• Forum - Colorant, Fluorescent, ADN

[Biologie Moléculaire] Courbes PCR en temps réel

Alors petit rappel. le principe de la PCR quantitative est qu'on est capable de suivre l'évolution de la quantité d'amplicon formée au fil des cycles. Pour cela, on a une matrice, une paire d'amorces ciblant la région que l'on veut amplifier, une enzyme, des nucléotides, et un colorant fluorescent de l'ADN.  [...] Comme la fluorescence disparait quand l'ADN est dénaturé, lorsque l'on atteint la température de fusion de notre produit, il ya une grosse chute de l'intensité de fluorescence. On représente ça sous forme de vitesse de disparition de la fluorescence en fonction de la température, comme en C ou D.  [...]

Différence sang veau / humain

Le spectre du sang doit bien avoir des raies spécifiques, on aurait put déterminez le spectre du sang, cela permettrais aux scientifiques de déterminez le spectre du sang et ainsi le comparer à celui d'un homme, pour prouver que c'est du sang et non un colorant.  [...] pour prouver que t'as de l'ADN et pas un colorant tu peux utiliser des marqueurs tels que le BET (toxique pas sur que t'ai le droit d'en manipuler) qui 'intercale entre les base de l'ADN et devint fluorescent sous UV, ou du SYBRgreen (techniquement moins toxique, mais controversé).  [...]

[Biotechnologie] microscopie sur cellule transparente

Pourquoi ne pas utiliser des colorants de l'ADN si tu dois étudier les mitoses. Pense au vert de methyl qui est un très bon colorant (en tout cas pour les cellules végétales, c'est que j'utilise moi). La fluorescence est une tres bonne technique, mais je n'en connais pas les modalités, et je crois que malheureusement on ne peut rendre fluorescent que des protéines, enfin c'est la seule technique que je connais (GFP).  [...] Tu peux utiliser la fluorescence naturelle des cellules qui te permettra de visualiser les membranes cellulaires et pour l'ADN, j'ai utilisé le DAPI (Di Aminido Phenyl lndol) qui permet de très bien visualiser les mitoses par exemple (coloration spécifique de l'ADN).  [...]

[Biologie Moléculaire] Questions de Biologie moléculaire

3* En ce qui concerne la visualisation de l'ADN je connais la coloration au bromure d'éthidium qui se fixe à l'ADN double brin et devient fluorescent lorsqu'il est exposé aux rayonnements UV.  [...] 4*La précipitation des acides nucléiques peut se faire à l'aide de l'éthanol ou l'isopropanol, la différence réside dans le fait que la méthode à l'éthanol nécessite la présence de sel et la précipitation se réalise par addition de deux volumes d'éthanol à un volume de la solution, alors que la méthode à l'isopropanol ne nécessite pas la présence de sel et la précipitation se fait par un mélange volume à volume.   [...]

[Physiologie] Méthode de mesure du [Ca 2+] intra: le Fura 2

Quelq'un connaitrait le principe (en bref) de cette méthode qu'est ce que le fura2 j'ai beau chercher sur le net je ne trouve pas.   [...] C'est un colorant fluorescent et sensible aux ions Ca 2+.  [...]

[Microbiologie] recombinaisons génétiques (bactéries)

euh voila j'ai un petit souci de comprehension concernant les recombinaisons génétiques chez les bactéries. Je pensais avoir bien compris le principe jusqu'à ce qu'on nous parle du devenir de l'exogenote. En fait pour moi, la bactérie Hfr intégrait le facteur de fertilité F dans son chromosome par recombinaison homologue, mais les deu brins de l'ADN pour moi étaient intégrés lors de cette recombinaison.  [...] On observe les plaques métaphasiques dans la lignée germinale en révélant le BrDU par un colorant fluorescent. on observe alors des chromosomes arlequins qui présentent au niveau des chiasmas des structures en croix avec échange entre un brin sombre et un brin fluorescent.  [...]

ADN et Photons ?

Si ça peut te rassurer, je n'ai jamais vu de l'ADN emmettre de la lumière.. (sauf après marquarge fluorescent au DAPI, mais là c'est le marqueur qui emet des photons, pas l'ADN).  [...] Des gens regardent des coupes histologiques tous les jours sous les microscopes les plus puissants. Même si ca ne devait fluorescer qu'une fois sur mille à des taux tres faible quelqu'un l'aurait vu.  [...]

La PCR fragments d’adn

Mais lorsque que l'on dit que la police s'intéresse à l'adn Non codant, logiquement ce sont les des fragments d'adn Non codant qu'ils utilisent pour la méthode de la pcr (en suit l'electrophorèse).. sinon a quoi cela servirait de dire qu'ils s'intéressent uniquement à ce type d'adn.  [...] D'accord merci. Oui je sais très bien, c'est à partir des fragments amplifiés que l'electrophorèse est alors possible. La police est alors capable de trouver l'individu si celui ci est fiché au FAEG. Pour cela ils comparent ( a l'aide l'electrophorèse )la migration des fragments de l'échantillon biologique prélevé sur la scène de crime avec celui fiche au FAEG.   [...]

Expériences en génétique…

Le bromur d'ethidium est un produit qui se fixe sur l'ADN et qui une fois en place devient fluorescent dans les ultra violets. Tu vas donc pouvoir voir tes deux bouts d'ADN dans le gel sous une lumière UV.  [...] On utilise alors des enzymes qui coupent l'ADN au niveau de séquences précises et connues (enzymes de restriction). Ensuite on fait migrer l'ADN sur gel d'agarose, en fonction de sa taille, et on le révèle aux UV grâce à une molécule fluorescente, le Bromure d'éthyduim (BET).  [...]

definition exacte des genes et alleles

Elle peut être utilisée sur de l'ADN, de l'ARN, des protéines, par fluorescence (ce sont des sondes moléculaires avec un marqueur fluorescent).  [...] Elle est par exemple utilisée pour détecter certaines maladies génétiques, comme le syndrome de Jacobsen ou celui de Williams, par repérage de micro-délétions. On peut aussi l'utiliser pour étudier la biodiversité. Cette technique est aussi appelée hybridation in situ en fluorescence.  [...]