• Forum - Contamination, Protéines, Ratio

[Biologie Moléculaire] rapport 260/280 et 260/230

ton ratio 260/280 est excellent et montre qu'il n'y a pas de contamination par des protéines.  [...] Mais ton ration 260/230 est trop bas, et montre que tu as une contamination par des produits organiques (généralement des tampons) dans ton échantillons.  [...]

[Biochimie] Effet du pH sur le spectre UV des nucléotides

A la suite d'un laboratoire de biologie, nous avons reçu les résultats d'une expérience à laquelle nous n'avions pas participé. Il s'agissait de la mesure des différence d'absoption de nucléotides (dATP et dCTP) ainsi que d'ADN à différents pH (4.9 et 7.8).   [...] On sait qu'un ratio 260/280 pour l'ADN devrait se situer aux alentours de 1.8-2 et exprime une possible contamination par des protéines.  [...]

[Biochimie] DO 260/280 et 260/230

Salut, je me posais la même question pour un rapport de lab et avec un ami on est venu à cette conclusion. Les acides nucléiques absorbent la lumière à une longueur d'onde de 260, à 280 se sont les protéines qui absorbe la lumière et à 230 se sont les molécules organiques.  [...] C'est pourquoi un mauvais ratio 260/280 (généralement. 1.9) indique une contamination par protéines et un mauvais ratio 260/230 (généralement. 2) indique une contamination par molécules organiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] Amplification infructueuse

Pour ce qui est de la taille je ne sais pas du tout ce à quoi tu dois t'attendre. Le marqueur de taille n'est pas important, ce que tu veux voir c'est si tu as quelque chose dans ton échantillon (d'après le Nanodrop oui mais une deuxième vérification est toujours bonne à prendre) et si tu n'as pas une grosse contamination par des ARN (que tu va retrouver tout en bas du gel).  [...] Ouai mais DMSO va régler les problemes liés aux proteines ducoup pour une contamination qu'on detecte au ratio 260/280, et celui la est parfait chez moi ^^.  [...]

[Biochimie] Améliorer la quantité, qualité et pureté d'une extraction d'ARN

J'ai obtenue une concentration pour la méthode de précipitation de 1240 ng/µL avec les ratios de 260/280 est de 1,66 et 260/230 la valeur est de 1,59 permettant de dire qu'il y a une très grande contamination en matière organique. Pour l'échantillon de colonne est de 440 ng/µL Pour l'échantillon de colonne, la valeur du ratio 260/280 est de 2,08 permettant de conclure qu'il n'y a pas de contamination protéique.  [...] De façon générale, le matériel en colonne est plus propre notamment parce qu'on évite plus facilement les contaminations par carry over, par contre je suis étonné que vos ratios 18/28S ne soient pas meilleurs.  [...]

Après les fêtes ...

Enfin, pour un individu jeune avec activité physique normale et régulière, faut-il impérativement consommer des protéines tous les jours et en quelle quantité (y a t il un ratio en g/g de poids corporel ) Que pensez-vous des protéines végétales telles que le soja (qui ne contiennent pas tous les acides aminés essentiels tels que la lysine, méthionine).  [...] Les apports recommandés en protéines sont généralement d'environ 0,8 g par kilo de poids et par jour. En pratique, quelqu'un pesant 70 kg devrait donc en consommer 70 g par jour pour être en bonne santé. Pour répondre à ces besoins, la solution nutritionnelle idéale réside dans une ration quotidienne au moins pour moitié d'origine animale (viandes, poissons, oeufs, produits laitiers), et pour l'autre d'origine végétale (céréales, légumineuses).  [...]

[Biochimie] facteur de purification et rendement

Lors de la détermination de l'activité de la pyruvate kinase, on a utilisé 100 microlitres de solution à 0,1 mg/mL, prélevés sur les 200 mL de solution obtenue après une étape de purification par chromatographie d'achange d'ions portant sur 1 litre de solution de départ dont l'activité spécifique était de 10 U/mg de protéines et la concentration en protéines de 2 mg/mL.  [...] .. la quantité de protéine que vous avez obtenu dans la deuxième fraction peut avoir n`importe quel ratio pyruvate kinase/protéines sans mentionner une différence aussi entre pyruvate kinase actives/protéines dans le cas spécifique de l`unité U.  [...]

[Biotechnologie] Le pouvoir tampon de la poudre de lait

[Biotechnologie] Le pouvoir tampon de la poudre de lait.   [...] J'ai lu qque part qu'augmenter le ratio (protéines sériques / caséines) réduirait ce pouvoir. Je ne comprends pas très bien pourquoi.  [...]

[Biologie Cellulaire] Western Blot ATM phosphorylé

A la révélation, je n'ai aucune bande ou au contraire quelque fois j'ai des bandes intéressantes mais qui ne correspondent pas à la taille de la protéine (250kDa). (L'anticorps utilisé est celui qui est le plus abondant dans les publications).  [...] Il faut aussi être sur que la protéine rentre dans le gel au moment de la migration, tu devrais essayer si ce n'est pas déjà fait un gel moins concentré (genre 7% mais c'est de la vraie morve).  [...]

[Biochimie] Dosage spectrophotométrique des protéines

Il y a le nanodrop pour doser les protéines. Dans le principe, cela reste de la spectrophotométrie puisqu'on dose l'absorbance d'une goutte d'échantillon déposée sur une lentille qui émet un faisceau de lumière à 280 nm. L'avantage est qu'il n'y a pas besoin de cuve en quartz pour le dosage (à la différence des spectrophotomètres classiques pour le dosage de protéines sans coloration), il n'y a pas besoin de coloration, et surtout très peu de matériel biologique est utilisé pour le dosage puisque le volume de la goutte déposée pour le dosage est de l'ordre de 1 à 3 µl.  [...] Vous avez aussi le dosage par Warburg et Christian. Il permet la séparation des acides nucléiques et protéines selon un ratio propre à la méthode.  [...]