• Forum - Complémentaires, Site, Restriction

[Biologie Moléculaire] Clonage avec plasmide

Elles permettent notamment en génie des vecteurs, d'ouvrir un plasmide, et d'y insérer un gène YFG dont les extrémités sont construites pour etre complémentaires avec le site de restriction pour que cela colle pile poil.  [...] Les amorces sont des oligonucléotides (en général environ 20nt), qui permettent d'encadrer sur les deux brins 5'3' et 3'5' la séquence que l'on veut amplifier. Ce sont donc des amorces qui permettent de donner un substrat de base à partir du quel les polymérases penvent continuer à générer des brins complémentaires d'amplification.  [...]

[Biochimie] nucléase

Ces courtes sections monobrins sont complémentaires l'une à l'autre. Les adénines peuvent s'apparier aux thymines avec la formation de 2 liaisons hydrogènes (c'est une renaturation en fait). Avec une coupure franche, pas de section monobrins générées, tu ne peux pas réapparier sur le principe de complémentarité.  [...] Si tu coupes avec deux enzymes différentes, les extrémités générées ne seront pas complémentaires l'une à l'autre puisque les enzymes vont couper différemment (le site de restriction n'est pas le même et le type de coupure non plus).  [...]

[Immunologie] Réaction antigène anticorps responsable de l'agglutination

Mais leur puissance est considérablement accrue parce qu'elles s'exercent entre deux fractions de molécule spécifiquement complémentaires. le site antigène d'une part, le site anticorps d'une part.  [...] Il semble également que la complémentarité stérique soit mise en cause dans le phénomène. il s'agit juste d'une complémentarité dans l'espace (à l'instar de la complémentarité clé/serrure). épitopes et paratopes s'imbriquent. On appelle ceci la reconaissance stérique.  [...]

Marche sur le chromosome

marche sur le chromosome Stratégie pour la cartographie et le séquençage d'un fragment d'ADN ainsi que pour le clonage positionnel. De grands fragments de restriction (ou clones de BAC) sont générés et, après criblage, un point de départ unique est identifié.  [...] De nouvelles sondes complémentaires à des séquences du même fragment mais adjacentes au point de départ (clone BAC) sont synthétisées et ensuite utilisées pour identifier de nouveaux fragments de restriction chevauchant le point de départ initial. Le procédé est répété, en s'éloignant progressivement du point de départ.  [...]

Maladie de Crohn et RCH - Page 79

Sweet78, dans les approches alternatives (et complémentaires, il ne s'agit pas de couper tout traitement) et scientifiquement testées pour Crohn, tu peux jeter un oeil sur le site de Passeport santé, partie traitements non conventionels et autres approches, et l'approche alimentaire du Dr Seignalet, assez significativement efficace sur Crohn mais pas sur RCH/Colite (car trop peu de patients testés), son site ici, partie élimination.  [...] Mon histoire ressemble à la tienne. Moi aussi j'ai été diagnostiquée récemment, je n'ai qu'un forme légère de la maladie et je dois prendre du Pentasa (9 comprimés par jour). Je déteste ce gonflement de l'abdomen, et j'aimerais que les autres qui sont aux prises avec cette maladie depuis plus longtemps nous, nous disent si on devra vivre avec ou si ce n'est qu'une réaction initiale au Pentasa et que ça passera.   [...]

[Biologie Moléculaire] le clonage impossible, ou comment se prendre la tete...

En effet Piwi, j ai pense a l insertion de sites de restriction par PCR. Le truc c est que je me dis que inserer des sites de restriction qui sont deja presents ds ma sequence, ca revient un peu au meme. Je ne peux pas introduire des sites de restriction plus classiques car apres je dois religuer cet insert ds le clone moleculaire original digere par EcoR1 et Sal1.  [...] Comme toi je digère mon plasmide avec 2 enzymes de restriction qui produisent des bouts cohésifs complémentaires (XbaI et NheI), puis je fais migrer sur gel (mais je colore avec du BET) puis je découpe mes bandes, purifie sur colonne en utilisant le même kit de purification que toi, puis je fais une ligation o/n à 16°C.  [...]

Maladie de Huntington et couple.

N'oubliez pas une chose. la recherche fait des progrès tous les ans sur ces maladies, et il est tout à fait possible que lorsque votre amie ressentira les premiers symptômes, d'ici une vingtaine d'années, il existe un traitement efficace, voire même une possibilité de guérison.   [...] Autrement, ici. http.//www.orpha.net/consor4.01/www/..._Search_Simple vous avez un lien vers un site très bien fait et documenté, qui sert de référence aux médecins, et sur lequel vous trouverez d'autres renseignements, en particulier en allant dans l'onglet renseignements complémentaires.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problèmes: Recombinaison d'un plasmide

Lorsqu'on incorpore un gène dans un plasmide disponible dans le commerce, on aimerait insérer le moins d'ADN supplémentaire possible en plus du gène réel avec son promoteur. Parfois, cependant, il n'y a pas de séquence de restriction appropriée dans la région avant et après le gène qui peut également être trouvé dans le plasmide.  [...] Il faut que tu amplifies ta séquence par PCR en choisissant bien tes amorces. Il faut qu'elles soient complémentaires aux extrémités de ta séquences avec en plus une courte séquences qui ne correspondent pas à ton gène mais qui contiennent une séquence de restriction (on ajoute généralement quelques bases supplémentaires qui ne correspondent à rien et qui vont permettre à l'enzyme de bien se poser sur tes fragment lors de la digestion.  [...]

Maladie périodique - Page 2

Il faut que tu ailles consulter d'autres médecins, avoir des avis complémentaires car c'est une maladie qui se traite bien avec la colchicine, mais pour certains, ça peut ne pas être le cas et il existe (je l'ai lu sur le site d'ORPHANET) un autre médicament quand la colchicine ne marche pas.  [...] Pour le Professeur Livneh, tu n'as pas pu te tromper, il consulte bien dans un hôpital à Tel Aviv. Je vais essayer de surfer moi aussi pour voi si je peux trouver des infos supplémentaires.   [...]

[Biologie Moléculaire] Mutagénèse dirigée qui ne fonctionne pas

Je me suis lancée dans une mutagénèse avec le kit LIGHTNING de Stratagène, designé des primers complémentaires (33pb)sur leur site selon leurs caractéristiques comportant mes 3 nucléotides, varié les concentrations en DNA lors de la PCR, la température d'annealing, les temps d'annealing et d'élongation, le nombre de cycles.  [...] 2) Si, soyons fou, je décide d'insérer Flag flanqué de mon site de restriction (le but est de pouvoir ensuite changé le tag comme bon me semble..quand on est fou on est fou.) tout entier à la place des 3 nucléotides et donc d'avoir dans mes primers centraux une extrémité libre strictement non complémentaire (pas d'hairpin et tout le bazar non plus).  [...]