• Forum - Composition, Rôle, Tampon

[Microbiologie] Questions sur le milieu à visé médicale [CPS3]

La signification de cps semble cohérente avec la composition du milieu, je te remercie. Le lien que tu as donné ne fait pas référence au rôle du tampon hepes. Je connais tous les rôles du composant du milieu excepté le tampon hepes.  [...] Le rôle du tampon est aussi sûrement nécessaire pour que les réactions enzymatiques se fassent à un pH précis. Car sinon pas de produits colorés.  [...]

[Biologie Moléculaire] Tampon 10X, 1X???

que signifie un tampon de digestion est ce un tampon ayant le même rôle d'un tampon normal composé de son acide faible et base conjuguée(ou inversement) et permettant la résistance aux changements de concentration des ions H+ ds une solution induits par la digestion.  [...] Pour ce qui est du tampon de digestion il s'agit si je ne me trompe pas du tampon que tu associes avec une enzyme de digestion (par exemple si tu utilises BamHI, tu la mets avec du tampon BamHI) tout comme il existe des tampons ligase... Niveau composition je ne sais pas trop mais ce qui est sûr c'est qu'il remplit bien le rôle d'un tampon normal.  [...]

[Biochimie] glycine

Dans le gel de resolving, la vitesse de migration des ions glycinates augmente dans le gel de séparation, car le pH du gel de séparation est de 8.8, donc les protéines sont moins rapides que les ions porteurs. Les protéines se font dépasser par les ions glycinates et les différents complexes protéines-SDS se séparent grâce aux pores du gel.   [...] Si le papier SDS-PAGE est tant cite c'est surtout parce que le tampon de depot des proteines dans un gel (quel qu'il soit) est le tampon laemmli. Les articles citent en fait la composition du tampon, plus que la methode de SDS-PAGE.  [...]

Rôle des composants du Edward Buffer (tampon d'extraction d'ADN)

Je voudrais connaître le rôle précis des composants du tampon d'extraction que j'utilise, the Edward Buffer, pour extraire l'ADN de pétunia.  [...] - NaCl 0,5M. responsable de la plasmolyse des cellules qui libèrent leur contenu qui n'est plus retenu par la paroi pectocellulosique (en sachant qu'on a déjà broyé mécaniquement les fragments) ou pour que le SDS soit soluble dans l'alcool.   [...]

[Biologie Moléculaire] Rôle du saccharose dans un tampon de lyse

[Biologie Moléculaire] Rôle du saccharose dans un tampon de lyse.  [...] j'aimerai connaitre le rôle du saccharose dans un tampon de lyse contenant également du Tris-HCl, de l'EDTA et du Triton.  [...]

[Microbiologie] Viabilité d'une bactérie et ARN

C'est vrai qu'en general on s'en sert pour qualibrer car comme je le disais précédemment, le taux d'expression est relativement constant, donc ca joue le role d'un étalon dans tes mesures.  [...] -tampon d'incubation 1x (0.1M Acetate de Na, 5mM MgSO4 pH5.0). Tu peux aussi utiliser le tampon de RT qui est très proche en composition.  [...]

[Génétique] Extraction, purification et analyse d'ARN (Nanodrop et bioanalyser)

Utilisé pour l'electrophorèse après la PCR. La question...est-ce utilisé pour charger l'ADN. L'ADN étant acide, dans une solution basique il aurait tendance à libérer des protons et donc se charger. (pour faire une analogie, il prendrait le rôle du SDS [quelque chose comme ça] pour l'electrophorèse des protéines ).  [...] Le DMSO est effectivement un solvant, mais il permet aussi de prévenir la formation de structures secondaires dans l'ADN lors de la PCR. Le Na-azide est typiquement un conservateur utilisé dans beaucoup de produits de biologie (tampons, enzymes, anticorps...).  [...]

[Génétique] Extraction plasmidique rôle des buffers

ainsi que le rôle du tampon QC, QT et TE pourquoi autant de tampons différents.  [...] voilà ce que j'ai fais en tp. j'équilibre une colonne d'affinité avec du QBT, je mets ma solution avec mes plasmides dedans, je rajoute du QC, puis j'élue l'ADN avec un tampon QT, je fais précipiter l'ADN en y ajoutant de l'isopropanol, on passe à la centri, on récupère le culot qu'on redissout dans du tampon TE.  [...]

[Génétique] PCR - Calcul du nombre de cycles

1) non pas n'importe laquelle, il faut que les deux amorces (20 CHACUNE) ne soient pas complémentaires, aient un Tm similaire, une proportion de G/C similaire et entre 40 et 60% idéalement, etc.   [...] Ensuite, vu que tu sais comment se comporte la quantité d'ADN a chaque cycle d'amplification, il suffit de calculer le nombre de cycles pour arriver a 1µg.   [...]

PCR, amorces

En 5' ca n'a aucune importance, on peut meme y rajouter des bases totalement absentes de la matrice a amplifier (on rajoute frequemment des sites de restriction).   [...] plus le GC% est elevé, plus la temperature d'hybridation (Th) est elevée et plus ta PCR est specifique. Avec 20° de Th, tes amorces vont se coller un peu partout sur l'ADN et tu risques d'amplifier n'importe quoi.   [...]