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[Biologie Cellulaire] Culture primaire de fibroblastes de souris

J'essai aussi de mettre en culture des cellules musculaires lisses de souris (issues d'aortes) mais je n'arrive pas à en obtenir même en suivant le mode opératoire du labo (découpe de l'aorte en petit morceaux, digestion 45min à la Collagénase I, centrifugation et mise en culture dans DMEM 20%) quelqu'un aurait une méthode.  [...] J'ai besoin des retour de personnes qui font de la culture primaire de cellules de souris, je n'ai jamais rencontré ce type de problème avec des cultures primaires de fibroblastes humains (bien plus facile à cultiver... ).  [...]

[Biologie Cellulaire] cellules ES

est ce que quelqu'un saurait comment différencier des cellules ES de souris en cellules qui prolifèrent assez rapidement. quel milieu de culture utiliser, quels facteurs de croissance.  [...] Pourquoi tu ne parts pas directement de lignées cellulaires de souris type NIH3T3.  [...]

rats KO

Enfin certes la recombinaison homologue est théoriquement possible chez tous les mammifères mais à condition que l'on puisse maintenir les cellules ES de l'espece en culture, ce qui n'est pas le cas chez le rat il me semble...(car on transfecte les cellules ES par un vecteur contenant le marqueur, on selectionne les cellules ES ayant intégré le vecteur et on les réinjecte dans un blastocyte que l'on implante chez une mère porteuse).  [...] D'autre part, maintenir des cellules ES en culture ne pose pas de problème particulier, c'est de la culture cell classique. En ce qui concerne les cellules ES (Embryonic Stem Cell), ce sont des cellules d'embryon de souris et pas d'un autre organisme (la lignée ES est une lignée murine).  [...]

[Biologie Cellulaire] MEK et tumeur...

Du point de vue de l'oncogenèse chez la souris il apparait que Ral n'est pas un effecteur majoritaire de la transformation tumorale médiée par Ras mais par contre dans les cellules humaines c'est Ral qui prédomine face à la PI3K et Erk ce qui suggère 2 mécanismes distincts pour l'oncogenèse Ras dépendante chez l'homme et chez la souris.  [...] Ex vivo en culture cellulaire, RalA permet la croissance des cellules tumorales en abscence de substrat alors que RalB favorise la survie des cellules cancéreuses et la migration. In vivo chez la souris, RalA permet la formation de tumeur et RalB est impliquée dans le processus métastasique.  [...]

[Physiologie] Le CO2 a-t-il du gout?

Je voudrais vérifier que ce gène, qui est conservé chez l'homme, est fortement exprimé dans les cellules de l'acidité. Est-il possible de mettre ce type de cellules en culture.  [...] Dans le meme ordre d'idée comment prélever, isoler et mettre en culture des cellules gustatives à partir de biopsie de papilles Est-ce simplement possible.  [...]

Culture de cellules primaires et lignées cellulaires

_ Une culture primaire, c'est une culture cellulaire faite avec des cellules directement issues d'un tissu. Exemple. je prélève le foie d'une souris, je dissocie les cellules, j'isole, je mets en culture dans un milieu adéquat. Dans ce cas, c'est une culture primaire d'hépatocytes.  [...] Tu peux faire ça avec tout type cellulaire, sous réserve qu'un milieu existe pour les maintenir en vie dans une boîte. Rien à voir avec des cellules souches, rien à voir avec leur pluripotence ou autre Je n'en ai jamais fait personnellement mais ces cultures sont habituellement plus délicates à manipuler car elles ne se multiplient pas et meurent facilement.  [...]

[Génétique] maladie génétique/héréditaire

les maladies multifactorielles impliquent très souvent la présence simultanée de nombreux allèles de gènes différents, et ayant chacun un effet limité. Chacun de ces variants génétiques, considéré isolément, n'est ni indispensable ni suffisant pour entraîner la maladie.   [...] Exemple, une hypercholestérolémie (bien que certaines formes soient monogéniques). on peut se pencher sur les gènes du métabolisme du cholestérol et voir s'il y a des variants. Ensuite, on peut tester l'effet de ces variants in vitro en culture de cellules ou même développer un modèle de souris mutantes, et ainsi voir l'effet de ce variant sur le phénotype considéré.  [...]

[Biologie Moléculaire] Western blot sur des echantillons de foie murins

Merci pour les protocoles. C'est tres gentil. Mais pour les lysats, je ne parlais pas de cellules en culture, mais de fragment d'organes. Il s agit du foie de souris. As tu un protocole.  [...] oui, je me ferai aider. Mais avant j ai quand meme besoin d un protocole.Le probleme c'est que je pars de rien. Dans le labo, ils ont dosè d autres proteines, pas celles la. De plus, ils le font souvent sur des cellules en culture. Cest pour cela que je suis un peu perdue. J'attens ton message demain.  [...]

[Biologie Cellulaire] Aide pour culture en boite de Pétri de cellules type cellules d'oignons.

Je pensais, mettre en culture des cellules, les laissez se developper puis utiliser mon projet sur une protéine vitale des cellules et voire si la culture meurt ou pas. Si la culture meurt, mon projet se revelera efficace et j'aimerai le tenter sur des plantes puis des souris.  [...] Pour ce qui est de la culture de cellule en elle même, j'ai bien peur de ne pas pouvoir te conseiller. Mis à part te dire que tu n'a pas nécessairement besoin de voir le noyau. Des cellules il en existe des tonnes. voir ici.  [...]

[Biologie Cellulaire] Culture de fibroblastes équins

La digestion. Avec de la collagénase, tu fais digérer les tendons,et après des lavages pour éliminer la collagénase, tu mets en culture les ténocytes qui auront été extraits. Il faut juste trouver la bonne concentration de collagénase. L'avantage avec cette technique, c'est que tu obtiens des cellules de tendons rapidement mais le risque est de flinguer tes cellules si trop de collagénase.  [...] J'ai montré mes plaques à un collègue d'un autre labo et j'ai apparement des fibroblastes mais apparement ils sont trop allongés et j'ai aussi pas mal de cellules rondes qui indiquerait qu'elles sont mortent.  [...]