuite j'aurai voulu savoir si ajouter une faible dose de soude pour eclater les membranes et donc acceler la coloration etait une bonne solution.   [...]

[Biochimie] dosage de l'urée et la creat

le dosage de l'urée nous révèle généralement une insuffisance rénal (en cas d'un taux élevé lors du dosage) or on peut avoir une augmentation de l'urée en cas d'un catabolisme accéléré de protéine, brûlures, traumatisme, infarctus du myocarde...etc.dans un premier temps je veux d'abord savoir comment un traumatisme et l'infarctus peuvent augmenter le taux d'urée.  [...] j'ai lu aussi que le taux d'urée est abaissé en stade terminal d'une grande insuffisance hépatique, donc on aura une augmentation de l'ammonium(puisque c'est le foie qui fabrique l'urée à partir d'acides aminés+sels ammoniacaux, et que le rein extrait du sang et le concentre dans les urines), et comme vous le savez le paramètre d'urée dosé dans les laboratoire est une technique enzymatique(uréase qui dégrade l'urée en ammonium) et colorimétrique (spectrophotométrie) donc dans ce cas la comment on pourra savoir si le taux d'ammonium dosé(urée par déduction)est élevé pour cause d'une suffisance rénal ou hépatique.  [...]

[Biochimie] Dosage de protéine

Je voudrais savoir quelle méthode vous me proposez pour réaliser un dosage de protéine dans une dispersions de gomme arabique autre que le dosage de Bradford.  [...] Moi je fais a la guanidine 6M, elle dénature la protéine, dosage a 280nm et ensuite je vais chercher le epsilon sur Expasy a partir de la sequence de la proteine, et enfin avec Béer Lambert on retombe sur ses pattes.  [...]

Diabete, différents diagnostiques ..

merci, je sais qu'il existe deux types de diabete, et pas mal d'autre chose car je travaille dessus et donc je me suis renseignée. Mais enfet, j'aurais aimé savoir comment peut t-on diagnostiquer si on est diabètique ou pas.   [...] En parlant de dosage, je parle du dosage du glucose pour trouver si notre taux de glucose est élevé ou pas.  [...]

[Biochimie] dosage des proteines

quel sont les points de comparaison eventuel,entre un dosage de proteine avec la methode de brad ford,et un dosage par elisa indirect,c'est pour une conclusion general.  [...] ..incubation...6_ inoculation des AC de detection couplés a la peroxidase...incubation..lavag e...7_ajout de la solution de lenzyme peroxidase...lecture sur le lecteur elisa a 495nm.   [...]

[Biologie Moléculaire] Western Blot Transfert sur membrane

Tu peux aussi essayer de diminuer le voltage, sans augmenter le temps de transfert pour être sure que tes protéines de bas PM diffusent dans le tampon.  [...] Tu peux aussi essayer de diminuer le voltage, sans augmenter le temps de transfert pour être sure que tes protéines de bas PM ne diffusent pas dans le tampon.  [...]

Testostérone,varicocèle et corps mou

A nouveau, pour ce qui concerne votre taux de testostérone à vous, une seule solution. demander un dosage. Parlez-en à votre médecin traitant ou demandez-lui de vous adresser à un urologue.  [...] De toute façon, c'est la même qui m'avait dit ah oui, vos résultats sont bien en dessous de la normale... mais les méthodes d'analyse ne sont pas précises de toute façon, je ne change pas votre dosage. J'ai été obligé d'utiliser ma formation en physique / chimie pour lui prouver qu'elle avait tort (les documents publiés par l'ANSM ont été mon support principal.  [...]

[Biochimie] Purification de protéine pour ELISA

J'aimerais avoir quelques critiques de biochimistes sur une idée de protocole pour la purification préliminaire d'une petite protéine en vue d'un dosage ELISA.  [...] Et dans l'autre sens. un tel enchaînement ne risque-t-il pas d'être difficile à reproduire Ne va-t-il pas me faire perdre trop de protéine pour faire un bon dosage.  [...]

[Biochimie] Chromatographie sur colonne

Et oui je pense que c'est la protéine de référence pour le dosage ici.  [...] Sinon je pense exactement comme toi. Il faut utiliser la droite d'étalonnage pour trouver la quantité de protéine. Il n'y a aucune autre manière (ou peut être trouver l'équation de ta droite et calculer avec ça mais franchement ça sert à rien vu la précision de la méthode ).  [...]

[Biochimie] dosage des proteines

faire un dosage de proteine par la methode lowry ou autre methode de dosage.  [...] Pensez-vous que cela pose problème de resuspendre le culot de protéines dans de l'acide (sulfosalicilique 1.3%) avant d'effectuer le dosage.  [...]