• Forum - Clonage, Synthèse, ARN, ADN

[Biologie Moléculaire] Clonage/ synthèse ARN/ ADN

[Biologie Moléculaire] Clonage/ synthèse ARN/ ADN.  [...] Aussi je souhaiterais synthétiser une séquence d'ARN complémentaire à un gène cible.  [...]

[Biologie Moléculaire] L'ADNc est simple ou double brin ?

ADNc designe une molecule d'ADN obtenue par reverse transcription a partir d'un ARN. Cette molécule est donc simple brin. Si on veut la rendre double brin alors il faut effectuer une etape de synthese avec une DNA pol classique (polI ou Taq par expl). Donc en fait la molecule d'ADNc originelle est simple brin, mais tres fréquemment on la rends double brin pour plus de facilité de manipulation (sequençage, clonage etc...).  [...] Enfin bref, si tu pars d'un simple brin, et que tu utilises deux amorces, il faut que tu prennes une première amorce complémentaire de ton simple brin, puis une deuxième amorce, (mais qui elle ne sera pas complémentaire de ton simple brin, cette deuxieme amorce sera complémentaire du brin néo synthétisé).  [...]

[Biologie Moléculaire] Technique d'hybridation

Tu as ton ARN, tu lui hybrides une amorce ADN (qui peut-être une sonde marquée visualisable sur Northern Blot) et à l'aide d'une ADN polymérase ARN dépendante, tu produis un ADN complémentaire de cet ARN. Donc oui tu peux appeler ça une réaction de transcription inverse je pense.  [...] On peut volontairement synthétiser un brin d'ADN à partir d'un ARN en particulier de l'ARNm eucaryotique de façon à avoir un brin d'ADNc (ADN complémentaire) que l'on peut introduire dans un vecteur en vue d'un clonage. Cet ADNc une fois traduit dans des cellules procaryotiques donne un ARNm sans introns qui peut être traduit sans trops de problèmes.  [...]

microbiologie - CARTE DE RESTRICTION

Voilà, je n'ai jamais suivi de cours de bio depuis le lycée, et mon prof me demande de faire une carte de restriction sans m'expliquer ce qu'était le phénomène. une digestion de restriction, un adn plasmidique circulaire, bref j'ai dû mal à me représenter de quoi il s'agit.  [...] Generalement les bacteries synthetise des enzymes de defence.ENZYMES DE RESTRICTION qui degrade tout ADN etranger.ces enzymes sont utilisé dans le clonage dans la coupure de l'adn plasmidique pour inséré un fragement d'adn.  [...]

[Biologie Moléculaire] RT-PCR quantitative (cDNA)

Une question toute bete... Si l'on souhaite realiser une PCR quantitative en temps reel apres avoir obtenu des ADNc a partir d'ARN... (par exemple pour faire de l'etude d'expression).  [...] Selon moi il n'est pas necessaire de passer par la synthese du brin complementaire des ADNc pour avoir un ADNc double brin...puisque la PCR quantitative va s'en charger (cela est different dans le cas d'un clonage ou l'on devra passer par une synthese d'ADNc double brin prealable).  [...]

[Biologie Moléculaire] Etude d'une protéine

Bonjour à tous. alors voila mon prof en amphi dicte un peu vite et j'ai marqué une phrase qui dit pour etudier une proteine isolée on lui faire developper des anticorps pour voir sa fonction qqun pourrait m'expliquer c'est dans le cas d'une analyse de proteine que l'on peut isoler.   [...] 2°/ Lors d'un clonage, on peut être amener à faire une copie ADN de l'ARNm (= ADN complémentaire ADNc) si l'on souhaite cloner ce dernier.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR et Clonage

s.v.p j'aimerai bien comprendre la différence entre la PCR et le clonage autrement dit est-ce-que lors d'une amplification de l'ADN le choix entre une PCR et le clonage se fait d'une manière aléatoire ou bien y'a des règles a suivre.  [...] La PCR permet d'amplifier une portion d'un génome d'ADN selon les amorces que tu choisis. Le clonage consiste à insérer un morceau de gène à l'intérieur d'un ADN.. (souvent dans celui d'E.coli via un plasmide, dit vecteur).  [...]

création de bactéries artificielles

en fait, je parle bien de créer une bactérie de toute pièces. D'apres ce que j'ai lu, il s'agirait de réaliser une synthèse du matériel génétique nécessaire à la survie de cette bactérie et aux fonctions métabolisques désirées (je ne sais pas comment ca marche, c'est ca que je voudrais savoir) puis de l'insérer dans une autre bactérie et de détruire le matériel génétique de la bactérie hote par irradiation.  [...] il ne reste plus qu'à transformer (electroporation, choc thermique) la moitié qui n'a pas reçu le matériel génétique parent avec un chromosome artificiel mais complet (facilement synthétisable grace aux méthodes de PCR et de clonage moléculaire...). Si cet hybride se porte bien, au bout d'un certain nombre de divisions il aura diluer les composants du parents (protéines, ARN, métabolites, lipides de la membrane) et sera donc complètement neuf et articiel.  [...]

[Génétique] Génie Génétique !!!

Pourquoi ne pas essayer d'expliquer le principe du clonage J'entend le clonage moléculaire (multiplication à l'identique des fragments d'ADN).  [...] Au début, je ne savais pas quel sujet choisir et il fallait un sujet sur la biologie alors j'ai posté sur le forum quel sujet choisir, et on m'a proposé la génie génétique et l'évolution de l'homme (j'hésite toujours entre ces deux là mais bon). Comme on m'a proposé le sujet, je ne sais pas grand chose de mon côté sur ce dont je dois m'intéréssé particulièrement.   [...]

[Biologie Moléculaire] Selection de bactéries par Antibiotiques lors du clonage d'ADN

Si c'est bien ça. tu as raison, en clonant ton gène dans le gène TetR, tu l'innactives donc, si tu mets les bactéries en présence de tétracycline, tu vas les tuer et tu n'auras pas ton clonage.  [...] Reste à repérer les clones en question sur la première boîte et à les amplifier, avant de vérifier qu'on a bien le gène d'intérêt dans le plasmide (par un coup de séquence par exemple...).   [...]