• Forum - Detection, Anticorps

Méthode Elisa

3) étape 3. ajout d'anticorps anti-A (différents des premiers Ac utilisés) (ces Ac sont appelés Ac de détection). l'antigène se trouve pris en sandwich entre l'Ac de capture et l'Ac de détection.  [...] 4) ajout d'anticorps secondaires qui vont reconnaitre les Ac de détection. cela a pour but d'augmenter le signal et donc d'améliorer la sensibilité du test. Ces Ac sont couplés à une enzyme.  [...]

[Biologie Moléculaire] Immunohistochimie/ Immunomarquage

Dans le cas d'un western blot, c'est +/- le même principe détection à l'aide de deux anticorps sauf qu'on agit sur une membrane. Après avoir fait migrer ta protéine sur une membrane, tu la détectes à l'aide d'anticorps primaire et secondaire. Cependant cette technique est bien plus fastidieuse.  [...] l'immunomarquage consiste en la détection d'une biomolécule en utilisant un anticorps la reconnaissant. C'est un terme plutôt générique.  [...]

[Biochimie] méthode ELISA vache folle

- immunodosage sur microplaques (ELISA) pour la détection de la PrPRes résistant à la protéinase K avec anticorps.  [...] - capture d'antigènes ELISA à l'aide de deux anticorps monoclonaux différents pour la détection des fractions de la.  [...]

[Immunologie] Protocole ELISA

Je suis chargée d'imaginer un protocole visant à déterminer la réaction immunitaire d'un poisson ( D. labrax ) face à une infection de parasites branchiaux ( D. aequans ). J'ai pensé réaliser en premier un test ELISA pour savoir si le poisson exprime des anticorps anti-parasite dans son sang.  [...] La détection des anticorps se fait par test ELISA. Le sang des poissons est récupéré par la veine caudale et mis à coaguler une nuit à 4°C. Le sérum est ensuite récupéré et dilué. Les antigènes proviennent des parasites. L'anticorps de détection est une immunoglobuline anti-loup obtenue en injectant des antigènes de loup dans un lapin.  [...]

[Biologie Moléculaire] Construction d'une banque d'ADNc

contrôle-qualité de l'ADN recombinant. transformation dans E. coli, sélection des clones recombinants et extraction du vecteur d'expression.   [...] La méthode que Delirium m'a gentiement indiqué permet directement une sélection spécifique de l'Adnc avant clonage puisqu'on utilise des amorces spécifiques lors de l'amplification mais la sélection des clones d'intérêt au sein d'une banque d'adn na se fait-elle pas ensuite (une fois la banque construite) par criblage (hybridation avec une sonde specifique) où bien quel est l'intérêt de la banque.   [...]

[Biochimie] y a t il des points faible a la methode ELISA?

Les techniques de détection répondent à deux critères essentiels. la sensibilité et le spécificité. Le problème étant que quand une méthode est très sensible, elle présente souvent le risque d'être moins spécifique (avec par exemple la détection de 2 anticorps très proches).  [...] Ensuite, il faut aussi voir à quoi on applique cette méthode et dans quel cadre. Ainsi dans le cadre d'un dépistage d'une infection virale commune dans un élevage, le faible coût de l'ELISA est un avantage. Dans le cadre d'un diagnostic de certitude concernant une maladie grave qui implique un abattage du troupeau si elle est avérée, la PCR sera privilégiée dans la mesure du possible.   [...]

[Immunologie] Différence entre la technique ELISA indirect et direct (sandwich)

J'ai une petite question ^^. Je réalise un projet concernant le virus EBOLA et ses techniques de détection, notamment les techniques immunologiques. Je sais que ELISA indirect est utilisée pour la détection d'anticorps et que ELISA direct est pour la détection d'antigènes, mais y a-t'il une différence au niveau de la spécificité Y a-t'il une raison pour utiliser une technique plus qu'une autre.  [...] Dans le cas de l'ELISA indirect, tu cherches à doser les Ac dirigés contre le virus EBOLA donc tu cherches à déterminer si la personne a réalisé une réaction immunitaire contre EBOLA et donc tu détectes de façon indirecte la présence du virus. Cette méthode indirecte bien que plus longue (3 acteurs qui entrent en jeu) est plus sensible dû à l'amplification du signal et est moins chère et plus flexible grâce à l'utilisation d'un anticorps secondaire marqué.  [...]

Différence de fixation des cellules

Avec le methanol, la fixation s'effectue par deshydradation (denaturation des proteines) alors qu'avec les aldehydes (formaldehyde, glutaraldehyde) on conserve la structure 3D de la proteine (fixation par pontage). Donc effectivement, si tu utilises un anticorps conformationnel, la detection de ton antigene sera impossible apres une fixation en methanol.  [...] Dans mon labo nous avons la chance d'avoir pas mal de mutants qui nous servent de controle dans la détection de ce que l'on recherche. Je peux vous assurer qu'avoir un bon anticorps spécifique est bien plus difficile que l'on peut le penser, il y a énormément de faux positifs. Donc méfiance avec l'immuno.  [...]

traitement de la primoinfection symptomatique du Vih et ses conséquences

youpi c'est pas trop tard pour le traitement. ouff ca me soulage car si j'ai bien compris ici lorsqu'on dis la sérologie est encore négative c'est la non détection des anticorps anti vih. D'ou l'administration pendant au moins 1 an, d'une trithérapie avec 2 inhibiteurs nucléosidiques de la transcriptase inverse et une antiprotéase repose uniquement sur la détection de l'Ag P24.  [...] La RT PCR vous donne votre charge virale, elle dose l'ARN en nombre de copie, si vous êtes infecté on trouve des copies, si vous ne l'êtes pas on en trouve pas. Point barre. Cette détection est indépendantes de la production d'anticorps ou autre.  [...]

Allez hop que de la fievre - Page 2

Désormais les biologistes n'utilisent qu 'un seul réactif de type Elisa à lecture objective permettant la détection combinée des anticorps anti-VIH-1 et 2 et de l'Ag p24 du VIH-1 avec un seuil minimal de détection de l'antigène p24 du VIH-1 de 2 UI/mL. Ces réactifs sont communément appelés tests combinés de 4e génération.  [...] Car quand il y a environ 1 mois, j'avais appelé un biologiste il m'a dit que dans leur laboratoire ils utilisaient plusieurs antigènes pour détecter les anticorps et là ils disent que 1 seul réactif. La vérité c'est que je sais même pas c'est quoi un réactif dans ce contexte. Voila voilou.  [...]