• Forum - Couple, Enzyme, Réaction, échantillons

[Biochimie] marquage à la digoxigenine

Mes chères amies, aidez moi a comprendre comment peut on détecter la digoxigenine lors de la détection de certaines séquences d'ADN lors de la PCR-ELISA.D'après ce que j'ai trouver sur le net, on peut la détecter par une enzyme spécifique, si c'est vrai laquelle.  [...] Merci Zellus de m'avoir corriger, je voulais dire un anticorps couplé à une enzyme et cette enzyme va engendrer une réaction colorée qui nous permettra de visualiser les échantillons positifs.  [...]

[Biologie Cellulaire] Récepteurs d'affinité, unité M, signalisation

Donc par exemple, si on prend un couple enzyme/substrat avec un Kd de 10µM, cela signifie qu'il faut que le substrat soit au moins concentré à 10µM pour que la réaction se fasse. Donc un couple enzyme/substrat dont le Kd est égal à 10µM sera beaucoup moins afin qu'un couple enzyme/substrat dont le Kd est égal à 5pM par exemple.  [...] Mais attention tu verras peut-être plus tard que de nombreuses enzymes intervienent dans la signalisation cellulaire. Un récepteur peut par exemple être considéré comme une enzyme car il a une activité de catalyse bien précise, et c'est la même chose pour toutes les kinases, les phosphatases, les GTPases, les phospholipases, etc.  [...]

[Biologie Moléculaire] Immunohistochimie/ Immunomarquage

De ce que je me rappelle les deux termes évoquent la même chose. Et le test ELISA en est un bel exemple. On peut mettre en évidence la présence d'une protéines, Ag, etc... d'intérêt à l'aide d'anticorps primaire, secondaire couplé à une enzyme dans le cas de l'ELISA.  [...] Pose de l'anticorps primaire,rincage, anticorps secondaire couplé à une enzyme, rincage. Ensuite, tu ajoutes le substrat et atteint que la réaction se fasse. Si ta molécule d'intérêt était présente et que tous les autres Ac ont réagi alors l'enzyme couplé au secondaire réagit avec le subtrat et ta solution devient jaune.  [...]

[Biochimie] Les bactéries bioluminescentes

Il y a bien une réaction chimique (une oxydation dans la plupart des cas), le système majoritaire étant le couple luciférase (une enzyme)/luciférine (son substrat). Chez les bactéries, la luciférine est remplacée par du FMN réduit.  [...] Merci pour ta réponse, mais je doute toujours. Mon problème, c'est qu'en cherchant sur des sites, il est écrit pour les 2 autres types de bioluminescence qu'une réaction a lieu, mais pour celle avec les bactéries symbiotiques, il est juste écrit sa.  [...]

BIOCHIMIE : VRAI-FAUX glucides et enzymes

et j'aimerais aussi savoir si le Km est une valeur caractéristique d'un couple enzyme substrat... d'un coté je me dis que oui car sinon pourquoi cette valeur aurait autant d'importance, mais d'un autre coté comme la température, le ph et les ions influent sur la vitesse initiale de réaction, ils ont aussi une influence sur le Km.  [...] Le Km est il alors caractéristique d'un couple enzyme substrat dans des conditions de température, de pH et de force ionique données. oui, et d'ailleurs c'est le cas de toutes les constantes.  [...]

[Biologie Cellulaire] Anticorp anti-espece et Western Blot

L'anticorps secondaire (que tu as nommé AC2) est celui qui va te permettre de mettre en évidence la réaction AC1-protéine d'intérêt. cet anticorps (AC2) sera couplé à une molécule qui permettra la révélation (en général l'enzyme HRP, peroxydase de raifort).  [...] Cet anticorps sera lui dirigé contre l'anticorps primaire, c'est un Ac anti AC1. Par conséquent dans l'exemple, si tu as utilisé un anticorps de souris comme AC1, l'AC2 sera un anticrops anti anti-corps de souris, produit par exemple chez le lapin. le couple AC1-AC2 n'est pas produit dans la même espèce animale, puisque l'AC2 est censé reconnaire l'AC1 comme un antigène.  [...]

[Microbiologie] j'ai pas comprit quelques détails

La réaction de maillard peut être enzymatique (comme la pomme qui brunie) ou non enzymatique et dans ce cas c'est a cause du couple temps température.  [...] Cette réaction peut être désirer, ex le pain doré est une réaction de maillard non enzymatique. Ou pas, ex brunissement du lait trop stérilisé, dans ce cas le produit est bon pour la poubelle.  [...]

[Biologie Moléculaire] Gammes pour calcul de l'éfficacité de la RT-qPCR

dans le labo je fait mes calculs de quantité relative sans le calcul de l'efficacité, cet-à-dire, j'utilise E=2 (efficacité = 100%), mais si je veux faire ces calculs de la quantité relative avec la vrai éfficacité ( E differente de 2), je peux utiliser la même formule R=E^-deltaCp sauf que en se cas le E est differente de 2.   [...] L'efficacité est propre a un protocole donné, c'est à dire amorces, mix réactionnel et programme d'amplification. La seule façon de calculer l'efficacité d'une PCR est de faire une gamme de concentration en parallèle des échantillons pour chaque couple d'amorces utilisé.  [...]

dosage immunologique

Tu incubes ensuite ton échantillon et tu révèles de la même façon que dans le premier cas avecdes anticorps anti-anticorps.  [...] Je permets donc juste une dernière question, plus pratique. Il y a donc au moins deux étapes avant la révelation (1/ incubation de l'échantillon biologique à tester et 2/ dépôt du 2ème anticorps couplé à l'enzyme). mais en pratique lorsqu'une femme fait un test de grossesse par exemple, elle ne dépose que de l'urine sur le test et pas d'anticorps secondaire couplés avec une enzyme, donc comment se fait la détection pour ce genre de test fait à la maison.  [...]

[Biologie végétale] Photosynthèse

Pour ton Mg2+, je ne connais pas la réponse mais ça surement un lien avec l'enzyme. Si ton enzyme n'a pas son atome de métal (= cofacteur), il ne peut pas exercer son activité car ces atomes stabilise la protéine. Bien sur, toutes les enzymes n'ont pas forcément besoin d'un atome de métal mais dans certains cas, il est nécessaire.  [...] Exemple avec l'émoglobine, enlèves l'atome de fer dans cette protéine et tu es sur que le sang n'apporte plus l'oxygène et le CO2 dans l'organisme. Autre exemple, les facteurs de transcription pour la transcription de l'ADN, certains n'ont pas besoin d'atome de fer pour leur activité.   [...]