• Forum - Détergents, Protéines, Membrane

Solubilité des protéines et role d'un acide biliaire

Les détergents ioniques ont pour but de déchausser les protéines des membranes en les recouvrant de charges, les séparant de ce fait. Pour l'action des solvants organiques sur les membranes, cf nos amis chimistes.  [...] En fait, l'ajout de détergents non dénaturants à une membrane biologique en solution provoque l'insertion de molécules de détergents (amphiphiles) dans la membrane, et le départ de constituants membranaires, qui s'assemblent en micelles (phospholipides + détergents), jusquà un équilibre membrane saturée en détergent - micelles saturés en phospholipides ou protéines.  [...]

[Biologie Cellulaire] Purification d'un récepteur membranaire

J'ai une question par rapport aux techniques pour purifier un récepteur. Dans mon cours, il est question de solubiliser par des détergents membranaires non dénaturant les protéines de la membrane puis de faire une chromatographie d'affinité pour purifier le récepteur qui nous intéresse.  [...] Elles sont quand même fragiles ces protéines membrannaires avec des domaines hydrophobes et hydrophiles repilées d'une mannière assez précise. Un protocole d'extraction doit être adapté à chaque protéine, et parfois (souvent) on n'en trouve pas qui convienne.  [...]

additifs pour la cristallisation des proteines membranaires

j'ai lu l'article plusieurs fois mais, je ne suis pas certain de ma réponse. J'ai fait des recherches sur internet sur le sujet, et j'ai trouvé que pour cristalliser les proteines membranaires, il faut utiliser des detergents (sans pour autant citer des exemples de ces detergents).  [...] Cependant il n'y a pas un coktail d'additif et de détergents précis. Il y en a beaucoup, et tu n'es pas sans savoir que cristalliser une protéine membranaire c'est la croix et la bannière (y a qu' a voir la PDB) donc en général on fait les tampon de cristallisation à taton (maintenant ce sont même des labos ultra équipé avec de la robotique qui s'amusent à faire des centaines de cribles pour trouver le bon tampon qui va bien).  [...]

Autoradiographie et proteine

voilà je suis bloquée à nouveau sur un nouvel exercice.. et il n'y a rien dans mon cours ni 'exercices pour m'aider./ merci d'avance.   [...] Les microsomes rugueux apportent la machinerie cellulaire nécessaire à traduire l'ARN, les détergents ioniques ont pour rôle de désagréger les membranes et les protéines et d'empêcher le fonctionnement de la traduction, les protéases détruisent les protéines nouvellement formées (elles ne fonctionnent qu'en absence de détergent) et enfin les glycosidases clivent les groupements sucres parfois ajoutés à des protéines.  [...]

[Biochimie] propriétés de détergents

- le lubrol est un detergent neutre solubilisant préférentiellement le feuillet cytosolique de la membrane plasmique,  [...] ...connaissez vous d'autres propriétés spécifiques à chacun de ces 2 détergents susceptibles d'expliquer leur capacité à solubiliser certaines protéines (ou membranes) plutot que d'autres.  [...]

[Biologie Cellulaire] Perméabilisation cellulaire

Goldenthal K.L., Hedman K., Chen J.W., August J.T., Willingham M.C., 1985, Postfixation detergent treatment for immunofluorescence suppresses localization of some integral membrane proteins, The journal of histochemistry and cytochemistry, 33(8).813-20.  [...] Que les détergents lysent les membranes et posent des problèmes pour les protéines membranaires n'est pas un nouveau problème. Mais ça ne veut pas dire qu'il y a une fuite de protéines. Cela veut dire que les protéines membranaires, ont besoin des membranes pour être structurées et que si on abime ces membranes, on abime aussi les protéines membranaires.  [...]

stérilisant et détergeant

A ma connaissance, il n'existe pas de produit stérilisant, la stérilité s'obtient par autoclavage (barème temps/température).   [...] En biologie, on utilise des détergents pour solubiliser des protéines membranaires, pour faire des lyses cellulaires etc. Les stérilisateurs (antiseptiques) sont là pour éliminer/réduire les micro-organismes.  [...]

[Biologie Moléculaire] l'extraction d'ADN

Ethanol. l'ADN est insoluble dans l'éthanol 70% ou 100%, son but sera d'éliminer les contaminants (du genre protéines, lipides...) tout en laissant l'ADN intact.  [...] Tampon de lyse. contient ce qui va lyser la cellule. Il contient souvent des protéases (clivent les protéines des parois) et des détergents (dissolvent les membranes). Cela permet de libérer tout le contenu cellulaire.  [...]

[Biologie Cellulaire] Protocole expérimental

Vous avez donc trois extraits qui constituent chacun un compartiment de distribution des protéines. Votre question est, dans quel compartiment se trouve ma protéine d'intérêt Pour cela vous faites un western.  [...] Perdu parce que les détergents vont vous embêter ensuite. Sauf si vous voulez les protéines membranaires c'est inutile. Il y a une méthode plus simple, que l'on voit en première année de biologie. Un truc tout bête qui fait exploser les cellules.  [...]

Séparation lysosomes mitochondries

Alors dans un protocole pour séparer les lysosomes des mitochondries dont les densités sont très proches on m'indique qu'ils faut mettre un détergent dans le milieu. Celui ci sera intégré dans les cellules puis dans les lysosomes qui deviendront plus légers car les détergents ont une faible densité, ce que je ne comprends pas c'est pourquoi la membrane du lysosome et même celle de la cellule ne seront pas attaquées et solubilisées par ces détergents.  [...] Non en fait ce sont les lysosomes que je veux récupérer mais ce que tu me dis ça justifie encore moins ce protocole pour les récupérer. N'y a-t-il pas des détergents qui sont assez doux pour entrer pas endocytose dans la cellule sans détruire les membranes.  [...]