• Forum - Contrôle, Promoteur, Molécule

[Biologie végétale] Activer un gene

J'aimerais savoir comment procèdent les biologistes moléculaires pour activer un gène(préalablement repéré et dont la fonction nous semble connu)inactif,par exemple pour apparition de membres chez les serpents.  [...] Il y a plusieurs approches mais les plus simples sont de placer ce gène sous le contrôle d'un promoteur inductible par ajout d'une molécule.  [...]

[Génétique] Recombinaison homologue

amyE'(on a enleve un bout du coyte 3').gene tet.un promoteur exogene sensible a une molecule la bacitracine(pbceAB), qui controle le gene cat, puis l'autre morceau 'amyE.  [...] Il n'est pas super clair, ton truc. Le plasmide pBceAB code un transporteur BceAB (type ABC, hein, ABC= ATP-Binding Cassette), ok. Mais est-ce que tu as tout l'opéron bce Quel est le background génétique dans lequel cette expérience est réalisée.   [...]

Différence shARN, miARN et siARN

shARN = transfection stable, ils s'intègrent dans le génome de la cellule hôte (avec possibilité de le mettre sous le contrôle d'un promoteur donné pour réguler son expression).  [...] mais je ne vois pas le lien entre la pol. de l'Aquaporine et celle du sh, a moins que tu parles d'exprimer un sh sous le contrôle du promoteur de l'aquaporine Il n'y a pas de raison que ça ne soit pas possible, j'ai juste eu quelques lectures précisant que l'expression d'un sh est plus performante avec un promoteur polIII que polII (mais ça fonctionne avec un promoteur polII, comme le CMV par exemple, donc pas de raison).  [...]

[Génétique] Opérateur: liaison répresseur et activateur

Quel serait l'équivalent de l'opérateur procaryote chez les eucaryotes Donc quelle est la séquence d'ADN chez les eucaryotes sur laquelle viennent se fixer les répresseurs et les activateurs.   [...] L'organisation du génome Eucaryote est un peu plus complexe. L'équivalent pourrait être ce que l'on appelle la région de contrôle du locus (Gene control region), qui comporte le promoteur (ou un des promoteurs), et des zones de fixation de régulateurs. Ces molécules régulatrices sont bien plus nombreuses et diverses chez les Eucaryotes, et cette région est beaucoup plus grande qu'un opéron procaryote.  [...]

[biologie moléculaire] Opéron lactose

L'IPTG est utilisée notement en biotechnologie dans les cas de productions de protéines recombinantes par un vecteur d'expression que l'on fabriquera avec un gène d'une protéine fusion (le gène lacZ ds ce cas ci) qui permettra une lecture du gène controlée et donc une production controlée de la protéine cible.  [...] C'est là que je ne suis pas sur, mais il me semble que dans certains vecteurs d'expression, le gène LacZ est placé sous le contrôlé d'un promoteur. Ce promoteur nécessite de l'IPTG pour s'activer.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expériences avec le facteur sigmaE

- on cultive des souches MC4100 qui portent un plasmide rapporteur contenant lacZ sous le contrôle d'un promoteur SigmaE dépendant, dans un milieu contenant du lactose à 30°C pour sélectionner les souches LacZ + qui ont bien intégré le plasmide.  [...] - on place ces souches sur milieu McConkey à 43°C =. les colonies rouges (LacZ + ) sont celles qui expriment bien LacZ (normal, puisque SigmaE est activé à haute température, et lacZ est sous le contrôle d'un promoteur SigmaE dépendant).  [...]

[Biologie Cellulaire] probleme de transfection

Normalement je devais cotransfecter dans une lignée cellulaire un plasmide avec le promoteur qu'on étudie et qui contrôle l'Expression de la luciferase, et le plasmide controle codant pour la beta-Gal.  [...] Problème. une fois la transfection finit (seulement 5-10 minutes aprés), je m'aperçois que la personne qui a écrit les concentrations de plasmides a fait une erreur. Donc mon plasmide control est 10 fois moins concentré…du coup dans la panique (il me faut absolument réussir cette transfection) j'ai procédé a une autre transfection sur les mêmes cellules avec le plasmide contrôle pour essayer de complémenter (dans les 30 minutes après la première transfection)…je sais c'est stupide. Mais quand on panique….  [...]

Expression d'un gène

Je suis désolée, je suis un peu perdue avec le mot expression... si vous pouviez m'éclaircir un peu sur le sujet, cela serai vraiment gentil de votre part.   [...] Tout les gènes ont leur expression soumise au contrôle d'un promoteur.  [...]

Expression d'un transgène

Si on veut exprimer un transgène uniquement dans un type cellulaire d'un organisme il faut le mettre sous le contrôle du promoteur d'un gène exprimé uniquement dans ce type cellulaire.  [...] Il doit exister des systèmes où tu exprimes un facteur de transcription sous contrôle de ton promoteur tissu spécifique, et ensuite ce facteur de transcription avec son propre promoteur s'occupe de ta protéine.  [...]

Souris transgéniques - nomenclature

abc-Cre signifie qu'il y a un transgène permettant l'expression de la recombinase Cre sous le contrôle du promoteur abc (voir système cre-lox également).  [...] Concernant le système cre-lox, je pense que wikipédia l'explique bien. Mais en gros, ta souris Cd4-Cre exprime la cre sous le controle du promoteur CD4, et tes autres lignées ont des gènes floxés (d'où le fl/fl).  [...]