• Forum - Concentration, Contamination, Protéines

[Biochimie] Spectrophotomètrie : Les différentes technologies...

Ex. pour l'ADN tu peux déterminer sa concentration en mesurant l'absorbance a 260nm et la contamination par protéines en mesurant à 280.  [...] la longueur d'onde d'émission). Cela permet de quantifier un échantillon capable d'émettre en fluorescence. EX. tu veux quantifier une protéine genre GFP. Tu programmes ton fluo pour qu'il excite a 488nm et tu mesures les photons émis en fluorescence par la GFP a 505nm, proportionnels à la quantité de GFP.  [...]

[Biochimie] Améliorer la quantité, qualité et pureté d'une extraction d'ARN

J'ai obtenue une concentration pour la méthode de précipitation de 1240 ng/µL avec les ratios de 260/280 est de 1,66 et 260/230 la valeur est de 1,59 permettant de dire qu'il y a une très grande contamination en matière organique. Pour l'échantillon de colonne est de 440 ng/µL Pour l'échantillon de colonne, la valeur du ratio 260/280 est de 2,08 permettant de conclure qu'il n'y a pas de contamination protéique.  [...] De façon générale, le matériel en colonne est plus propre notamment parce qu'on évite plus facilement les contaminations par carry over, par contre je suis étonné que vos ratios 18/28S ne soient pas meilleurs.  [...]

[Biochimie] Extraction et dosage des protéines

Je suis obligée de beaucoup diluer pour éviter ce dosage parasitesui de plus et inégal selon mes échantillons. En fait quand je colore au bleu de coomassie un gel contenant mes protéines après électrophorèse, je m'aperçois que je ne retombe pas sur mon dosage (certains profils protéiques sont plus intenses alors que moins concentrés que d'autres lors du dosage).  [...] De plus, lorsque vous dosez au Bradford, vous dosez les protéines libres dans votre solution. Mais avant de déposer sur votre gel vous mélangez votre solution avec du dénaturant et chauffez un peu non Vous allez alors lyser les cellules sanguines présentes encore dans votre solution et libérer les protéines qu'elles contiennent et qui n'avaient pas été dosées au Bradford.  [...]

[Biochimie] DO 260/280 et 260/230

Salut, je me posais la même question pour un rapport de lab et avec un ami on est venu à cette conclusion. Les acides nucléiques absorbent la lumière à une longueur d'onde de 260, à 280 se sont les protéines qui absorbe la lumière et à 230 se sont les molécules organiques.  [...] C'est pourquoi un mauvais ratio 260/280 (généralement. 1.9) indique une contamination par protéines et un mauvais ratio 260/230 (généralement. 2) indique une contamination par molécules organiques.  [...]

Dosage des macromolécules biochimiques

.Pourquoi si ce rapport est. à 1,7 la solution d'acide nucléique est surement contaminé par des protéines et quand il est de 1,8 à 2, cette solution est pur.  [...] On y lit que les protéines absorbent de la lumière à 280nm, mais que ce n'est pas le cas pour les AN. Ainsi, si le rapport est affecté, c'est qu'on a une forte contamination par des protéines.  [...]

Action des DSNC sans effet de seuil ?

- Existe il une possibilité de concentration de ces produits dans le biotope Ou d'interactions chimiques possibles aux effets nocifs ou pathogènes dans le milieu.  [...] Un lien en relation qui me parait bien (mais toujours rien sur la contamination à dose infime ni la concentration et les interactions en milieu ouvert).  [...]

[Biologie Moléculaire] Mesure de pureté d'une préparation d'ADN aberrante?

Or normalement, une valeur aux alentours de deux témoigne d'une assez bonne pureté, et une valeur inférieur à 1.8 d'une contamination en protéines. par contre je ne vois pas du tout à quoi peut bien correspondre un rapport aussi haut.  [...] J'avais pensé à une contamination par autre chose que des protéines, mais je vois mal ce qui a pu contaminer en absorbant à 260 pile, et ni à 280 ni à 320. Et surtout qu'est-ce qui peut contaminer mon ADN, à part des protéines Des restes de la lyse des hépatocytes Un truc de la solution tampon.  [...]

[Biologie Moléculaire] détermination du type d'électrophorese à sa vue.

je voudrais savoir si à la vue d'un gel d'électrophorèse, nous pouvons déterminer s'il s'agit d'un gel de séparation de proteines, ou d'un gel de séparation d'Adn.  [...] Donc si je comprend bien c'est bien une électrophorese d'ADN, pour laquelle (gel 2) l'ADN a mal été purifié et qui est contaminé par des ARN.  [...]

Le SIDA transmit par le moustique?

- la quantite de sang présent dans (ou sur) la trompe apres une piqure est infime et donc la concentration de virus n'est pas assez importante.  [...] Bonjour, tu es sûr que c'est un test à partir de protéines et pas de l'ADN Sinon il se peut que le motif protéique reconnu dans le test soit relativement conservé (les protéases ne le digérant pas ou peu, bien que dégradant suffisamment les protéines pour empêcher la contamination virale).  [...]

expérience Meselson et Sthal

dans cette expérience le suivi d'ADN après centrifugation sur gradient de ClCs,par spéctrophotmétrie d'absoption dans l'uv.   [...] Mais souvent on mesure également la DO à 280 également pour pouvoir estimer la contamination par les protéines (c'est valable lorsque l'on fait une extraction d'ADN par exemple).  [...]