• Forum - Colonies, Beta, Bactéries, Avantage, Rapport

X-gal

Le x-gal a-t-il une autre utilité que celle de permettre de distinguer des colonies ayant une beta galactosidase fonctionelle des autres colonies les bactéries capables de le métaboliser peuvent-elles en tirer un avantage quelquonque par rapport aux autres.  [...] par contre, toute enzyme supplémentaire apporte un avantage sur les autres bactéries. notamment en cas de compétition trophique.  [...]

Criblage

Dans la synthèse de l'insuline in vitro par exemple, on effectue un criblage des colonies blanches obtenues après ensemencement sur un milieu contenant le lactose. On rechercher les bactéries ayant un plasmide contenant le gène recherché mais le fait que ces colonies soient blanches, cela veut dire pas d'expression du gène de la beta-galactosidase et donc insertion du gène d'intérêt non.  [...] Si une colonie pousse, c'est qu'elle a bien reçu un plasmide. cet événement est séléctionné par un gène de résistance à un antibiotique présent dans le milieu.  [...]

operon

On utilise une bactérie déficiente pour un gène codant la beta galactosidase, ce gène étant grand c'est un petit fragment en n-terminal qui est tronqué dans la bactérie, la version fonctionnelle est dans le plasmide.  [...] -le gène lac Z est fonctionnel. il y a production de beta gal, si on ajoute du Xgal dans la gélose les bactéries qui possèdent ce gène et si ce gène est intact produirons la beta gal les colonies seront colorées en bleu.  [...]

Les colonies satellites dans un milieu aditionné d'Ampicilline

C'est tout simplement parce que tes bactéries résistances à l'amp secrètent une beta-lactamase dans le milieu. Y a donc des bactéries non résistantes qui poussent autour (colonies sat).  [...] La Beta-lactamase diffuse autour des colonies résistantes, et ça permet aux bactéries non résistantes de pousser sous forme de colonies satellites, ça arrive, mais ceci reste à vérifier.  [...]

[2nde] L'ADN...

Résultat du transfert d'ADN. La protéine GFP rend fluorescente les organismes dans lesquels elle est présente, lorsqu'on les soumets aux rayonnements ultraviolets. Sous une lumiere normale, il apparaît autant de colonies de bactéries dans les 2 boîtes ( ci-dessus il y à 2 boites, une boîte témoin et une boîte experience ).  [...] Selon moi, il n'y a aucun rapport avec la croissance des bactéries et le nombre de colonies. Ces informations sont juste là pour dire que a protéine n'affecte pas la multiplication bactérienne.  [...]

[Microbiologie] Méthodes de lyse bactérienne

En fait tout depend en effet de ce que l'on regarde, ce que l'on cherche a identifier etc... Mais coli est plutot une bacterie facile a lyser par rapport a des gram+. Par expl quand on veut faire des PCR sur colonies on lyse les bacteries uniquement en les faisant chauffer 5 min a 100°c.  [...] Coli) en contact avec les bacteriophages mais pour ça il faudrait un indicateur pour différencier les bacteries tuées et les autres bacteries formées car j'utilise le spectrophotomètre. J'avais pensé à mettre les bacteriophages en excès par rapports aux bacteries mais je ne suis pas sur.  [...]

[Divers] Bactéries

Pour faire le dénombrement de bactéries,on fait différentes dilutions de rapport 10 et ensuite on met cultiver ces solutions dans des boites de Pétri.Plus la dilution augmente, moins on aura de colonies sur la boite.  [...] Tu comptes donc N = 20 colonies, ce qui signifie qu'il y avait 20 bactéries (vivantes en tout cas, les mortes ne pouvant pas pousser) dans les 100 µL que tu as étalés. Et il y avait donc 20*100 = 2000 bactéries dans les 10 mL du tube correspondant. Et comme ce tube correspond à une dilution au 1/100000 e de ta culture de départ, tu as 100000 fois plus de bactéries dans ton premier tube, soit 2000*10 5 = 2.10 8 bactéries.  [...]

[Génétique] Help! tp génétique, analyse clonage

L'efficacité de transfo = nombre de bactéries avec plasmides /ug d'ADN.==. bacto sur milieu sélectif / quantité d'ADN utilisé pour la transfo. Tenir compte de la dilution éventuelle des bactos avant étalement.  [...] * si j'ai un gène lacZ fonctionnel, il produira la bêta-galactosidase. si j'ajoute X-gal dans le milieu, les bactéries possédant ce gène lacZ fonctionnel produiront la béta-galactosidase et lemétabolisme de l'X-gal se fera. les colonies seront donc colorées en bleu (sur milieu supplémentée en X-gal, j'insiste).  [...]

[Biologie Moléculaire] Amplification et purification de plasmide

Sans bactéries, plusieurs semaines. Si des bactéries résistantes recrachent une enzyme comme la bêta-lactamase, tu peux épuiser un milieu liquide en quelques heures. C'est la diffusion de cette enzyme sur les milieux gélosés qui est responsable de l'apparition de colonies satellites sur les boîtes ampi qu'on a oublié à 37°C pendant le week-end.  [...] De deux choses l'une. soit ta combinaison plasmide/bactérie donne un faible rendement, soit ta technique de purif ne marche pas. Je te conseille de garder un aliquot (1.5ml) de tes bactéries avant de les lyser pour ta prep sur colonne. Fais une miniprep classique sur cet aliquot (lyse alcaline + isopropanol) et estime ton rendement en plasmide.  [...]

[Microbiologie] Arnaque (?) : Les bactéries de l'atmosphère

Et à la surprise des chercheurs des colonies se apparurent et développèrent, formées d'agglomérats de bactéries en forme de bâtonnets et de coques identifiées comme appartenant aux espèces Bacillus simplex, et Staphylococcus pasteuri. Les analyses d'ARN ont indiqué 100% de similitude des premières par rapport à la variété terrestre connue, et 99,8% pour les secondes.  [...] Pour l'histoire de l'ADN, c'est vrai qu'une PCR aurait du mettre en évidence l'ADN... peut etre l'ont ils fait. et ont obtenus un signal, ensuite il s'agissait de montrer que ces bacteries etaient vivantes. Bon ca c'est la logique, maintenant comme c'est le soir, soyons fou, imaginons une raison folle.  [...]