• Forum - Digestion, Fragment, ADN

[Biochimie] Poids plus élévé après digestion enzymatique

tu sais quel est le profil que tu dois obtenir après digestion si c'est un produit PCR c'est linéaire. Tu n'as qu'un fragment apres digestion C'est pas du a une structure de repliement.  [...] C'était une digestion des sites de restrictions d'un fragment que j'avais amplifié par PCR, sur mon gel je ne dois obtenir qu'un seul fragment d'environ 1000bp.  [...]

[Biologie Moléculaire] [biologie moleculaire] Le code génétique

1. recherche d'homologie -. 2. clonage du fragment d'ADN cense contenir le gene -. 3. analyse de l'expression de ce gene (deletion, expression etc..).  [...] 1. identification d'un phenotype mutant -. 2. recherche par complementation du fragment d'ADN permettant de restaurer le phenotype sauvage -. 3. analyse de ce fragment d'ADN.  [...]

Intégration dans un plasmide

Non, c'est pas systematique. Ca depend de la qualité de tes digestions, de la taille de ton vecteur et de ton insert. Par contre, ce genre de construction se fait in vitro. Tu transformes ensuite la bacterie par ton plasmide. Pour integrer un fragment d'ADN dans un plasmide deja dans une cellule, je dirais que tu ne peux le faire que par recombinaison homologue, mais c'est bcp plus compliqué et j'ai jamais entendu d'une telle manip pour modiifier des plamisdes.  [...] Pour les integron, oui c'est trés connu comme systeme mais pas utilisé comme tel (enfin je pense) comme outil de biologie moleculaire pour faire du clonage ou autre. Certaines methode (Datsenko & wanner) utilisent par contre une integrase pour augmenter la frequence de recombinaison homologue d'un gene dans un genome (mais la on s'eloigne de ta question).   [...]

[Génétique] Plasmide

comment purifier le fragment linéaire apres amplification du plasmide pBR 322 dans escherichia coli et extraction de l'adn plasmidique.  [...] Lors de ta PCR t'as surement utilisé des amorces contenant des sites de restriction que tu dois utiliser donc voila tu commence par faire une digestion avec ces enzymes, tu dépose ensuite sur gel pour récuperer ton fragment, et ensuite tu purifie alors il existe plusieurs techniques de purfi pour des produits PCR recuperes à partir de gel.  [...]

[Evolution] Evolution de la reproduction aséxuée

Je pense aussi que la vitesse de reproduction ( largement supérieure à la reproduction sexuée) augmente les chances de mutation ce qui compense le problème de copie conforme de l'adn.  [...] Bien que ne disposant pas de la reproduction sexuée, les bactéries disposent de moyen d'echanger des fragments de gènes et donc de propager leurs évolutions. Trois mécanismes interviennent principalement.  [...]

Animaux transgéniques

Une petite question à propos de l'expression conditionnelle de gènes chez les souris transgéniques. comment fonctionne le système Cre_ Lox, son intérêt dans le knock out knock in.   [...] La cre (recombinase) est placée sous le controle d'un promoteur qui code pour un gène s'exprimant soit à un certain moment, soit selon une localisation précise, soit les deux (il existe certains raffinements, ex. système CreER T2 ).   [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr

Par exemple, un protocole pour amplifier des fragments de plasmides de 1 kpb, avec la Taq DNA Polymérase et primers avec Tm autour de 59-61 °C.  [...] moi j'ai un autre soucis je voudrais denaturer un fragment d'ADN mais de facon stable. J'ai essaye de chauffer mon ADN a 95 degres pendant 10 min et de le plonger dans la glace immediatement apres mais ca ne fonctionne pas...Avez vous une solution merci d'avance.  [...]

Le virus : un être vivant ?

En tout cas la question a t elle a voir avec la dictée de Pivot d'il y a 2 semaines, c'etait justement la question subsitiaire... et le college de france c'est etripe sur la reponse.   [...] Finalement prenons un fragment d'ADN qui entre dans une cellule et dans le génome, ca pourrait être un virus ^^ Même principe.  [...]

[Génétique] problème d'extraction d'ADN

Qu'est ce qui vous fait dire que l'ADN se dégrade Car vous n'amplifiez pas votre fragment en PCR Peut être un problème de PCR, d'amorces,  [...] Si tu obtiens un Smir a hautes tailles c'est qu'il commence déjà a se degrader mais que les fragments d'ADN clivé sont encore de grande taille et par conséquent encore utilisable en PCR la plupart du temps.  [...]

Régénération cellulaire

va insérer un fragment d'ADN dans une cellule (ton morceau d'ADN un pince a épiler et une bonne loupe ainsi que de la colle pour placer ton gène dans le génome de la cellule xD), et ensuite fais ca pour toutes les cellules que tu possède en toi ^^.  [...] attention aux raccourcis et autres imprécisions. la transcriptase inverse part d'un ARN, pas d'un ARNt. Ensuite ça n'est absolument pas la seule méthode pour faire rentrer un bout d'ADN dans une cellule, heureusement.  [...]