• Forum - Coupure, Niveau, Protéine

[Biochimie] site de coupure de l'alcalase

voila, j'ai une petite question. savez vous quel est ou quels sont les sites de coupure de l'alcalase au niveau de la protéine, autrement dit après quels acides aminés cette enzyme coupe la liaison peptidique.  [...]

extraire de l'ADN

j'ai trouvé quelque chose à propos de ça mais en anglais et çava perdre beacoup de temps pour que je pourrai comprendre, j'ai quelques information sur l'EDTA c'est qu'il est un chélateur des ions ( il attire certain ions comme le Mg2+ par formation des liaison covalents ) et qu'il est un inhibiteur de nucléase ( je ne comprend ni le mécanisme ni le fonctionnement de cet effet ).   [...] La méthylation (dans le cadre de la protection contre des enzymes de restriction) est effectué par des méthyltransférases qui vont reconnaître un site de coupure d'une enzyme de restriction et vont ajouter un groupement méthyle au niveau de ce site (souvent au niveau d'une cytosine).  [...]

Coupure chiasma

Voilà j'ai besoin d'aide concernant l'optique, je voudrais savoir lorsque l'on fait une coupure au niveau du chiasma, nerf optique et au niveau de la bandelette optique qu'elle sont les conséquence sur le patient.  [...] par exemple est ce que si l'on fait une coupure au niveau du chiasma il y aura perte du champ visuel temporal des deux yeux mais conservation du champ visuel nasale des deux yeux.  [...]

[Biologie Moléculaire] purif des proteines recombinantes apres coupure au facteur X

Apres passage par la colonne Nickel pour récupérer la protéine recombinante (sachant que la chaperonne fait 50 Kd et ma proteine d'interet fait 25 Kd) comment dois-je procéder (après coupure au facteur X) pour récupérer le maximum de protéine et éliminer tous l'imidazole (l'imidazole est dangereux pour la suite de ma manip).  [...] mais j'ai eu un probleme au niveau de la conservation des clones utilisés (cryoconservation dans le glycerole à -80°C), quand je relance une culture (peu de temps apres) à partire du glyerole (le glycerole est fait à partire de la pr éculture dans laquelle je n'ai pas encore mis l'IPTG), là c'est surprise mes bacteries poussent (dans un milieu LB Ampicilline) mais ils produisent moins la proteine (on dirai qu'elles perdent l'induction par l'IPTG) est ce qu'il y a quelqu'un qui a deja eu ce genre de probleme.  [...]

Irritation, démangeaisons col de l'urétre

Voilà j'ai eu un rapport non protégé assez violent ac une amie qui était en fin de règle. Le lendemain matin je me suis réveillé ac le gland un peu engourdi. Le soir venu je me suis cette fois masturbé assez violement au point de me faire mal et d'arrêter.  [...] Le probleme c'est que depuis ces évènements j'ai eu comme l'impression d'avoir des fournis dans l'uretre au niveau du gland et lorsque j'urinais cette meme parti me picotais un peu. Ca fait 3 semaines, maintenant les fourmillements ont disparus j'ai juste la sensation de picoti qd j'urine.  [...]

[Biologie Moléculaire] Utilisation de la trypsine pour un test de repliement des protéines

Je viens de découvrir une nouvelle méthode qui consiste à traiter des extraits cytoplasmique avec de la trypsine (1, 3, 10...µg/ml) pendant 5 min, faire un western blot avec un anticorps pour la (les) protéine(s) d'intérêt et regarder si les bandes observées sont à hauteur attendue (bonne taille en KDa), ou avec des tailles inférieures ou si elles ont complétement disparu.  [...] Si les protéines sont résistantes à un traitement à la trypsine à forte concentration c'est qu'elles sont bien repliées et donc moins accessibles à cette protéase.  [...]

[Génétique] Plasmide F et résistance aux antibiotiques

une coupure simple-brin peut être produite au niveau du module Mob (tu as donc un nicked plasmid ), il passe avec le plasmide conjugatif.  [...] Ca fonctionne en gros (enfin, c'est l'hypothèse actuelle) comme des RNAi chez les bactos Mais comme c'est nouveau, on n'arrive pas trop à le reproduire en labo, j'ai le collègue d'à côté qui est actuellement reviewer pour un nouveau papier dessus, ça promet.   [...]

Rénine

Une exopeptidase coupe la liaison entre le premier aa et le second (ou dernier et avant-dernier). D'après ce que j'ai pu voir sur l' angiotensine, il n'est pas question de cliver uniquement un acide aminé, mais plusieurs en une fois, donc il s'agirait bien d'une endoprotéase à mon avis.  [...] d'accord avec Gordak. Le site de coupure ne se trouve pas en bord de protéine, donc endo. (même principe avec les endo/exonucléases).  [...]

sensibilité de OriC à la méthylation pour l'opéron tryptophane

Le système de correction dont tu parles n'est pas uniquement lié à Dam, mais surtout aux protéines Mut (S, H, L) qui ont la fonction correctrice. (Si tu ne vois pas de quoi je parle, je t'expliquerai. Sinon, désolée de pinailler, je voulais juste être sûre c'est trop bête de se faire avoir lors d'un oral pour une notion un peu approximative).  [...] MutH va couper au niveau de ces GATC non méthylés. Et quand je dis couper, je parle d'une simple coupure entre 2 nucléotides, pas plus.  [...]

[Biologie Moléculaire] Le transfert de la f-Met de son ARNtf-met

Chaque tRNA entre via le site A et lie son acide aminé à la chaine polypeptidique tenue par un autre tRNA situé au site P, le ribosome se transloque et se déplace sur le brin d'ARN, le tRNA du site P libère la chaine polypeptidique et sort via le site E, le tRNA qui était au site A arrive sur le site P en tenant la chaine polypeptidique pour permettre à un nouveau tRNA de venir en A pour continuer la synthèse. Et ainsi de suite.   [...] c- terminaison. au niveau du codon stop, dissociation du système. libération des 2 sous unités du ribosome, hydrolyse de l'ARNm, coupure du 1èr AA (met) du polypeptide ainsi synthétisé.  [...]