• Forum - Congélateur, Fragments, ADN, But

[Divers] Dnathèque

Qu'entends tu par DNAthéque Un congélateur où tu stockerais des fragments d'ADN génomique Dans quel but.  [...] Perso, j'ai pas de DNAthèque mais un souchier dans lequel les constructions sont expliquées. Dans le même dossier, on a les fichiers des séquences de ces constructions (DNA strider) et des amorces. Pour les ADN dont on trouve les séquences dans la GenBank, on précise le numéro d'accès.  [...]

extraction ADN

* neutraliser avec 150 microlitres de (3M Kacetate pH 5.5) froid, bien mélanger par reournement (5 fois) puis centrifuger aussitôt à 13.000 g pendant 10 min à 4°C.   [...] pourquoi pas utilisé la solution chelex pour l'extaction de l'ADN c'est facile peu couteux sinon la solution de biorad instagene matrix.  [...]

[Génétique] problème d'extraction d'ADN

ouii je vérifie la qualité de mon ADN directement après chaque extraction et les ratio de puretés sont bons autour de 1.8 mais enfaîte je conserve mes ADN dans un simple congélateur à -4 ° et même je ne met pas des inhibiteurs d'ADNase puisque j'utilise un kit d'extraction et pas un protocole de CTAB dont je peux mettre le Mg + EDTA.  [...] Si tu obtiens un Smir a hautes tailles c'est qu'il commence déjà a se degrader mais que les fragments d'ADN clivé sont encore de grande taille et par conséquent encore utilisable en PCR la plupart du temps.  [...]

[Biologie Moléculaire] IMPORTANT Conservation produits de PCR

En fait on a longtemps considéré qu'il fallait tout conserver au congélateur un peu pour surprotégé nos précieux ADN, mais c'est un peu faux, et voire même abouti à l'inverse. La congélation entraine bien évidemment la formation de cristaux de glace qui vont possiblement endommager les molécules présentes dans le liquide.  [...] La congélation en soit n'est pas un problème (une fois que tout est pris, on va dire que rien ne bouge) le problème est à la formation des cristaux ainsi qu'à leur dissolution, donc il faut éviter de trop faire des cycles de congélation - décongélation.  [...]

[Biologie Moléculaire] probléme de migration d'ADN sur gel d'agarose

De l'ADN a été extrait à partir de pulpe de tomate et ensuite stocké au congélateur.Je pars donc ensuite de cette extraction (2microlitres) que j'ajoute à 48 microlitres d'une solution contenant de l'eau, un tampon, des bases nucléotidiques, les primers REVERSES et FORWARD ainsi que la TAQ polymérase.Ensuite on lance la PCR pour 40 cycles.  [...] A son issue, on regarde les résultats sur gel d'agarose(+Bromure d'éthidium).Le témoin négatif(2microlitres d'eau à la place de l'ADN) est bien négatif, le témoin positif(ADN de feuille de tomate dont on est sur qu'il s'hybride) est bien positif.Le problème survient sur notre échantillon.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr pour clostridium perfrigens

je suis un peu perdue et j'aurai besoin de connaitre votre avis sur le meilleur protocole, dois je prélever une colonie bien déterminée et la conserver dans un milieu au congélateur je ne sais pas comment je peux congeler pour que je puisse, ensuite (une fois que j'aurai tout le matos) lancer ma pcr.  [...] Si tu n'as qu'un congélateur, le mieux est d'extraire ton ADN, et une fois qu'il est pur de le conserver dans ton congélo. Tu auras moins de risques que ton ADN soit dégradé ainsi.  [...]

[Biologie végétale] coloration verte sur choux fleur congelé microbe, bactérie ou pas ?

Pensant que c'était dû au blanchiment et au lavage à l'eau vinaigrée du choux fleur avec une interférence avec le bicarbonate qui se trouve encore dans le congélateur, récemment j'ai congelé un morceau de choux fleur ni blanchi ni lavé au vinaigre et il a aussi verdi.  [...] J'ai par exemple plusieurs bouteilles d'eau congelées. Je n'ai pas vérifié la descente à -18°c car je ne m'avais pas posé la question avant cette panne de réseau EDF. Et pour moi le congélateur fonctionne aussi bien qu'avant.  [...]

décongélation-recongélation

je suis désolée de vous parler encore de la question de la décongélation-recongélation, j'ai déja tout lu concernant ce qui a été posté sur ce forum à ce sujet, et je ne sais toujours pas quoi faire. En effet, hier soir en ouvrant mon congélateur, je l'ai mel fermé je pense, il est blindé d'aliments, du coup la porte s'est ouverte et ce matin en me levant j'ai pu constater que malgres le petit espace au contacte de l'air, tout mes aliments etaient bien decongelés (viandes, poissons, legumes, crustacés, glaces.  [...] merci pour les conseils. en fait ce qui me pose problème aussi c'est que je ne sais pas si tout dans mon congélateur a ete decongelé, vu que la porte du congélo n'etaient ouverte qu'un peu, qu'en est-il des aliments à moitié ou en partie décongelé.  [...]

Pain moisi

J'ai aussi acheté une boîte en pyrex dont j'ai percé le couvercle (en plastic) de petits trous. J'ai l'intention de conserver dans cette boîte le pain à la sortie du congélateur et de la mettre au frigo. La boîte sera lavée entre chaque utilisation.  [...] sinon, met les dans la partie la plus froide du congelateur, il y a normalement un bac plus froid, s'il n'y en a pas, met le plus près possible du moteur a froid du congelo.  [...]

[Biologie Cellulaire] collagène pour culture cellulaire au congélateur

Ala réception d'une commande d'un flacon de collagene pour coater des flasques de culture, on m'a mis mon flacon au congélateur.  [...] A la decongélation, il est devenu trouble. Savez vous si je peux encore utiliser ce collagene pour faire mon coating Y a t'il une solution pour renaturer les protéines (chauffage bain marie par exemple ).  [...]