• Forum - Clonage, Résistance, Antibiotique

[Biochimie] Resistance à la zeocine pourquoi ?

j utilise la zeocin pour screener des bactéries transformées par un plasmide PICZ contenant le géne de resistance a cet antibiotique et donc pour controler le clonage.  [...] En procédant à l'extraction de l'ADN plasmidique pour controler la presence du plamside recombinant, je n'ai trouvé aucun plasmide et ça m'a intrigué comment est ce possible d'ou est ce qu'elles tiennent cette resistance ce sont pas des bactérie satellite a mon avis selon leur taille.  [...]

[Biotechnologie] Composants d'un vecteur d'expression eucaryote

Ensuite, on a évidemment notre gène d'intérêt, son promoteur eucaryote, le signal de terminaison de la traduction, les sites de restriction (MCS) et le gène de sélection (auxotrophie le plus souvent ou résistance à un antibiotique). J'en suis à 7 (ou 6 si on compte les ORI pour 1).  [...] J'aurai mis un gène de sélection (un gène de résistance aux antibiotique ou un gène du métabolisme pr la levure) et un gène rapporteur, un promoteur, MCS (un site de clonage multiple). Tu peux mettre le + 1 avec la flèche juste après le promoteur.  [...]

[Génétique] etude de survie

je recherche des sujets de génétique bactérienne comprenant un exercice sur l'étude d'une survie d'une population bactérienne en présence d'antibiotique.  [...] Je te suggère de te renseigné sur le transfère et le clonage des gènes de résistance aux antibiotique par le biais de plasmides modifiés.  [...]

pourquoi la vie est apparue une seule fois ?

les genes de rèsistance aux antibiotiques, existe avant meme que les genes de l'antibiotique, c'est à dire que, pas de terme adaptation, l'antibiotique lui mème n'induit pas la rèsistance des bacteries au antibiotique,  [...] ceux qui s'appuit sur la rèsistance des bacteries au antibiotique pour confirmer l'evolution tombe à l'eau,  [...]

Efficacité d'antibiotiques couplés

Oui, les bactéries se multiplient mais comme la résistance ne donne en général pas d'autre avantage sélectif que celui de résister au dit antibiotique et a plutôt un coût pour la bactérie, elle a tendance à disparaitre en l'absence de pression de sélection (le non usage d'un antibiotique).  [...] Mais comme je l'écrivais plus haut on se demande maintenant si dans certains cas les allèles de résistance ne procurent pas un avantage en l'absence d'antibiotique (pour certaines résistances et dans certains environnements).  [...]

[Biochimie] OGM, Amflora pomme de terre

Balancer un gène de résistance à un antibiotique dans la nature Hautement improbable que ça soit mis sur le marché. Ta souris reste dans un milieu controlé donc ce n'est pas grave. Assurer que le gène ne sera pas diffusé dans la nature et rende des bactéries résistantes est impossible ou presque.  [...] Il y a eu des débats publics, car Amflora contient un gène marqueur de résistance (nptII), qui est connu comme un gène de résistance à un antibiotique médical, la kanamycine. En vertu de la règlementation européenne, la commercialisation de plantes génétiquement modifiées ne peut être autorisée que si elles ne comportent pas de gènes de résistance à des antibiotiques ayant une importance médicale.  [...]

Antibiotiques Automatique ou pas automatique

Bonjour. En fait, il suffit que de quelques secondes d'activité antibiotique pour contribuer (sans nécessairement rendre automatiquement) à la potentielle résistance bactérienne subséquente, puisqu'il semble admis que cette dite résistance s'effectue en outre par sélection naturelle.  [...] C'est un peu plus complexe que cela. Car outre la résistance potentielle de certains gram+ au lysozyme et aux antibios synthetiques, il existe des voies biochimiques additionnelles dans la cascade immunitaire anti-bactérienne. Du coup, l'on se retrouve non seulement avec le terme antibiotique, mais également bactéricide.  [...]

[Génétique] vecteur de plasmide

pétrie, le milieu de culture et l'antibiotique (très souvent de l'ampiciline). On obtiendra donc des colonies à certains endroit ce qui signifie qu'il y a une résistance à l'antibiotique maintenant, ce qui correspond au plasmides recombinants. En revanche, quand il n'y a pas de croissance, cela signifie qu'il s'agit de plasmides non-recombinant.  [...] Quand tu insères ton ADN tu vas l'inséré au milieu du gène lacZ sous la dépendance de son promoteur. De ce fait en rajoutant du X-gal dans ton milieu (contenant un antibiotique correspondant au gène de résistance) au moment de l'ensemence tu obtiendra 2 types de colonies.  [...]

[Biologie Cellulaire] A quoi sert le co-transfert avec un vecteur de résistance à un antibiotique

En fait, on fait une co-transfection car ton plasmide ou se situe ton cDNA ne contient surement pas de gène de résistance. Dans ce cas là, si tu veux sélectionner par la suite uniquement les cellules qui ont intégré le plasmide, il te faut pouvoir les sélectionner.  [...] La meilleure méthode est quand même d'avoir un gène de résistance dans le plasmide où tu as ton gène d'intérêt, ça te permet de minimiser le nombre de clones faux-positifs (uniquement résistant et sans gène d'intérêt).  [...]

[Biologie Moléculaire] Recombinaison homologue plasmide

je pense que les gènes que tu étudies, ont été inactivés pas l'insertion du gène de résistance à l'antibiotique à la place. Ce gène de résistance devait porter en 5' et 3' des séquences du gène à inactiver. Ainsi la recombinaison homologue pouvait avoir lieu et l'insertion du gène aussi. du coup ton gène devint inactif.  [...] Pour inactiver un gène comme c'est décrit dans ton énoncé, on fait une inactivation par cassette portant un marqueur. en l'occurrence, le gène de résistance à la kana. Ce que tu fais est donc construire cette cassette d'une manière telle que le gène de résistance à la kana est entouré par des séquences (5' et 3' respectivement) identiques à celles des extrémités 5' et 3' du gène que tu souhaites inactiver.  [...]