• Forum - Couple, Enzyme, Substrat, Conditions, Température

BIOCHIMIE : VRAI-FAUX glucides et enzymes

.. le Km est il alors caractéristique d'un couple enzyme substrat dans des conditions de température, de ph et de force ionique données.  [...] Le Km est il alors caractéristique d'un couple enzyme substrat dans des conditions de température, de pH et de force ionique données. oui, et d'ailleurs c'est le cas de toutes les constantes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Biotine - Avidine

Il me semblait bien que le couple avidine-biotine forme des liaisons de force quasi covalente, j'ai des constante d'association de l'ordre de 10e15. Pour ce qui est de l'étude de la structure 3D, je vais m'y mettre immédiatement mais les premiers résultats que j'ai pu trouver semble indiquer que l'avidine à une structure plutôt cubique (6nm x 5,5nm x 4nm) et que les 4 sites sont répartie de la façon suivante.  [...] A vrai dire je compte utilisé ce couple pour retenir une enzyme sur un substrat, j'avais peur que ça soit pas assez solide au début, bah maintenant j'ai peur que ça soit trop fort comme liaison... Et du coup les conditions de découplage sont absolument drastique, voir impossible (En tout cas si ton labo n'a pas eu la chance d'être posé sur le sommet d'un volcan en éruption).  [...]

[Biologie Cellulaire] Récepteurs d'affinité, unité M, signalisation

L'affinité est une constante qui permet de savoir si une enzyme (ou un récepteur) reconnait très bien, moyennement ou mal son substrat. En d'autre terme la valeur du Kd est la concentration minimum de substrat à partir de laquelle l'enzyme (ou le récepteur) va reconnaitre et interagir avec son susbtrat.  [...] Donc par exemple, si on prend un couple enzyme/substrat avec un Kd de 10µM, cela signifie qu'il faut que le substrat soit au moins concentré à 10µM pour que la réaction se fasse. Donc un couple enzyme/substrat dont le Kd est égal à 10µM sera beaucoup moins afin qu'un couple enzyme/substrat dont le Kd est égal à 5pM par exemple.  [...]

Vecteur de clonage, PCR et vecteur d'expression

Je pense Nhyma que tu as une fausse notion du double hybride car il ne sert pas a verifier la presence d'une enzyme, et n'a rien a voir avec le substrat de l'enzyme.  [...] Ouaip justement, l'enzyme interagit avec son substrat. Il me semble que le probleme posé est sur le clonage de l'enzyme. POur savoir si l'enzyme a parfaitement ete cloné on prend l'extrait que l'on a obtenu suite aux experiences de PCR pratiquées et on pratique un double hybride avec cet extrait couplé au Db et le substrat couplé au AD.  [...]

[Immunologie] Analyse réponse humorale par ELISA

Pour la révélation, nous avons utilisé un anticorps secondaire couplé à la phophatase alcaline (AP) puis nous avons ajouté le substrat (PNPP) de cette enzyme. Jusque là tout va bien. Ce que je ne comprends pas, c'est pourquoi nous avons dilué le substrat dans du tampon diéthanolamine.  [...] je ne serais pas d'une grande aide mais le seul élément que je peux apporter à ta question c'est que le tampon diéthanolamine a remplacé le tampon glycine/NaOH car il s'est révélé plus efficace. En quoi Je ne sais pas.   [...]

[Immunologie] Elisa

ELISA ou Elisa est l'acronyme d'un examen de laboratoire appelé en anglais. Enzyme-linked immunosorbent assay = essai d'un immunosorbent lié aux enzymes. Synonyme. EIA = enzyme immuno assay. C'est une technique biochimique utilisée en immunologie pour détecter la présence d'un anticorps ou d'un antigène dans un échantillon.  [...] La technique utilise deux anticorps, l'un d'entre eux étant spécifique à l'antigène et l'autre étant couplé à une enzyme. Le second antigène confère à l'essai son nom de enzyme-linked = lié aux enzymes, et provoquera chez un substrat chromogène ou fluorogène la production d'un signal.  [...]

[Biologie Moléculaire] Immunohistochimie/ Immunomarquage

De ce que je me rappelle les deux termes évoquent la même chose. Et le test ELISA en est un bel exemple. On peut mettre en évidence la présence d'une protéines, Ag, etc... d'intérêt à l'aide d'anticorps primaire, secondaire couplé à une enzyme dans le cas de l'ELISA.  [...] Pose de l'anticorps primaire,rincage, anticorps secondaire couplé à une enzyme, rincage. Ensuite, tu ajoutes le substrat et atteint que la réaction se fasse. Si ta molécule d'intérêt était présente et que tous les autres Ac ont réagi alors l'enzyme couplé au secondaire réagit avec le subtrat et ta solution devient jaune.  [...]

[Divers] Espèces Bioluminescentes

La bioluminescence en labo est obtenue par le couple luciférine (substrat)/luciférase (enzyme), pour les deux vous en aurez aussi pour plusieurs centaines d'euros. Mais ça serait de la vraie bioluminescences, pas de la chimiluminescence.  [...] -le substrat. comme c'est des woodlovers (decomposeurs du bois) ces champignons peuvent se develloper sur des copeaux, de la paille hachée, du carton.  [...]

[Biochimie] Les bactéries bioluminescentes

Il y a bien une réaction chimique (une oxydation dans la plupart des cas), le système majoritaire étant le couple luciférase (une enzyme)/luciférine (son substrat). Chez les bactéries, la luciférine est remplacée par du FMN réduit.  [...] Cependant, pour les bactéries symbiotiques, l'apparition de l'enzyme luciférase et du substrat aldéhyde RCHO est codé selon le principe du Quorum Sensing.  [...]

Lire un test HIV

En effet dans le cas d'une recherche d'antigene, tu utilises un anticorps primaire qui le reconnait, puis tu utilises un anticorps secondaire, qui reconnait ton anticorps primaire. L'anticorps secondaire etant couple a une enzyme qui va reagir avec son substrat et te donner la coloration mesuree par la densite optique.  [...] Comme plusieurs anticorps secondaires se fixent en meme temps sur l'anticorps primaire tu as une amplification du signal, enzyme l'enzyme va degrader plusieurs molecules de substrat (re-amplification du signal).  [...]