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[Divers] Un agent mutagéne: les ultraviolets ! Aide ?

Bonjour, j'ai besoin d'aide, j'avoue je ne suis pas doué en Biologie et justement je dois rendre un dossier sur les ultraviolets la semaine prochaine si vous pouvez m'aidez je vous remercierai jamais assez donc voilà dans mon travail je dois mettre en évidence l'universalité du code génétique, est des mécanismes de transmission et de décodage du ce code.   [...] Nous avions irradié une boite fraichement ensemencé (levures isolées n'ayant pas encore formé de colonies). ==. Au bout de 3 jours, nous avions des colonies roses, et d'autres blanches, alors que sur la boite controle non traitée, toutes les levures étaient roses.  [...]

[Biologie Moléculaire] Contrôle négatif clonage

Après culture sur milieu sélectif additionné d'ampicilline, on a obtenu plus de colonies pour notre clonage que sur la boite du contrôle (il y avait des colonies sur la boite du contrôle, normalement il devrait pas ne pas en avoir ). Je n'arrive pas à comprendre exactement pourquoi nous avons eu plus de colonies et ce que nous devrions retrouvés sur la boite de contrôle.  [...] Si vous avez 10 000 colonies sur la boite expérimentales et 10 colonies sur la boite contrôle c'est bon. Vous piquez quelques colonies et vous savez que la majorité de vos clones contiendront l'insert. Si vous avec 10 000 et 8 000, vous savez que vos restrictions de plasmides ne sont pas efficaces et qu'il va vous falloir screener pas mal de colonies pour trouver vos petits. Prévoir un colony lift dans ces cas là.  [...]

[Biologie Moléculaire] cellules compétentes DH5a

en vu de clonner un fragment de gene, jai commencé par préparer des cellules compétentes DH5a, par traitement avec la glace. 20min dans la glace suivies par des lavages avec le glycerol. Aprés la transformation par électroporation, j'ai trouvé des colonies sur la boite LB+Amp de controle négatif( cellules DH5a sans vecteur) sur les autres boites LB+ Amp+ IPTG+ X-Gal j'ai trouver des colonies blanches et des colonies bleu.  [...] Le fait d'avoir des colonies sur ta boite controle indique que soit tu t'es trompé et tu as mis du plasmide la ou il ne fallait pas. soit que tu as une legere contamination (ca depend aussi du nombre de colonies que tu as).  [...]

[Biochimie] Vecteur d'expression pour une proteine recombinante

Tout ça fait que dans la culture contrôle (sans insert), tu devrais avoir moins de colonies que dans la culture ou tu as inséré le vecteur et l'insert puisque le vecteur est en principe incapable de se linéariser.  [...] Le rapport nombre de colonies dans la boite témoin/nb de colonies sur la boite insert_vecteur donne une bonne indication de la réussite de la ligation et de l'incorporation de ta construction dans le vecteur. Il y a en général quand même des colonies dans la boite controle, prinicpalement parce que il subsiste quelques exemplaires circulaires de ton vecteur.  [...]

[Microbiologie] Les différents systèmes de comptage de colonies en boîte de Petri

je viens de commencer mon mémoire de fin d'etudes qui porte sur l'analyse et le comptage de colonies (bactéries) dans une boite de petri,et j'aimerais juste avoir quelques informations sur les différents systèmes ou méthodes de comptage de colonies en boite de petri, et lesquelles, svp.  [...] Le plus souvent, les colonies sont comptés sans outils. on peut utiliser un petit compteur sur lequel on appuie chaque fois qu'un compte une colonie (cela permet de se concentrer sur la boite et moins sur les nombres). Mieux, il existe des stylos électroniques qui comptent 1 chaque fois que l'on appuie avec sur la boite, au niveau d'une colonie.  [...]

[Divers] Bactéries

Pour faire le dénombrement de bactéries,on fait différentes dilutions de rapport 10 et ensuite on met cultiver ces solutions dans des boites de Pétri.Plus la dilution augmente, moins on aura de colonies sur la boite.  [...] Méthodes de dénombrement bactérien. Tout va être basé sur des méthodes de dilution car on ne peut pas compter les bactéries sur un champ s'il y en a 1 milliard par exemple. Il faut diluer pour avoir quelques bactéries par champ. C'est la même chose sur une boîte de Pétri, si on a plus de 1000 colonies, on ne peut plus compter car on a une nappe de bactéries, de colonies qui sont confluentes.  [...]

aide pour culture bactérie

Pour récuperer des bactéries c'est assez simple. Vous prenez une boite de culture avec du milieu, vous mettez vos doigts dessus (pas fraichement lavés), vous incubez à 37°C durant une nuit (ou deux) et vous devriez voir des colonies. Vous devriez trouver des colonies jaunes qui correspondent à staphylococcus aureus (staphylocoque doré).  [...] Une autre méthode facile pour cultiver des bactéries est de partir d'un yaourt. quelque millilitres dilués et étalés sur une boite devrait vous fournir des belles colonies de bactéries lactiques. Moins contraignantes que les Staph, les bactéries lactiques sont par contre plus résistantes à un certain nombre d'antibiotiques.  [...]

[Biologie Cellulaire] Exercice Bio PCEM1

On calcule déjà la moyenne des colonies par boîte. le calcul nous donne 11 colonies.. mais après je ne vois pas comment il faut faire.  [...] Pour concentration la culture, il est probable que la culture C ait été centrifugé. les colonies ont donc été culottées au fond d'un tube et resuspendues dans du milieu de culture, dans un volume 5x plus petit que celui de C (c'est cela que signifie concentrer une culture ).  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de construction d'une banque d'ADNc

Apparemment c'est la ligation qui bloque... en utilisant une ligase différente de celle du kit et en étalant les cellules après centrifugation (concentrées) je me suis rendue compte qu'il y a des colonies sur ma boite.  [...] Pour déterminer approximativement le nombre de bactéries transformées dans un volume donné, tu ensemences un volume donné de ta suspension bactérienne. Après étalement sur boite tu comptes le nombre de colonies formées et tu en déduis le nombre de bactéries transformés dans ta suspension en le multipliant par le facteur volume total/volume prélevé, tout simplement.  [...]

Hybridations plasmides et sondes

Cette manip te permet de visulaiser quelles colonies (et donc quels plasmides) contiennent ta sequence d'interet (tu auras un spot noir sur ta photo). Ensuite, il ne te reste plus qu'à recuperer les colonies identifiées sur ta deuxieme boite de petri (identique à ta membrane de nitrocellulose puisque replique), a les relancer en milieu liquide pour en extraire l'ADN plasmidique (manip 2).  [...] Oui exactement, tu fais ca via un velour (buvard). Generalement, tu place ton velour sur l'appareil de replication, tu appliques sur ta boite d'origine, tu passes ensuite vers ta membrane, et avec le meme velour tu finis sur une boite de petri neuve. Utiliser le meme velour pour toutes repliques te permet de controler la qualite de ta replication.  [...]