• Forum - Culture, Cellules, ARNm

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN Lignée cellulaire et Bactérie

J'aimerai profiter de votre savoir vis à vis de l'extraction d'ARNm dans le cas suivant. Je vais mettre en culture des bactéries (lactique) sur des cellules (HT-29) pendant quelque. En fin de cinétique j'aimerai pouvoir isoler l'ARN Bactérien ainsi que l'ARN eucaryotes.  [...] même si je ne vois pas bien l'intérêt de mettre des bactéries en culture sur des cellules si tu veux séparer les ARNm distinctement pourquoi ne pas essayer une centrifugation. Ensuite tu extraits une des deux ou les deux phases et tu fais ton extraction.  [...]

[Journal club] Extinction de l'expression de gènes par les siRNA : la découverte

En revanche, l'introduction d'ARN double brin de 38 à 1662 nucléotides dans des cellules de mammifères en culture déclenche une dégradation non spécifique de tous les ARNm cellulaires (Ui-Tei et al., FEBS Lett., 2000) aboutissant à la mort de la cellule.  [...] , Genes and Development, 2001). Il ne reste alors qu'un pas décisif à franchir pour montrer que les siRNA sont capables d'éteindre des ARNm cibles de façon spécifique au sein de cellules en culture.  [...]

[Biotechnologie] ADNc

Oui exactement, l'ADNc ne contient que les exons et seulement ceux qui sont exprimés dans un seul ou un nombre limité de types cellulaire.  [...] L'ADNc est utilisé essentiellement pour la préparation de banque d'ADNc, constituée à partir d'ADN complémentaire (qui est obtenu par transcription inverse de l'ARNm d'un organe, d'un tissu ou de cellules en culture).  [...]

[Microbiologie] Exo d'SVt

première courbe qui correspond à l'incorporation d'uridine dans les ARNm des cellules. L'incorporation ne pouvant se faire qu'en cours de synthèse on en conclue que ce que l'on observe c'est la mise en place de la synthèse des ARNm dans la culture.  [...] Conclusion générale. la synthèse des ARn messagers se fait avant la synthèse protéique ce qui ne va pas nous étonner étant donné que la synthèse protéique repose sur la traduction des ARNm par les ribosomes. (5 minute pour répondre à ca).  [...]

[Biologie Cellulaire] Cellules eucaryotes sans noyau

Les tubes criblés du Phloème qui assurent la conduction de sève élaborée, sont constitués de files de cellules vivantes allongées, sans noyau. Ces cellules s'associent avec d'autres cellules sSurs dites compagnes = petites cellules collées contre celles-ci et très actives qui vont assurer le métabolisme des ces cellules énuclées en produisant leurs ARNm etc.  [...] Les tubes criblés du Phloème qui assurent la conduction de sève élaborée, sont constitués de files de cellules vivantes allongées, sans noyau. Ces cellules s'associent avec d'autres cellules soeurs dites compagnes = petites cellules collées contre celles-ci et très actives qui vont assurer le métabolisme des ces cellules énuclées en produisant leurs ARNm etc.  [...]

[Génétique] la génétique

ok je veux comprendre. lors de la transcrption puis la traduction de l'ARNm est-ce que les cellules subissent le même mécanisme ce que notre prof nous a dit que les cellules sexuelles n'ont pas donc pourquoi se fait ce mécanisme.  [...] Vous dites que les cellules somatiques transcrivent puis traduisent des ARNm et que ce ne serait pas le cas dans les cellules germinales. Si c'est bien cela qu'il fallait comprendre dans votre texte, c'est faux. Évidemment, les cellules germinales transcrivent et traduisent elles aussi des ARNm et ce par les mêmes mécanismes que toutes les autres cellules.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transcription ARNr/ARNm

Il est clair que les ARNm sont minoritaires dans une cellule. Vous imaginez la quantité d'ARNt, et d'ARNr qu'il faut pour fabriquer une cellule.  [...] Je pense que ce genre de chiffres a pu être obtenu simplement en extrayant les ARN totaux d'un organisme, de levures, ou de cellules en culture. Pour les ARNm c'est super simple, on les capte sur une colonne poly T et on peut faire le ratio de l'éluat sur les ARN totaux.  [...]

L1/ARNm

FAudrait deja que tu nous donnes plus de precision... a partir de quelles cellules un ARNm particulier ou tous les ARNm chez une cellule eucaryote ou procaryote... tout cela conditionne la reponse a ta question.  [...]

[Biochimie] ARN interférent

Chez les mammifères, en ARN interférence on est obligé d'utiliser des siRNA ou des shRNA qui sont en plutôt des plasmides codant pour des shRNA. On ne peut pas utiliser de dsRNA chez les mammifères sinon cela induit une réponse appelée la réponse interféron qui est un système de défense des cellules de mammifères contre les virus à ARN.  [...] La réponse interféron induit la dégradation de l'ensemble des ARNm de la cellule. Donc la spécificité est nulle. Voilà pourquoi on utilise les siRNA et shRNA sur ces cellules qui eux permettent de cibler spécifiquement la dégradation d'un ARNm particulier.  [...]

[Génétique] manipulation génétique

Le code génétique est éffectivement universel. Le gène de l'insuline humaine, combiné avec un promoteur efficace, sera effectivement transcrit dans des cellules végétales pour produire des ARNm puis ces ARNm seront traduits par les ribosomes de la plante pour produire des protéines.  [...] Il y a toutes les chances pour que ces modifications se passent mal dans une cellule végétale et qu'on aboutisse à une protéine non fonctionnelle. Mais dans certains cas, ça marche. C'est ce qu'on appelle la transgénèse, du maïs avec un gène de bactérie, des drosophiles avec un gène de méduse, des souris avec un gène humain.  [...]