• Forum - Contrôle, Courbe, Réaction, échantillon, Patient

[Biochimie] automate autolab

controle de la courbe de réaction pour échantillon du patient.  [...] La vocation de ce forum n'est pas de faire de la traduction en ligne. Cependant, un membre généreux ayant répondu, la discussion n'est pas supprimé mais simplement fermée.   [...]

[Immunologie] Elisa & Ifi

Si tu veux doser le taux d'Ac de manière quantitative oui tu vas te servir du tube du patient. Mais il faudra faire des dilutions de ton contrôle positif pour tracer une courbe étalon à partir de laquelle tu vas déteminer le titre du malade.  [...] Ben par rapport au témoin négatif comme j'ai dit. Mais il faut aussi regarder la DO du blanc qu'il faut soustraire à toutes les autres DO (positif, négatif et échantillons testés).  [...]

[Immunologie] Comparaison impossible entre 2 lots anticorps secondaire polyclonal

Pour cela, nous effectuons une courbe standard en 5 points a partir d une préparation purifié de cette protéine pour laquelle ont connait la concentration. Sur le même gel se trouvent les échantillons a doser et un contrôle.  [...] pour cela, nous migrons 2 gels en parallèle (5 points courbe standard et 5 contrôle/gel). Nous utilisons ensuite le même anticorps primaire pour les 2 gels. Et ensuite pour un gel nous utilisons le nouveau lot et pour l autre le lot aactuel.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de spécificité en RT-qPCR

La courbe standard a un domaine de linéarité limité (2log) et je vois apparaitre des points disparates après une valeur de Ct de 37. Les contrôles négatifs (de l'étape d'extraction ou de l'étape de PCR. l'échantillon est remplacé par de l'eau ultra pure) montrent de manière aléatoire des amplifications.  [...] J'ai aussi réalisé une RT puis qPCR en SYBR Green qui confirme que certains échantillons sont positifs mais pour les autres j'ai des Tm proches (74°C ou/et 82°C contre 79°C prévu pour l'amplicon désiré).  [...]

[Biologie Moléculaire] analyse des résultats d'une QPCR

Dans mon expérience, j'ai des CT values pour mon gène d'intérêt. j'ai également de CT values pour un gène servant au contrôle interne. J'ai une courbe standard pour ces deux gènes afin de déterminer le meilleur treshold. Je ne prends pas les valeurs correspondant aux réactions -RT dans mes calculs vu qu'elles sont nulles.  [...] Etant donné que j'ai des courbes standard, j'ai pu quantifier de manière relative mon cDNA d'intérêt et le cDNA contrôle. Est-ce que je peux diviser la quantification relative de mon cDNA d'intérêt par celle du cDNA contrôle pour avoir une quantification normalisée grâce au contrôle interne Ou est-ce que je suis obligée de passer par la méthode delta delta CT.  [...]

ADN - et communication

S'ils enlevaient l'échantillon d'ADN, ces ondes ne disparaissaient pas, comme on pouvait s'y attendre, mais persistaient, sous forme de structure régulière, comme s'il y avait toujours un échantillon maétriel. Comme l'ont démontré des expériences-contrôles, ces ondes devaient provenir, sans aucun doute, de l'ADN qui n'était plus présent.  [...] Une expérience à vide, c'est-à-dire sans échantillon, ne donnait qu'une courbe d'ondes aléatoires. L'effet était reproduisible à volonté, et on l'appelle, aujourd'hui, l'effet ADN-Fantôme. L'explication scientifique de ce phénomène est que l'ADN lui-même semble produire des ondes dans le vide (vacuum), à travers lequel une vermoulure magnétisée se produit, induite par la présence de matière vivante, qui peut persister, selon les cas, plusieurs mois  c'est ce que les recherches de Garjajev et de son collègue ont démontré.  [...]

teneur en polyphénols

j'ai un extrait phénolique (100gMS dans 500ml de solvant) après filtration j'ai fait une dilution 50 fois pour mesurer la teneur en polyphénols totaux.. après ajout de réactif de follin et de NaCO3 j'ai incuber 2h à température ambiante puis j'ai mesuré le DO à 760nm.  [...] Je sais que y est l'absorbance, et donc je peux trouver la concentration de polyphenols mais celle de l'échantillon à partir de l'équation de la courbe.  [...]

[Biologie Cellulaire] Question sur la catalyse des enzymes 1ere S

Pour la courbe représentant la vitesse en fonction de la concentration de substrat j'imagine, une saturation est observée parce qu' au bout d'un moment les enzymes sont toutes entraint de fixer leur substrat, il n'y a donc aucune réaction qui peut encore se faire en meme temps ce qui va correspondent à un palier de vitesse d'ou la saturation observé avec une vitesse constante quelque soit la concentration.  [...] On aura donc la même courbe avec une pente (trace la tangeante à la courbe) beaucoup plus faible car l'inhibiteur compétitif sera venu déranger ta réaction. Il faut savoir que l'inhibiteur compétitif ne fait pas varier la vitesse maximale de réaction. La différence vient de la durée qui est plus importante pour l'atteindre.  [...]

courbes qpcr et dilution

Nous avons effectué une gamme de dilution pour un mix d'ADNc (ayant subi une étape d'amplification) pour faire de la quantification relative. Le souci se pose pour les deux premiers points de gamme. Sachant que nous avons fait le 2eme point en diluant au 1/2 le premier point (ce sont donc les plus concentrée de la gamme).   [...] Cette dilution est fait pour 3 génotypes différents (donc a chaque fois des échantillons de départ différents). Les 3 premeirs et les 3 deuxième points sont a des concentrations identiques.  [...]

beta endorphine

dans le cadre de mon stage de fin d'etude, je dois effectuer un dosage de cette hormone dans la salive par un test ELISA, mais avant je dois savoir si cette hormone pourra etre detectable par cette methode.   [...] Ben tu sais, essayer ne te prendra que 2 jours. tu fais une courbe de dilution avec un standard en parallèle d'un échantillon de salive. Tu peux aussi prendre un échantillon de tissu dont la concentration est plus ou moins connue, pour vérifier que ton ELISA est valide pour des échantillons vivants.  [...]