• Forum - Colonie, Bactéries, Boîte

[Biochimie] Question sur la biotechnologie

Une méthode simple de criblage est l'hybridation sur membrane avec une sonde radioactive. Par exemple, si tu as réalisé ta banque par clonage avec des plasmides chez E. coli, tu fais une réplique des boîtes de Petri contenant la banque sur une membrane de nitrocellulose, tu soumets la membrane à l'action de la soude (qui lyse les bactéries et dénature l'ADN), ensuite tu incube la membrane avec une sonde radioactive complémentaire de ta séquence d'intérêt, puis tu révèles par autoradiographie.  [...] Dans une banque tu as de nombreux clones différents. Ceux identiques sont ceux qui forment une colonie (=un clone) sur ta boîte (car il faut des millions de bactéries pour former quelque chose de visible à l'oeil nu). Sur une boîte de Petri tu peux avoir des centaines de colonies qui correspondent à un fragment d'ADN unique au sein de la banque.  [...]

[Biologie Moléculaire] Question Urgente Sur Le Clonage

J'ai une question. ont a une boite pétrie avec 5 colonie bactérienne ( meme souche meme espèces.. ) c es les meme bactéries a l exception d une seul ca particularité c'es que elle porte une gene que ont lui a implémenter.  [...] sachant que c'es exactement la même bactérie a l exception de ce gène.  [...]

[Biologie Cellulaire] Stockage des bactéries thermocompétentes?

Après transformation de ces bactéries (avec mon vecteur et le vecteur de contrôle), je n'ai obtenu aucune colonie sur boite de pétri.  [...] J'ai effectué un test supplémentaire. Mettre mes bactéries à pousser sans agent de sélection. Elles ont bien poussé. L'absence de colonie serait donc du à la perte de compétence de mes bactéries.  [...]

[Biologie Moléculaire] Mutagenèse: Pb...

Chez d'autres bactéries comme E. coli DH5 alpha, avec 10 ng de plasmide on a un nombre de colonie énorme sur boite. Donc faire preuve de retenue lorsque l'on n'est pas d'accord avec un protocole fonctionnant pour quelqu'un d'autre me parait judicieux.  [...] Mon exemple sur les deux types de bactéries ne faisait qu'illustrer les différences que l'on peut observer d'un matériel biologique à l'autre.  [...]

[Biochimie] Boîte de Petri.

Je suis en première S, et nous allons bientôt travailler sur des expériences faites avec des boîtes de Petri. Je voulais savoir quel était le moyen de transporter par exemple une colonie de bactéries d'une boîte à l'autre.  [...] Il vous faut procéder par répliquat. C'est à dire que vous posez un papier peu basorbant sur votre boite de culture, les bactéries vont s'y coller. Vous reprenez votre papier et vous le poser dans la nouvelle boite. Les bactéries vont se redéposer sur la gélose en une réplique de la boite initiale.  [...]

Quelques question en bactériologie et microbiologie

=. J'ai répondu que l'expérience de dénombrement consiste à diluer suffisamment un échantillon contenant des bactéries en milieu liquide. Jusqu'à faire un étalement de ce milieu liquide sur boite gélose. L'idée étant d'avoir un nombre de colonie supérieur à 30 et inférieur à 300.  [...] Du coup une UFC = Unité formant colonie. Les colonies sont à la base formée d'une bactérie viable qui s'est multipliée pour former une colonie visible à l'oeil nu (et donc comportant des millions de bactéries).  [...]

[Biochimie] Induction de protéines GST

Pour répondre à tes questions, au début, j'étais repartie d'une colonie que j'avais repiqué sur boite ampi. N'ayant pas eu de résulats, je suis repartie de mon glycérol stock mais toujours rien. Je n'ai pas retenté de transformer à nouveau dans des bactéries mais je pense que je vais essayer, voir ce que ça donne.  [...] Sinon il y a un test que vous n'avez pas fait et qui pourrait être intéressant. Normalement de base on induit à l'IPTG quand on a une bonne concentration en bactéries (DO = 0.6). Certaines fois il faut induire quand il y a moins de bactéries ou quand il y en a plus.  [...]

[Microbiologie] Problème de repiquage

Alors voilà, j'ai des bactéries stockées à 4°C (lactobacillus mucosae) dans une matrice de glycérol, je les repiques sur boite de pétri (milieu MRS) et je laisse incuber pendant 3 jours à 37°C, après les trois jours d'incubation je repique une colonie dans 5ml de MRS liquide et j'incube une nuit à 37°C et la le drame.  [...] Certaines personnes inoculent leur milieu liquide en prenant la colonie par l'intermédiaire d'un cône de micropipette et le jette dans le tube. Or desfois de l'anios mal essuyé sur la micropipette se retrouvent donc sur le cône, puis se dilue dans le milieu de culture, ce qui tuent les bactéries.  [...]

Les colonies satellites dans un milieu aditionné d'Ampicilline

Sur ta boite Antibio 2 (sur lequel tu as fait ta transfo), imagine que tu as 20 transformants. Ce que tu fais, c'est que tu les numérotes (par exemple tu en prend 10). Chaque colonie (= numéro) représente donc un background génétique. Ensuite tu prend un tip, tu prend la colonie 1 avec et tu fais d'abord une strie sur LB Amp puis sur une boite LB antibio2 (tu gardes le même tips, c'est a dire le même ensemenceur, c'est à dire les mêmes bactéries).  [...] Mise à jour. Pour les colonies sats qui poussent avec antbio2, si ca se trouve c'est un mélange de bactéries portant ou pas l'insert. La technique que je te propose est la plus simple et la plus correcte.  [...]

Experience SVT aider moi

1 semain apres, j'ai observer que dans la boite de Petris temoin il y avait moins de colonie de levures que dans la boite avec la camomille ou il y en avait plus.  [...] Dans les intestins, il n'y a pas que des levures. Il y a également des bactéries et autres organismes unicellulaire (y compris des virus de bactéries, des phages).  [...]