• Forum - Contrôle, Plasmide, Transformation

[Biologie Moléculaire] Contrôle négatif clonage

- l'efficacité de transformation obtenue avec le produit de ligation. nombre de colonies / µg d'ADN de plasmide digéré incubé avec insert et ligase.  [...] La seule chose que je peux te dire c'est que la manip de transformation des bactéries par le vecteur seul a raté, et qu'un très faible nombre de colonies a donc pu se développer. Par curiosité, combien de colonies par µg d'ADN as tu obtenu dans le contrôle et dans la transformation avec vecteur + insert.  [...]

Le Lait de vache : véritable poison ? - Page 2

en ce qui concerne les engrais il ne rentrent pas dans la composition du lait car transformé d'une part par les plantes,puis par les microorganismes de la panse.  [...] -pour les contrôles d'antibiotiques.100% du lait livré à une industrie est contrôlé car les antibiotiques empêche toutes transformation laitière.pour l'industrie les pertes dues à un camion stérile sont trop importantes pour que chaque producteur ne soit pas contrôlé.  [...]

[Biologie Moléculaire] Contamination transformation

J'ai fais une transformation en bactéries Top10F' pour effectuer une recombinaison homologue entre un plasmide conférant une résistance ampicilline et un ADNg. A l'issu de la transformation de petites colonies sont apparues sur la gélose après 24h d'incubation...jusque là tout est normal.  [...] Cas typique avec les transformants sur ampicilline. le gène de résistance à l'ampicilline qui est sur ton vecteur code une protéine qui peut diffuser dans le milieu et conférer une pseudo-résistance à des cellules qui n'ont pas ton plasmide, donc des faux-positifs.  [...]

Qui a découvert le cancer?

Je suis à la recherche d'informations historiques concernant le passé du cancer, sa découverte et les scientifiques impliqués dans celle-ci. Auriez vous des informations à me donner.   [...] Donc en fait on a commencé à approcher le truc grâce aux virus. Ensuite il y a eu la montée de la biologie moléculaire moderne dans les années 60/70 avec la découverte des transformation bactérienne, des enzymes de restrictions, du clonage, etc... C'est dans ces années qu'on a réussit à couper une séquence, la coller dans un plasmide, et la cloner.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de clonage dans le pGEM-T easy vector.

Déjà une chose, ça a pris plus de temps que d'habitude pour avoir des colonies. Le contrôle positif fait avec un de mes vecteurs et les cellules a donné des colonies après une nuit (normal). Pour mes plaques de transformation, j'ai du attendre 1 jour pour avoir des coloniees bien visibles.  [...] Ce qui me semble étrange, c'est que si l'ampicilline était vraiment inactif, j'aurai du obtenir beaucoup plus de colonies sur mes plaques de contrôles et de transformation (en moyenne 40 colonies obtenues). Mais j'ai vraiment du mal à comprendre comment c'est possible d'avoir les colonies blanches et de n'avoir aucun ADN plasmidique sur le gel ensuite.  [...]

Intégration dans un plasmide

Savez vous comment s'effectue l'intégration d'un gène dans un plasmide bactérien (Le gène a déjà réussi a pénétré dans la bactérie grâce à la transformation).  [...] Non, c'est pas systematique. Ca depend de la qualité de tes digestions, de la taille de ton vecteur et de ton insert. Par contre, ce genre de construction se fait in vitro. Tu transformes ensuite la bacterie par ton plasmide. Pour integrer un fragment d'ADN dans un plasmide deja dans une cellule, je dirais que tu ne peux le faire que par recombinaison homologue, mais c'est bcp plus compliqué et j'ai jamais entendu d'une telle manip pour modiifier des plamisdes.  [...]

[Microbiologie] Chevauchement des ORF

- Il a été montré (et même observé en microscopie électronique.) des collisions d'ARN polymérase entre promoteurs convergents (qui se font face). J'ai même trouvé récemment une petite animation réglable.   [...] Donc certaines mutations peuvent affecter les deux gènes à la fois. C'est l'un des points faibles de notre génome en matière de protection contre la transformation tumorale.  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 24

En fait, je ne cherche pas à trouver le role de la STOP dans la neurogenese hippocampale. Bien qu'indirectement, j'ai eu des résultats y répondant. Mais Je me sers de la KO STOP comme modele de schizophrénie afin d'essayer de voir si la déficience de la neurogenese hippocampale pourrait participer à la mise en place de la psychopathologie de ces souris.   [...] tu as un bel exemple du troisième type cellulaire en haut à droite. il s'agit d'une cellule malpighienne de type intermédiaire. Le noyau de cette cellule est bleu gris et grosso modo de la taille d'un lympocyte. Ce noyau est en position centrale et il y a un bord du cytoplasme qui est replié ce qui donne une teinte bleu turquoise bien prononcée à une partie du cytoplasme.  [...]

[Génétique] Help! tp génétique, analyse clonage

Ces bactéries avec plasmides sont dites resistantes et vont pousser sur milieu sélectifs. ==. Les bactos transformés par rien ne poussent pas sur ce milieu = controle négatif.  [...] Ou plutôt les bactéries étaient compétentes (électro- ou thermocompétentes) et vous avez fait une transformation avec vos plasmides recombinants au sein desquels vous aviez auparavant cloné un insert.  [...]

[Microbiologie] Lymphocytes

En effet, les maladies auto-immunes sont du à un défaut de maturation des monocytes (précusrseurs des lymphocytes), qui ne passe pas l'étape clé d'élimination en cas de présentation de molécules du soi. En fait, cet étape consiste à éliminer les monocytes qui une fois sorti de la moelle osseuse pourraient s'attaquer à nos cellules.   [...] La présentation de l'antigène aux lymphocytes T helper n'a pas lieu dans la moelle mais en périphérie, et conduira à la transformation des lymphocytes B en plasmocytes, cellules capables de production d'immunoglobulines spécifiques d'un antigène (ou plutôt d'épitopes antigéniques).  [...]