• Forum - Congélation, Augmentation, Volume

[Divers] compter des cellules

je souhaiterais élucider les mécanismes physiologiques qui sont à l'origine des variations de volume de la médullosurrénale chez le rat male. Est ce que l'augmentation du volume médullaire est dûe à une hyperplasie (augmentation du nbre de cellule) ou à une hypertrophie (augmentation de la taille (=surface) des cellules).  [...] Alors là, il faut que tu te lances dans les statistiques, dans les problématiques de l'échantillonnage au sein d'une population de taille inconnue... Tout dépendra en fait des premiers résultats que tu obtiendras, je pense. Si tu arrives à avoir une moyenne significativement proche de la moyenne réelle (par les tests statistiques adéquats) au bout de quelques champs, c'est bon, tu peux t'arrêter.   [...]

[Microbiologie] j'ai pas comprit quelques détails

Le problème essentielle est la contamination bactérienne mias alors là je ne suis pas tout à fait sur. la congélation provoque une augmentation du volume de l'eau qui fait éclater les cellules ( à moins que ça ne soit les cristaux qui déchirent la cellule lors de leur croissance.  [...] Brix, c'était un monsieur je crois, il a donné son nom au degré Brix qui est souvent utiliser en alimentaire pour doser approximativement la concentration en sucre d'un produit par sa réfringence. En plus clair c'est le degré de réfringence d'un produit qui est représentative de sa concentration en sure (saccharose), 1 °Brix = 10g/L si je me souviens bien.   [...]

[Immunologie] cross match après cryocongélation

Je dois maintenant réaliser la même expérience avec les mêmes lymphos donneurs mais n'ayant pas été cryo-congelés. Je m'attends à de meilleurs résultats (moins de flou en cyto en flux) car moins de lyse cellulaire après congélation. Mais comment interpréter ces futurs résultats Les lymphos, après congélation, expriment ils des protéines interférents avec mes anticorps La cryo congélation a t elle des conséquences sur le systèmes HLA Sur la reconnaissance des anticorps anti HLA du sérum du receveur.  [...] Je n'ai pas trouvé de papier sur ce sujet (sauf un qui démontrait l'augmentation de l'expression de CCL5, CXCL4 et CD14 après congélation...).  [...]

[Biologie Cellulaire] Aide pour l'interprétation d'observations microscopiques - Page 2

La concentration cellulaire de départ = le nombre de cellules par unité de volume au début de l'expérience (avant congélation donc).  [...] AU bout de 10 jours, les différences que tu observeras seront plutôt dues à des biais dans la culture qu'à des différences dans la congélation. Pour certaines bactéries, cela fait plus de 700 générations, de quoi peupler la totalité du globe et bien plus. Alors un tube a essai.  [...]

Carte de restriction d'un plasmide inconnu

Ensuite, il n'est pas possible de mélanger toute les enzymes. Soyons fou, et admettons que tu veuille mettre ton plasmide et tes 6 enzymes en même temps. Tu va devoir choisir un tampon de digestion (ph, concentration en sel) unique pour toute tes enzymes. et certaines ne fonctionneront alors pas (enfin, il est possible une astuce, mais pas avec un choix restreint d'Ez).   [...] Le deuxième problème est la concentration en glycerol. Généralement, les enzymes sont suspendu dans un tampon coupé à 50% de glycerol, afin d'éviter les cycles de congélation/décongélation, qui abimeraient l'enzyme. Cependant, le glycerol est très mauvais pour l'activité de l'enzyme, et communément, ont admet que la quantité d'enzyme (+glycérol) ne dois pas dépasser 10% du volume total de digestion.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marquage Dig en Klenow, concentration de réactifs

Petits conseils. les dNTP (et surtout la DIG) est sensible au cycle de congélation/décongélation (dégradation). Si tu as besoin de beaucoup de ce mix, je conseille d'en réaliser des aliquots à volume utile (le nombre de condition effectué normalement + 1/2 - si généralement 5 conditions de 2µl =. aliquot de 11µl).  [...] Pour avoir garder la précision (surtout pour le dTTP), pense à la dilution (1/10 par exemple), puis congélation (en aliquot) pour ne pas perdre ce précieux composé.  [...]

[Biochimie] Avatar - Le film

J'aurais pensé que les cellules éclataient pendant la congélation (à cause de la prise de volume de l'eau). D'où vient le fait que les cellules éclatent pendant la décongélation.  [...] .. les cellules éclatent à cause de l'augmentation de volume... à moins d'utiliser un antigel cellulaire, et ça introduit quand même d'autres contraintes. Je ne vois pas trop comment ralentir le métabolisme pour conserver à longue durée un être vivant entier.  [...]

[Biologie Cellulaire] Effets de la congélation

La seconde, c'est la déshydratation. Lors d'une congélation lente, le milieu extérieur gèle en même temps que le milieu intracellulaire voire légèrement avant. Ainsi l'eau devient solide et la concentration en ions dans ce qui reste d'eau liquide augmente.  [...] Cette augmentation de pression osmotique est plus forte à l'extérieur qu'à l'intérieur et on a donc un mouvement d'eau liquide depuis la cellule vers le milieu extérieur. Ainsi la cellule qui n'est pas encore tout à fait congelée perd-t-elle toute l'eau liquide restante.  [...]

[Biochimie] Bactéries alimentaires

Oui en effet. Une congélation lente entraine aussi une dégradation de l'aliment par éclatement des cellules. Une seule congélation/décongélation ne sera pas fatale pour les microorganismes, mais la répétition oui.  [...] Oui car d'une part on perd en qualité de l'aliment (moins de vitamines, moins d'eau, déstructuration) et d'autre part à chaque fois qu'on décongèle les petites bactéries se réveillent et se multiplient puis la congélation les endort et la décongélation les fait se multiplier alors qu'elles sont déjà plus nombreuses que la première fois et ainsi de suite.  [...]

Microbiologie

Alors en effet, tu as eu des résultats non conformes car la congélation a peut-être tué les micro-organismes qui s'étaient infiltrés dans l'emballage. Dans ce cas ça fausse tout tes résultats. Je ne savais pas que la croissance augmentait au COURS de la décongélation.  [...] / Si c'est le cas, c'est valable uniquement pour les survivants et dans ce cas aussi ça fausse tes résultats. Je pense que la congélation est à éviter dans ton cas.  [...]