• Forum - Différences, Migration, Protéine

[Biochimie] Electrophorése

je dirais qu'en conditions dénaturante les protéines ont en gros toutes la même forme et sont différenciés que sur la masse.  [...] Alors qu'en conditions non dénaturantes ils y a des différences de migration entre une protéine fibrillaire et une globulaire de même masse (la forme et la structure de la protéine joue aussi un rôle).  [...]

[Biochimie] Electrophorèse en condition dénaturante et native

1°) la première va se faire alors que la protéine a été chauffé et n'est plus en condition native, fonctionnel. celle-ci va dépendre seulement de la masse de la protéine.  [...] Alors on réalise une électrophorèse sur la Bêta-Lactoglobuline (une protéine du lactosérum) dans les conditions natives, cette dernière donne une migration en deux bandes A et B d'égales intensités mais ayant des niveaux de migrations différents. Par contre, son électrophorèse en présence de Dodécyl sulfate de sodium (SDS), donne une migration en une bande unique dont le PM est évalué à 18300 Daltons.  [...]

[Biochimie] Modifications post traductionnelles et électrophorèse !

Bizarrement cette explication me convient mieux, mais je la trouve encore un peu approximative... Le phosphate, malgré sa taille imposante doit pouvoir être comparable à une chaine latérale encombrante comme la lysine par exemple. Dans ce cas, la migration électrophorétique tiendrait compte aussi de la composition en acide aminé et, pour un même poids moléculaire, une protéine ayant une composition forte en acide aminés à chaîne latérale encombrante migrerait moins vite qu'une protéine à composition forte en acides aminés à chaine latérale peu encombrante.  [...] Non pas à ma connaissance. Pour mes protéines après migration à 80V dans le stacking et 130V dans le separating, je transfère en liquide pendant 1h30 à intensité fixe 350 mA, puis les autres étapes sont inchangées par rapport à d'autres westerns sur d'autres protéines.  [...]

Recepteur à l'insuline en SDS PAGE

Et donc, selon la distance de migration pour un type de gel donné sera associé à un rayon de Stock théorique...proportionnel à la taille de la protéine complexée par les molécules de SDS, et donc, proportionnel au poids moléculaire.  [...] Ce n'est pas le tampon de migration qui contient du beta-mercapto, c'est le tempon dans lequel est repris les protéines laemli. Cette etape, denature totalement la proteine (pont S-S compris).  [...]

[Biologie Moléculaire] kinase

Quelqu'un a t'il une idee de la difference de migration electrophoretique provoquee par l'ajout d'un seul phosphate sur une proteine.  [...] ). Si tu ne peux pas utiliser ce genre de technique, tu peux juste utiliser un lysat cellulaire total et analyser les proteines d'un certain poids moleculaire apres migration sur gel ou meme (plus delicat quand meme) utiliser le lysat lui meme pour ne rien perdre.  [...]

Protéine avec bcp de résidus acides migre de façon aberrante en western blot

J'ai vraiment l'impression, via les différents papiers sur Nrf2 ou sur d'autres protéines, que la raison de cette migration aberrante est la forte proportion d'acides aminés acides dans la séquence. Mais je ne comprends pas pourquoi ces aa acides engendreraient une migration plus lente.  [...] Il serait bon pour toi de revoir tes cours de biochimie. Où as-tu vu qu'une sérine pouvait adopter une conformation particulière Dans une protéine, une séquence peut adopter une conformation mais pas un acide aminé seul. D'autre part, seule la phosphorylation de la sérine pourrait diminuer la migration de la protéine car un groupement phosphate est encombrant.  [...]

[Biochimie] SDS page

Pour le marqueur je n'est pas déposer, mais j'ai utiliser d'autre protéines d'autres collègues et qui ont montrer des bandes sur le gel.  [...] C'est pas tellement le volume qui compte mais la quantité de protéine. Je trouve aussi que c'est trop de protéine pour avoir une belle migration.  [...]

[Biochimie] Migration d'une protéine et AA anormaux

Dans une électrophorèse, cette protéine (mutée) devrait migrer vers l'anode, n'est-ce pas.  [...] Franchement, si je considère la charge globale de l'hémoglobine mutée avec la normale je dois retrouver la même. Un acide aminé changé sur 152, ca ne doit pas faire grand chose.   [...]

QCM - Immunoprécipitation

A-Après migration en gel non dénaturant, on identifie la protéine B dans les complexes retenus par l'anticorps anti-protéine A au poids moléculaire de 2kDa.  [...] Si j'enlève la fin de la réponse D, on aurait. Après migration en SDS-PAGE et transfert sur nitrocellulose, on identifie la protéine C.  [...]

détection de l'epo?

En fait, pour séparer l'EPO endogène de l'EPO exogène par électrophorèse, on se base sur l'infime différence entre les propriété strucuturales de ces deux composés engendrées par leur glycosylation post-traductionnelle. En effet, une de protéine est pr ésente dans un milieu biologique sous forme d'une famille de molécule de structure proche mais non identique.  [...] Mais il y a donc qques différences en particulier dans le nombre de résidus d'acide sialic et dans la longueur des chaines glycosylées, ce qui leur procure différents profils de migration en électrophorèse a deux dimensions. l'EPO endogène s'immobilise pour une valeur de pH entre 3.  [...]