• Forum - Détermination, Activité, Enzyme

[Biochimie] détermination de l'activité d'une enzyme

Je dois déterminer l'activité d'une enzyme. Le produit formé est des sucres réducteurs qui réagit avec le 3,5-DNS, qui donne du ANS qui absorbe à 530 nm.  [...] £. coefficient d'extinction moléculaire (de la solution qui te donne la coloration et qui te permet de lire l'absorbance), on doit sûrement te la donner si tu dois utiliser cette méthode.   [...]

[Biochimie] modification de la transcription de l'aromatase par les variations de températures

Cependant, puisqu'il est question d'enzyme, il est bon de rappeler qu'une enzyme possède des paliers de température pendant lesquels son activité vis à vis du (ou des) substrat(s) est modifiée. L'aromatase doit donc aussi avoir une température optimale au delà (et/ou en deça) de laquelle elle n'agit plus, provoquant un changement dans le processus de détermination du sexe du poisson.  [...] Mais si la température a une influence sur l'action de cette enzyme, comment expliquer que certains poissons femelles deviennent des mâles si la température augmente et que le phénomène inverse se produit aussi.  [...]

[Biologie Moléculaire] Tester la force d'un promoteur

Plus un promoteur est fort, plus le nombre d'enzymes codant le gène de résistance est important et la CMI sera élevée. La CMI est une information qui intéresse généralement les biologistes (jusqu'à quel dose d'antibio est résistante ma souche etc) et son amplitude de variabilité dépend du mode d'action du produit du gène (pompe à efflux inactivation de l'antibio etc.).  [...] Ouais enfin doser l'activite d'un promoteur via une difference de CMI, faut vraiment pas vouloir etre precis. Il est tres nettement plus precis de doser láctivite enzymatique, et pas le phenotype. De plus determiner la CMI d'une souche est une manip assez lourde, en tout cas bien plus que lacZ, Luc ou un autre du meme style et pas vraiment plus legere que la determination de l'activite CAT.  [...]

Détermination du pH optimum d'action d'une enzyme

Bonjour, j'étais entrain de faire ma préparation de TP et après l'avoir presque terminé je me suis rendu que je bloquais sur ces 2 questions, les voici.   [...] L'iode permet la caractérisation des oses, une molécule d'I2 va se fixer sur les oses pour donner un complexe coloré, couleur qui dépends du polysaccharide en question.   [...]

determination de l'activité xanthine oxydase dans le foie

je voudrai determiner l'activité xanthine oxydase dans le foie des souris, je vous explique briévement le protocol avant de vous exposer le problème que j'ai rencontré.  [...] L'activité spécifique de ta protéine qui est une enzyme correspond aux micromoles de produits apparu par minute et par mg de protéines de départ U/mg.  [...]

[Biochimie] Problème d'enzymologie

Je rencontre un petit problème quant à la détermination des constantes d'un enzyme. Je m'explique. il s'agit d'un enzyme avec intermédiaire covalent ES' qui répond parfaitement à la loi de Michaelis.  [...] Maintenant je dois déterminer. k2, k3 & Ks et le problème il est là... Je n'arrive pas à tirer des informations utiles (genre trouver Ks) de la relation juste au dessus (en gras)... donc je me retrouve avec 2 équations à 3 inconnues.  [...]

[Biochimie] Activité Du Complément

J'ai fais un TP de Biologie hier sur la détermination de l'activité du complément.  [...] Votre tube 1 est un témoin négatif. on s'assure que les cellules ne sont pas hyper-stressées et donc sujettes à hémolyse spontanée dans leur totalité. En cela on teste aussi le tampon - ou milieu isotonique - de dilution.   [...]

[Biochimie] pH optimal et Stabilité d'une enzyme

je dois déterminer le pH et la température optimaux de mon enzyme et je voudrais comprendre la différence entre la détermination du pH optimal et la stabilité de l'enzyme à différent pH (de même pour la température).  [...] Merci beaucoup, il ne me reste plus qu'à manipuler en espérant trouver de bons résultats. En fait, je dose les groupements reducteurs des acides galacturoniques formés par la dégradation du pectate sous l'effet de l'enzyme. Le dosage de l'activité enzymatique s'effectue au DNS (methode de Miller). Je pense que ça devrait aller.  [...]

activitée enzymatique

Si maintenant j'imagine que tu parles de la determination d'une activité type amylase dans l'urine et la salive regarde les sites.  [...] Si tu veux avoir des paramètres interessants, il faut doser l'enzyme, tu peux alors avoir une activité enzymatique spécifique, ou mieux la purifier (alpha amylase commerciale...) et là tu peux avoir un Km et un kcat, et donc une efficacité (paramètre le + interessant pour une enzyme).  [...]

[Biochimie] électrophorèse-Gel-Activité?

l'electrophorese ne permet pas de determiner l'activité d'une enzyme (sauf cas particulier ou le substrat est mélangé au gel) elle permet en revanche de s'assurer de la presence de l'enzyme (apres cette derniere peut etre inactive).  [...] Ensuite, le test d'activité enzymatique est justement pour t'assurer que ta protéine est vraiment là et que je n'ai pas isolé une autre avec le même PM.  [...]