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[Biochimie] Influence de la concentration en enzyme Calcul activité spécifique

Par exemple, si une enzyme a une AS de 1000 µmol/min/mg quand elle est pure, et que tu ne trouves que 10 µmol/min/mg dans une préparation, c'est simplement parce que ton enzyme est pure à 1%.  [...] Si au cours d'une étape de purification l'enzyme a été partiellement dénaturée (à cause de conditions défavorables ou d'une erreur), la mesure de l'activité spécifique ne pourra donner qu'une information approximative voire fausse de la pureté de la protéine.  [...]

Calcul de Concentration en enzymologie

Je travaille actuellement sur un exercice d'enzymologie, et honteusement je bloque sur le calcul de concentration d'enzyme et substrat.  [...] Le substrat (PM=223) est dissous en acétronitrile à la concentration de 3.4mM. Coefficient d'extinction molaire du substrat =18300M-1cm-1.  [...]

confirmation pour un petit calcul

J'aurais besoin d'une petite confirmation pour un calcul car je ne suis pas sûre du résultat même si ça paraît tout bête. Voilà je voudrais 5Unités d'enzymes dans un mix de 20ul. J'ai rajouté dans le mix 5ug d'ADN sachant qu'il faut 1Unité d'enzyme pour 1ug d'ADN et que la concentration de l'enzyme est de 5 000Unités/ml.  [...] Normalement je devrais déposer 1ul d'enzyme dans monmix car 5unités / 5000Unités = 1ul non.  [...]

[Biochimie] Rendement d'une purification

Maintenant a tu calculé l'activité de ton enzyme à l'aide d'un etalon ou à l'aide du coefficient d'extinction moleculaire (peut être une erreur de calcul).  [...] jigsaw. mon hypothèse de la concentration n'est pas bon, mais je me suis rabattu dessus. J'ai pensé à l'erreur de calcul, mais la base de toutes les formules est la vitesse de réaction (delta)Absorbance/min qui parait anormal.  [...]

[Biologie Moléculaire] Protocole digestion

Une question. quelle quantité d'ADN plasmidique devrais-je mettre Mon plasmide a une concentration de 150 ng/ul, j'ai fait mon calcul pour le nombre d'unités d'enzyme pour 1 ug d'ADN plasmidique. Est-ce une quantité cohérente (mon clonage ultérieur sera un peu ch****).  [...] Je vais donc faire une digestion en 2 lots. l'un avec NcoI, l'autre avec BamHI. Après le gel, j'inverse les lots et les digère avec l'autre enzyme. Enfin, clonage. je vais commencer par cloner le bout Cter contenant le site BamHI, puis je clonerai le Nter entouré par les deux extrémités NcoI.  [...]

[Divers] Huiles essentielles et activité antioxydante

s'il vous plait, si quelqu'un peut me fournir des informations sur l'évaluation de l'activité antioxydante des huiles essentielles par le test du DPPH. le temps maximal de la réaction, l'allure de la courbe de l'inhibition en fonction de la concentration et la méthode de calcul de la valeur de l'IC50.  [...] Vous devriez trouver certains éléments au niveau du premier lien de cette page. http.//www.google.fr/searchhl=fr&so...=&oq=&gs_rfai=.   [...]

[Biochimie] Utilisation du bain marie dans le dosage des enzymes

Je suppose que l'utilisation du bain mari c'est pour donner une température adéquate à la réaction lors de sa provocation dans la cuve du spectrophotomètre. Mais là je pense ceci. le tampon et la substance distinée à régire avec l'enzyme sont conservés à une température de 26C°, Ok MAIS l'homogénat et sur la glace 4C° et au moment du mélange dans la cuve 4C° et 26C° je ne sais pas ce que ça va donner.  [...] De plus, votre réaction enzymatique va durer plusieurs minutes alors que les échanges thermiques se feront beaucoup plus vite dans ces conditions et seront terminés au moment où vous ferez vos observations sur l'activité de l'enzyme (le calcul de la vitesse de réaction ne se fait pas au tout début de la réaction).  [...]

[Biochimie] Détermination d'une concentration et d'un degré de pureté

Je doute beaucoup pour le calcul de la concentration (choix du volume) et notamment comment interpréter le 99.5% car si on regarde bien l'écart de grandeur entre les deux concentrations c'est impossible que la poudre contiennent 99.5% d'enzyme mais est-ce qu'on dit que la poudre est purifiée à 0.5% ou 99.5%.  [...] (Apparemment mon message n'a pas été posté) J'ai fait une erreur concernant le calcul de concentration. On divise la masse par 0.1*10^-3 L et non 0.1. Le résultat est le même.  [...]

[Biochimie] activite enzymatique verification d'idee de calcul urgent svp

[Biochimie] activite enzymatique verification d'idee de calcul urgent svp.  [...] activite enzymatique verification d'idee de calcul urgent svp.  [...]

[Biochimie] Probleme d'unité?

Bonsoir j'aimerai savoir apres un gel filtration et une DEAE sephacel d'une souche GY 8695 je trouve une AS = 850. Est ce que c'est possible Merci d'avance.   [...] Alors l'AS est l'activité specifique qui s'exprime en micromoles par minutes par milligramme d'enzyme. Il s'agit d'un resultat obtenu en tp apres un calcul demandé. J'ai 8 ml d'une solution et j'ai calculer une quantité de proteine de 0.55 mg avec une absorbance A280=0.069 avec pour A280=1-. 1mg.ml.  [...]