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[Biologie Moléculaire] Western blot sur des echantillons de foie murins

Merci pour les protocoles. C'est tres gentil. Mais pour les lysats, je ne parlais pas de cellules en culture, mais de fragment d'organes. Il s agit du foie de souris. As tu un protocole.  [...] oui, je me ferai aider. Mais avant j ai quand meme besoin d un protocole.Le probleme c'est que je pars de rien. Dans le labo, ils ont dosè d autres proteines, pas celles la. De plus, ils le font souvent sur des cellules en culture. Cest pour cela que je suis un peu perdue. J'attens ton message demain.  [...]

rats KO

Enfin certes la recombinaison homologue est théoriquement possible chez tous les mammifères mais à condition que l'on puisse maintenir les cellules ES de l'espece en culture, ce qui n'est pas le cas chez le rat il me semble...(car on transfecte les cellules ES par un vecteur contenant le marqueur, on selectionne les cellules ES ayant intégré le vecteur et on les réinjecte dans un blastocyte que l'on implante chez une mère porteuse).  [...] D'autre part, maintenir des cellules ES en culture ne pose pas de problème particulier, c'est de la culture cell classique. En ce qui concerne les cellules ES (Embryonic Stem Cell), ce sont des cellules d'embryon de souris et pas d'un autre organisme (la lignée ES est une lignée murine).  [...]

[Biotechnologie] Clonage humain.

On prend un ovocyte, énucléé (là réside le problème semble-t-il) et on le cultive après greffe d'un nouveau noyau. On obtient quelques cellules souches indifférenciées... Comment fait-on alors pour obtenir des cellules différenciées (muscle, pancréas...) pouvant être utilisées pour des malades Il faut aller jusqu'à un stade embryonnaire avancé.  [...] - Et ces facteurs sécrétés par des cellules différenciées dans les milieux de culture, et rajoutés de manière empirique... font-ils l'objet d'étude spécifiques.  [...]

la maladie de la mozaïque chez un foetus

Là où je voulais en venir avec ma phrase un peu tordu c'est que lorsque l'on fait des souris KO et que l'on réimplante des cellules ES modifiés dans un blastocyste, on obtient des chimères parce que les cellules injectées n'ont pas le même génotype que les cellules du blastocyste dans lesquelles on les injecte.  [...] Merci c'est un peu plus claire. Mais dans ce cas là on peut considérer que toutes les cellules sont mosaïque parceque elles inactivent des gènes selon leurs besoin.  [...]

[Biologie Cellulaire] prolifération et différenciation cellulaire

Pour en revenir sur l'aspect différenciation et prolif, il me semble que avant la lactation, la differenciation en cellules epithéliales lactantes est précedé par une phase de prolif des cellules de stade moins différenciés puis leurs différenciations. Avant leur différenciation terminales, les cellules embryonnaire ont également une forte capacité à proliférer (il me semble que l'injection de ces cellules embryonnaire à donner des masse avec des caractéristiques tumorales chez la souris).  [...] Oui cela peut-être un moyen de procéder. Les cellules sont bloquées à des stades plus ou moins avancés de la différenciation et la détermination du type cellulaire final peut se faire par détermination des marqueurs membranaires en fonction du stade de blocage, etc.  [...]

[Biologie Cellulaire] histologie

les cellules cardionectrices sont pauvres en myofibrilles, et donc d'apres votre raisonnement cela est du à linterromption de leur differenciation en myocytes suit à des mecanismes que jignore, au cour du developpemnt embryonnaire. ce qui fait que la formation du tissu s'arrete à ce niveau là, du coup il garde cet aspect embryonnaire.c'est ce que jai compris de votre reponse.  [...] Je peux vous éclairer quand au développement au niveau de la souris. Les premières cellules cardiaques ne présentent qu'une caractéristique contractile faible. Pour propoger les premiers phénomènes contractiles, la cardiac jelly est mise en jeu.  [...]

gênes de fluorescence

J'ai fais des recherches sur la fluorescence dans le cas d'un travail à rendre. J'ai pu voir chez la souris le gène GFP qui lui permet d'exprimer une fluorescence au niveau de la peau, mais pas au niveau des poils car ils sont constitués de cellules mortes.  [...] Et je me demander après avoir vu plusieurs photos d'animaux avec le poils fluorescents si il exister un gènes qui permet que la fluorescence reste dans les cellules pileuses mortes ou si ce n'est qu'un trucage photo.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr

je voudrai faire une PCR pour chercher la présance de cellules allogénique de souris C57 dans differants organes de souris receveuse Balb /c pour cela j'ai besoin d'acheter des primer du gene H2-b pour cette PCR or je ne c'est pas vers quel fournisseur je peux m'adresser, invitrogen me dit que c'est à moi de construire la séquance génétique des primer mais g peur de faire n'importe quoi pouvez vous m'aider.  [...] je crain qu'il n'ai eu conffusion je ne cherche pas à amplifier l'histone H2B mais je cherche à amplifier le gene H-2b de la souris C57BL/6 ( qui est l'équivalent du systeme HLA chez l'homme ) et j'ai fais exactement ce que vous m'avez dit mais ça ne marche pas du tout. pouvez vous essayer de votre côté.  [...]

[Physiologie] Souris CD1

Les souris ne possèdent pas de molécules CD1 de groupe 1. À l'inverse elles possèdent deux copies de CD1D. Les souris sont donc très utilisées pour étudier et comprendre le rôle de CD1D et des cellules NKT dans différentes maladies.  [...] En fait ils ont produits NSP4 en inséré son gène dans un bacculovirus et ils ont infectées des cellules SF9 avec ce bacculovirus pour que les cellules produises NSp4.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN bactéries lactiques

On utilise ca pour extraire les ARN totaux de cerveaux de souris et de nos cultures cellulaires (=. et donc pourquoi pas bactéries..).  [...] Le problème principal venait de la quantité initiale de cellules. au lieu de partir de 1 ou 2 ml de culture comme recommandé, je suis parti de 4 à 8 ml de culture en milieu de phase exponentielle de croissance.  [...]