• Forum - Dégradation, ADN, Enzymes

[Microbiologie] Passage dans le noyau de l'ADN ou ARN viral. - Page 2

On pourrait même imaginer que se sont les virus eux même qui ont inventé les premiers génomes ADN. Pour quelle raison Peut etre pour se protéger des enzymes de restriction ARN-dépendante des cellules.  [...] Les bacteries aussi utilisent ce meme mechanisme (souvent sous forme de methylation) pour proteger leur ADN genomique de la degradation par les enzymes endogenes.  [...]

[Biotechnologie] Fragilisation d'une paroi de champignon

j'essaie d'extraire l'ADN des spores de ma petite bete mais rien y fait donc s'il y a des gens qui pourrait me donner des pistes plutot enzymatiques pour fragiliser voir détruire la paroi d'une spore de champignons je suis préneuse.  [...] en effet ça serais plus simple mais cette souche est difficile à faire germer il faut environ 2 à 3 mois pour qu'elle germe d'où l'intéret de pouvoir récuperer son ADN avant qu'elle germe. Je sais bien que le risque de dégradation de l'ADN est important en utilisant des enzymes mais je pense que c'est une bonne solution.  [...]

[Génétique] Questions à propos de la thérapie génique

Le vecteur peut être intégré en même temps que le gène qu'il porte. C'est le cas des vecteurs basés sur le VIH notamment, sauf erreur de ma part. Dans les cas où seul le gène d'intérêt est intégré, le reste est tout simplement dégradé par les DNases (les enzymes responsables de la dégradation de l'ADN).  [...] Donc, pour revenir à ta question le vecteur doit etre de petite taille car cette petite taille lui assure une certaine stabilité ce qui permet l'insertion de grands fragments d'ADN étranger, en effet plus le matériel génétique viral résiduel sera petit plus le transgène pourra être grand, mais en ce qui concerne la stabilité.  [...]

besoin d info sur la transfo des levure au PEG

Les levures possedent une paroie pour maintenir leur forme, on fait souvent des digestions des paroies des levures pour des manips tels que extraction adn genomique ou dans les techniques de microscopie. Ca depend donc si tu digere ta paroie avant des transformer tes levures ce que je ne fait jamais (les enzymes necessaires a la degradation de la paroie sont cheres).  [...] L acetate de Lithium agit en permeabilisant la menbrane afin de faciliter l entree du plasmide. Le plasmide est melangé avec un ADN entraineur (carrier) qui facilite egalement l entree du plasmide. Les Peg par sa viscosite garde les cellules encontact avec l adn et facilite l adsorption.  [...]

urgent: recombinaison chez les bactéries

salut, pour les recombinaisons homologues ches les bactéries, elles sont basées sur l'homologie des séquences entre l'ADN exogène et l'ADN de la bactérie receptrice, c'est des régions d'environ 200pb similaire entre les deux ADN, c'est une sorte de reconnaissance, un prérecquis pour la recombinaison et l'introduction d'une molécule d'ADN exogène.  [...] pour les gram + l'ADN exogène passe un des deux brins dans la cellule avec dégradation enzymatique (nucléase) de l'autre brin. l'adn est donc entré dans la cellule sous la forme mononbrin.  [...]

empreinte à la DNase I

Sinon en général a 15 la DNase marche bcp moins bien qu'a 30°c si le complexe et faiblement attaché a l'ADN (donc ne le protege que aprtiellement) alors on aurait eut une différence, si ce n'est pas le cas, ca signifie que le complexe est fortement lié a la DNAse et protege efficacement l'ADN de la degradation.  [...] et d'ailleurs c'est pas plutot le complexe qui est fortement lié à l'ADN et pas la DNase qui est selon moi juste l'enzyme qui assure la dégradation de l'ADN non protégé.  [...]

[Microbiologie] dégradation de l'ADN

1) J'ai du mal à voir le lien entre mutation et dégradation d'ADN. Peut être tout simplement un protocole peu efficace. A savoir que les protocoles des kits donnent rarement les résultats espérés, faut souvent adapter en fonction de sa bêbête.  [...] merci d'avoir répondu à mes questions, mais maintenant on doit se focaliser sur la dégradation D'ADN presque tous mes collègues rencontrent le même problème pour la souche Mycoplasma meleagridis sachez qu'on travaille dans les normes, je ne sais pas franchement à quoi est dû spécialement pour cette espèce, je me suis posée la question % à la présence de Dnase mais si c'étais le cas ça ne marcherait pas pour toutes les espèces aidez moi s'il vous plaît sachant qu'on utilise la méthode d'extraction d'adn au phénol chloroforme.  [...]

[Biologie végétale] synthèse cDNA double brin

Je dois synthétiser de l'ADNc double brin à partir de 10µg d'ARN totaux. J'utilise le kit Double stranded cDNA synthesis d'Invitrogen (enzyme superscript II).  [...] Après la RT et l'étape de dégradation avec la RNase, as-tu effectué une purification de tes ADNc pour te débarrasser de toutes les enzymes et tampons utilisés.  [...]

[Génétique] re genome

ce sont des nucléases (enzymes degradant les acides nucleiques) qui commencent la degradation soit du coté 5' soit du cote 3'.  [...] De plus, contrairement aux endonucléases, les exonucléases commencent la dégradation de l'ADN à partir d'une des extrémités du brin et non pas au sein de la molécule.  [...]

trancription de l'ADN

- De nombreuses enzymes dont les ARN polymérases. Ces ARN polymérases vont catalyser la synthèse du brin d'ARN. Les nucléotides isolés, vont former le nouveau brin d'ARN en se placant un par un en face de leur base correspondante (A en face de T, G en face C, C en face de G, et petite différence avec l'ADN, en face de A, on aura un U (et non un T).  [...] - ils viennent d'une dégradation des ARN (pour les ADN je ne sais pas vraiment quels ADN pourraient êtres dégradés Oo celui des cellules mortes ADN exogène ).  [...]