• Forum - Concentration, Bande, Produit

Techniques de compression

Les équipes de secours utilisent un CHU (Coussin Hémostatique d'Urgence) composé d'une éponge très dense imprégnée d'un produit antiseptique et d'une bande élastique non adhésive.  [...] (Coussin Hémostatique d'Urgence) composé d'une éponge très dense imprégnée d'un produit antiseptique et d'une bande élastique non adhésive.  [...]

[Biologie Moléculaire] identification d'un gène

En plus, j'ai oublié de préciser, la produit de PCR fait environ 1000 bases, et le séquençage est bloqué à la position 150. Je me demande si ça peut être expliqué par.  [...] - le fait que le produit est long et la séquence est courte peut être expliqué par un mécanisme quelconque... (mais lequel une polymérisation des fragments PCR la bande de 1000 bases que je vois est non spécifique, et je séquence une autre bande 150 bases invisible sur gel ).  [...]

[Biochimie] etude de proteine de liaison à l'ADN

A priori je dirai immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), dont le principe consisite à fixer la séquence d'ADN à laquelle tu t'intéresse sur des billes d'une colonne de chromato, puis à faire passer dans cette colonne les protéines dont tu suspectes la liaison à la séquence considérée. Après élution, tu récupères la protéines liée.   [...] En gros, ta sonde libre va migrer en bas du gel, et en présence d'une interaction avec une protéine, le complexe ADN-protéine sera ralenti dans le gel puisque plus gros. il apparaitra une bande radioactive dite retardée.  [...]

Conséquence de la concentration d'un tampon électrophorèse sur l'intensité

Sinon, la séparation des bandes dans l'ADN dépend de la concentration d'agarose. plus l'agarose est dilué, plus les petites molécules d'ADN vont migrer vite. Ca peut peut-être réduire la résistance totale du circuit.  [...] Je suis d'accord avec Annaick_R. Essaye du tampon 1x ou 0.5x avec une concentration d'agarose de 0.8% sur un petit gel, voir même 0.6% comme dit plus haut. Ton kit de lambda digéré c'est un vecteur c'est bien ça Donc s'il est digéré tu devrais voir une bande assez haut sur ton gel (dans les 2kb environ) et tu peux laisser migrer moins longtemps.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de clonage dans le pGEM-T easy vector.

J'ai relu le protocole pGEM-T easy et dans le troubleshooting, c'est écrit que si la réaction de ligation avec le produit PCR ne donne que des colonies blanches (pas de bleues) c'est parce que l'ampicilline sur les plaques était inactif. Je suis en train de me demander si l'ampicilline que j'ai utilisé était encore bon.  [...] J'ai purifié ma ligation des éventuels sels présents et j'ai refait l'électroporation et de nouveau Arc. Ce n'est que lorsque j'ai dilué 100 x le contrôle positif que je n'ai plus eu d'Arc. Il semblerait que ça soit un problème de concentration d'ADN... Mais comment leur contrôle positif pourrait être trop concentré.  [...]

une seul bande d'ARN visible voir deux...

Avec difficultés j'ai pu voir une deusieme bande mais très faible. Cela pourrait il venir de la concentration trop élevé de mon échantillon de départ (avant extraction de l'ARN).  [...] Le smear peut aussi provenir d'un probleme de gel et/ou de migration. A l'exception du smear qui se situe entre les deux bandes d'ARNr qui lui correspond aux ARNm. de quel espece extrais tu tes ARN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Causes d'échecs de la production de protéines recombinantes

Sinon pour la purification le problème vient de la ségrégation en corps d'inclusions. C'est un souci de la la production en bactérie, la protéine est produite mais se retrouve dans la fraction insoluble. Baisser la température de culture et l'induction aide.  [...] ) car au bout d'un certain temps on n'observe plus d'augmentation de la production. Et au bout d'un long moment on observe même une diminution de l'intensité de la bande car la protéine est dégradée. Il faut donc trouver l'équilibre pour avoir une bonne production sans qu'il y ait protéolyse.  [...]

[Biologie Moléculaire] structure des protéines

Comme le pic radioactif ne se situe as sur la bande de proinsuline ou d'insuline, cela signifie que les polypeptides synthétisés ne sont ni de la proinsuline, ni de l'insuline. Ci c'est faux alors je n'ai rien compris.  [...] J'aurais tendance à penser à une petite idée sur la dynamique de synthèse. Dans le sens où un pic radioactif dû aux aa radiomarqués et qui précède une bande correspondant à un précurseur me suggèrerait que je vois qu' in vitro je synthétise plutôt de la pro-insuline.  [...]

[Génétique] Analyse plasmides recombinants/non recombinants

Concernant ta question du puit 6, je serait presque pret à parier que ce que tu vois est ton plasmide B (donc ta matrice) mise en trop grande quantité. Ca ressemble à du plasmide et comme ni ta pcr dans le puit 5 (tu as parlé d'une erreur de manipulation) ni dans le puit 7 (pourquoi) n'ont fonctionné, je serait tenté de dire qu'aucune de tes PCR n'a marché malheureusement.   [...] Le probleme c'est que pour le puits 6 je ne sais pas quoi déduire... Pourquoi y a t il 2 bandes La bande a 3000 correspondrait à un excès de plasmides non recombinants et la bande a 6000 mon plasmide contenant l'insert Le soucis c'est que quand j'ai lysé les bactéries, je n'en n'ai vu aucune de bleue dans le culot contrairement à l'échantillon A.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème révélation WB

Pour la seconde révélation, augmentes-tu le temps d'exposition (l'activité HRP décroit au cours du temps...) La bande qui disparait, comment se situe-t-elle par rapport aux deux autres bandes (beaucoup moins intense, plus intense, équivalente,...).  [...] D'après ce que tu dis, je ne suis pas plus étonné de la disparition de cette bande lors de la deuxième révélation puisque c'est la moins intense de toutes. L'inverse aurait été surprenant. Là c'est juste que pour voir la bande en question, il faut exposer plus.  [...]