• Forum - Coloration, Extraction, ADN, Frottis

[Biologie Moléculaire] Effet de coloration MGG sur l'extraction d'ADN à partir des frottis colorés

Je suis entraine d'extraire d'éventuel ADN parasitaire à partir de frottis coloré au MGG (may grunwald Giemsa), et j'ai constaté que lorsque j'extrais à partir d'une lame non colorée j'obtiens de l'ADN, mais quand la lame est colorée au MGG je n'ai rien, ni ADN de l'hôte ni celui du parasite (pas de bande sur mon gel contôle).  [...] à noter. j'utilise la méthode classique d'extraction (phénol-chloroforme) et bien sure je fais une étape de purification d'ADN quand ma lame est colorée.  [...]

[Biologie Moléculaire] SOS-protocol d'extraction d'Adn

je suis etudiant en master et je bosse sur un sujet de recherche. typage des HPV qui cause le cancer du col de l'uteris et dans ce cadre j'utilise un kit de typage, ben jaimerais bien comparer ce kit avec l'extraction classique...pcr...hybridati on.  [...] Tu devrais te renseigner sur des adaptations du protocole HIRT, qui fonctionne très bien avec le CMV et existe aussi pour les HIV.   [...]

Coloration -microbiologie

Dans un protocole intéressant sur la coloration des bactéries, je m'intéresse à la coloration des capsules autours d'elles. Dans le protocole, ils préconisent de faire un frottis de bactérie mélangé avec du rouge congo. Puis après lavage, d'inonder le frottis avec du colorant de Maneval.  [...] Alors si j'ai bien compris le rouge Congo va colorer le milieu autour des bactéries en rouge. Le Maneval lui est composé d'acide acétique et de fuchsine. L'acide acétique va acidifier le rouge Congo qui deviendra alors bleu (coloration bleu autour de la bactérie).  [...]

Utilisation d'eau PPi pour une coloration May Grunwald Giemsa

Lors de mon stage en labo, pour la coloration au May Grunwald Giemsa, les techniciens, après la fixation du frottis par le may grunwald, utilisent de l'eau ppi pour colorer le frottis. Et pour la dilution du Giemsa et les rinçages ils ont utilisé de l'eau distillée.  [...] Je me demande donc qu'est ce qu'apporte l'eau Ppi à ce stade de la coloration et pourquoi ne pas utiliser de l'eau ppi pour la dilution du giemsa et les rinçages.  [...]

[Biologie Cellulaire] Compter le nombe de plaquette & globules

Et puis quand on a des résultats douteux ou une anomalie, on contrôle la formule en faisant un frottis observé après coloration sous le microscope.  [...] La méthode de référence pour ces numérations reste la variation d'impédance, où chaque cellule passant à travers un orifice va modifier le courant électrique en fonction de sa taille.   [...]

Avis sur un microscope... Des conseils ?

Les frottis comme les colorations sont des techniques plutôt précises dans leur réalisation, si on veut un résultat observable voire interprétable.  [...] Autre remarque. un objectif X40 en sachant que l'occulaire aussi a un pouvoir grossissant de x10, ça donne un grossissement x400. C'est pas mal pour observer la mobilité bactérienne, de paramécies et quelques tests sanguins comme la coloration vitale au Bleu de Trypan (il me semble).  [...]

purpura thrombophénique trombotique

Dans sa forme complète, elle associe un purpura thrombopènique (micros hémorrhagies dûes à un manque de plaquettes), des troubles nerveux et rénaux dûs à la formation de micro-thrombus dans les micro-vaisseaux de ces organes (et qui explique donc la thrombopénie par consommation),une anémie hémolytique (baisse du taux d'hémoglobine dans le sang dûe à la destruction des globules rouges, qui se cassent sur les micro-thrombus.   [...] Lorsqu'on fait un frottis sanguin (étalement d'une goutte de sang sur une lame et coloration puis examen au microscope), on note la présence de schizocytes = fragments de globules rouges).  [...]

[Biologie Cellulaire] Colorant pour cellules vivantes

Je cherche un colorant à appliquer sur des cellules vivantes pour pouvoir faire une observation net au microscope. l'idéale serait qu'il ne soit pas toxique, et que l'on puisse suivre les cellules plusieures heures voir plusieurs jours.  [...] par rapport a ta question. tu sais que presque tous les colorants sont toxiques. donc dangereux pour des cellules vivantes. mais il ya la coloration supravitale qui s'applique à des cellules vivantes retirés de l'organisme comme les frottis sanguin. je crois qu'avec sa tu fera avancera dans tes recherches.  [...]

[Biologie Moléculaire] Comment interpréter les lames d'un test cytologique pour la détection du HPV

Le frottis conventionnel utilise la coloration de Papanicolaou. On y cherche des koïlocytes qui sont des cellules vacuolisées à gros noyaux témoignant d'un effet cytopathogène typique du HPV.  [...] Pour continuer sur la technique, tous les frottis, et quel que soit la technique utilisé,sont coloré par le Papanicolaou. Cette coloration comprend 5 colorants. En premier l'hémalun qui colore les noyaux, puis l'EA 50 (composé de trois colorants. Vert lumière, Brun Bismark et Eosine) et enfin l'Orange G6 (OG6). L'EA 50 et l'OG6 colorent les cytoplasmes.  [...]

[Microbiologie] Réalisation d'un état frais

Ensuite une autre question. pour fixer un frottis avant la coloration de Gram faut-il le fixer a la flamme du bec bunsen ou a la veilleuse du bec.  [...] Pour ce qui est du frottis, le séchage s'effectue en portant la lame au-dessus de la flamme du bec Bunsen (20 à 30cm) en la tenant entre pouce et index. ceci évite un chauffage trop violant.  [...]