• Forum - Congélation, Conséquences, Sérum

[Immunologie] cross match après cryocongélation

Je dois maintenant réaliser la même expérience avec les mêmes lymphos donneurs mais n'ayant pas été cryo-congelés. Je m'attends à de meilleurs résultats (moins de flou en cyto en flux) car moins de lyse cellulaire après congélation. Mais comment interpréter ces futurs résultats Les lymphos, après congélation, expriment ils des protéines interférents avec mes anticorps La cryo congélation a t elle des conséquences sur le systèmes HLA Sur la reconnaissance des anticorps anti HLA du sérum du receveur.  [...] Je n'ai pas trouvé de papier sur ce sujet (sauf un qui démontrait l'augmentation de l'expression de CCL5, CXCL4 et CD14 après congélation...).  [...]

Biologie cellulaire DMSO

Nous congelons nos lignees de cellules tumorales dans du DMSO. Lorsque nous les ressortons du Deware d'azote, le produit de congelartion contenu dans les cryotubes est parfois jaune, parfois rose. Est ce que vous connaissez l'explication à cette difference de couleur.  [...] J'imagine qu'il n'y a pas que du DMSO lors de la congélation. coup le restant est traditionnellement soit du Sérum (plutôt jaune) soit du milieu (plutôt rose, sauf lorsque son pH change ce qui est très classique lors de la congélation). Du coutil foaut chercher de ce côté la.  [...]

[Immunologie] Etude (dosage) du complément sérique

Moumoutte a raison. La congelation du serum empeche la degradation des proteines du complement et preserve donc leur activite.  [...] Dans le cas d'etude du complement dans le serum, des que la coagulation est faite, il faut centrifuger pour ensuite congeler le serum et preserver ainsi les molecules du complement.  [...]

[Biologie Cellulaire] Congélation de cellules adhérentes

j'ais fait un TP où j'ais congelé des cellules (adhérentes mais ici ce n'est pas important je pense). Dans le milieu de congélation j'ais plusieur concentration de DMSO et une concentration fixe de FCS (50%) (sérum de veau foetal) afin de determiner le milieu de congélation adéquat après décongélation.  [...] Mon problème c'est que je ne comprends pas l'utilisation de FCS (je suis déjà dans un milieu complet contenant 10% de FCS.) apparament le FCS à un rôle particulier dans la congélation qui m'échappe.  [...]

congélation décongélation cellules

j'ai conglé par erreur mes cellules (cellules pancéatiques humaines) dans un milieu (SVF + DMSO 20%) différents de celui dans lequel ellles doivent être congélées (milieu de cuture RPMI+ DMSO 10%). est ce que mon erreur aura de grave conséquences sur le fonctionnement de mes cellules. qu'est ce que je peux faire merci.  [...] Pour la congélation d'une même lignée cellulaire, beaucoup de labos utilisent des milieux de congélation différents. Les points communs que l'on trouve entre les différents milieux est qu'ils sont très riches en sérum et qu'ils contiennent une concentration assez élevée en DMSO (de l'ordre de 10%).  [...]

Culture de fibroblastes

je cultive des fibroblastes d'origine humaine à partir de biopsie de peau et rencontre des problèmes dans la prolifération de ceux-ci. en effet, j'observe une croissance beaucoup plus lente que d'habitude et des trous se forment dans le tapis cellulaire, comme si les cellules s'étiraient... (Cf photo jointe).   [...] ..Si ta pas changer de lot de Serum ou de milieu...reste ton incubateur (c'est rare, le truc bipe a t'en faire peter les oreille quand un truc cloche normalement et ca aurait buter tes cellules plus vite...)...C'est pas la congelation non plus t'aurais juste une mortalité plus élevé a la decongelation et apres ca repartirais (sauf exposition a des produits chelou^^).  [...]

[Biologie Cellulaire] Au secours : Pb à la décongélation de cellules

Je viens de décongeler une ampoule de chaque lignée et aucune cellule adhère, même après deux jours et mis dans un milieu avec 20% de SVF... Lors de la congélation le sérum utilisé était du SVF du fournisseur PAA et malheureusement, on a changé de fournisseurs depuis et le sérum utilisé dans le milieu est actuellement du SVF Gibco.  [...] Rien à redire sur le protocole de décongélation, c'est quasiment ce que je fais. Sans vouloir remettre en cause votre collègue, l'erreur est humaine et c'est peut être lors de la congélation qu'il y a eu un problème.  [...]

[Biologie Cellulaire] Effets de la congélation

Je vais chippoter un peu. Quand on refroidit rapidement des cellules de manière à éviter leur éclatement, ca s'appelle de la surgélation, plus de la congélation Mais effectivement l'eau ne forme pas de gros cristaux (phénomène de surfusion il me semble) et la structure cellulaire est conservée.  [...] Mais cette économie de DMSO n'était pas si profitable que ça (d'où le fait que l'INSERM ne l'utilisait pas). en effet, quand on observe le temps de doublement de la population cellulaire juste après décongélation, on s'aperçoit que ce temps est plus élevé avec seulement 1% de DMSO.  [...]

[Biochimie] Bactéries alimentaires

Oui car d'une part on perd en qualité de l'aliment (moins de vitamines, moins d'eau, déstructuration) et d'autre part à chaque fois qu'on décongèle les petites bactéries se réveillent et se multiplient puis la congélation les endort et la décongélation les fait se multiplier alors qu'elles sont déjà plus nombreuses que la première fois et ainsi de suite.  [...] La congelation en detruit. Mais la decongelation leur donne l'occasion de se multiplier. ELes bacteries se developperont d'ailleurs d'autant plus facilement a la decongelation que les cellules des aliments elles meme auront ete eclatées. Ces aliments seront donc plus contaminés qu'un produit non congelé.  [...]

Recongelation

Non elles ne peuvent pas se multiplier pendant la congélation, c'est seulement après, au moment de la redécongélation qu'elles peuvent se multiplier (d'autant plus rapidement que la redecongélation altère l'aliment d'après ce que j'ai lu). Mais bon dans ces conditions, je trouve surprenant qu'en quelques heures l'aliment devienne toxique.  [...] .. DONC trop peu de modes de cuisson seraient adaptés pour anihiler les effets de multiples recongélation, la vigilance reste dons requise en matière de conservation.  [...]