• Forum - Coefficient, Extinction, ADN

[Optique] Dénaturation ADN et coefficient d'extinction

Comment expliquer cela J'ai pensé au fait que l'ADN étant dénaturé, il n'y a plus d'interactions entre plans de bases, ce qui fait que l'on a enlevé des liaisons qui pouvaient empêcher dans le cas de l'hélice certaines transitions optiques, mais bon ce n'est pas une explication très rigoureuse.  [...] Lors de la dénaturation, on chauffe ce qui fait diminuer la viscosité de l'ADN, et augmenter sa densité optique (effet hyperchrome, dit autrement hyperchromoticité). La séparation des deux brins de l'hélice d'ADN joue dans ce cas.  [...]

[Biochimie] Loi de Beer Lambert

A partir d'un clone bactérien, vous effectuez une extraction plasmidique. Sur une dilution au centième de votre éluât, vous réalisez un dosage au spectrophotomètre. Vous obtenez une densité optique de 0.32 pour 260 nm et de 0.16 pour 240 nm.   [...] Peut être devriez vous savoir que le coefficient d'extinction de l'ADN est 50 ug/ml.  [...]

[Biochimie] Pourquoi parle-t-on pour le cas des protéine du coefficient spécifique d'extinction.

au sujet de l'absorbance des proteine via la loi de beer lambert le coefficient utilisé pour les proteine est E 1% 1cm. Ce qu'on appelle le coefficient spécifique d'extinction. La concentration y est exprimée en g/ml.  [...] alors est ce juste une convention ou en fait il est absurde de parler de coefficient d'extinction molaire pour les protéine pcque elle possède un haut poid moleculaire.  [...]

[Biochimie] Concentration d'un produit PCR

La spectro à 260/280 ne me parait pas la méthode de choix pour quantifier un produit de PCR. En effet, avec un coefficient d'extinction de 50ug/ml pour 1 DO et des volumes de cuve rarement inférieurs à 300ul, il faut que disposer de quelques ug d'ADN (au moins) pour que la mesure soit fiable.  [...] Par contre je suis d'accord, la fluorimétrie même sans nanodrop sera plus précise. C'est la seule fois ou mon coefficient de régression était de 1.  [...]

[Biochimie] coefficient d'extinction molaire

La phénolphtaléine est utilisé comme indicateur de PH. Sa forme acide est incolore et donc n'absorbe pas dans le visible alors que sa forme basique (entre PH 8,2 et 10) devient rose (absorption dans le visible, et donc coefficient d'extinction molaire je crois que c'est pour une longueur d'onde vers 530 nm mais je suis pas sur).  [...] Personellement, j'ai toujours entendu parler de coefficient d'extinction molaire (et pas moléculaire) avec la loi de beer lambert (epsilon. unité M-1 cm-1) mais bon ma culture reste limité dans le domaine.  [...]

coefficient d'extinction molaire

j'aimerai savoir ça veut dire quoi coefficient d'extinction molaire la définition de wikipedia n'est pas du tout claire.  [...] Pour quoi on doit diviser le deltta DO sur le coefficient d'extinction molaire pour avoir l'activité volumique enzymatique pour quoi deviser et non pas multiplier par le coefficient d'extinction molaire.  [...]

[Biochimie] Activité enzymatique

Connais-tu le coefficient d'extinction molaire du TNB C'est grâce à lui que tu pourras déterminer l'activité enzymatique.  [...] Cela te permet de convertir les absorbances en concentration molaire, donc tu convertis ton coefficient directeur en M/seconde en le divisant par le coefficient d'extinction molaire. Puis tu le multiplies par le volume du milieu réactionnel pour avoir des mol/seconde, et multiplier par 60 si tu veux l'exprimer en minutes.  [...]

[Biochimie] coefficient d'absorption à 280nm

Pour chaque type de collagène il existe plusieurs chaînes codées par des gènes différents. Si vous précisez la chaîne dont vous voulez le coefficient d'extinction molaire, on doit pouvoir le trouver. ^^.  [...] C'est un coefficient d'extinction massique ça non pour être aussi petit Parce que les coefficients d'extinction molaire sont généralement des gros nombres de plusieurs milliers d'unités.  [...]

[Biochimie] Activité enzymatique

J'ai eu un TP sur l'activité enzymatique de la phosphatase alcaline. Il y a eu plusieurs manipulations (avec et sans inhibiteur), et avec les résultats d'absorbance qu'on a mesuré, on doit déterminer le Km et le Vmax à partir de différentes méthodes de linéarisation (Lineweaver & Burk, Eadie & Hofstee et Hanes).   [...] Focalisons-nous par exemple sur la méthode de Lineweaver & Burk (ordonnée en min/dA et abscisse en 1/millimolaire) pour une réaction sans inhibiteur.   [...]

titre d'extinction

je travaille sur un compte rendu de TP sur le test ELISA et on me demande de déterminer le titre d'extinction de mes solutions inconnues.  [...] Or je ne sais pas du tout comment on calcule le titre d'extinction. Certain m'ont dit qu'il fallait que je calcule le coefficient d'extinction molaire or normalement c'est une donnée.  [...]