• Forum - Choc, Thermique, Bactéries

[Génétique] Mutation par ajout d'adn: qu'est-ce qui se passe vraiment?

Salut. non il n'y a pas de mutations du gène, en fait la bactérie en présence de ces séquences d'ADN va être transformée. elle va absorber le gène try+ et l'intégrer à son génome pour pouvoir ainsi produire du tryptophane. Pour cela il est généralement nécessaire de créer un choc thermique.  [...] Certaines especes sont capables d'incorporer naturellement de l'ADN, meme en absence de choc thermique (d'ailleur le choc thermique ne marche que si les bactéries ont été préparées au préalable).  [...]

[Biotechnologie] La post-acidification du yaourt

- choc thermique (58°C - 5min) pour endormir les bactéries lactiques.  [...] - réduction de l'effet tampon de la poudre de lait (afin d'atteindre le pH d'inhibation des bactéries lactiques plus rapidement).  [...]

Probleme d'induction de GST dans bacterie

Le protocole est assez classique. transformation de bactéries avec 5ng de plasmide par choc thermique et sélection sur pétrie avec d'ampicilline.  [...] 5. Ca marche, c'est le plus important. Tu peux éventuellement utiliser d'autres souches d'expression pour améliorer les choses mais la différence sera probablement assez faible. Si tu vois une dégradation importante (de nombreuses bandes de masses plus faibles que ta protéine de fusion, tu peux forcer la dose sur les inhibiteurs de protéase lors de la lyse des bactéries.  [...]

[Microbiologie] Quelques questions en micro

re bonjour, j aimerai savoir deja si ma premiere reponse est correct svp. pour la deuxieme une colonie c est une groupe de micro organisme provenant d une cellule unique. bref c est un groupe de micro organisme. donc cela voudrait dire que chaque bacteries ne poussent pas de la meme facon si les colonies n ont pas la meme taille en gros, la grosseur d une colonie depend de la facon dont pousse les bacteries sur une gelose par exemple.  [...] 2e. Éviter un choc thermique aux bactéries et ainsi permettre une meilleure croissance (c'est particulierement vrai pour les bacteries plus fastidieuse.. mais plus ou moin nécessaire les les ubiquitaires qui pousse sur tout.. genre du staph ou du strep ou du e.coli).  [...]

Expériences en génétique…

Oui alors là je crois qu'il y a effectivement quelques confusions. Si tu veux transformer une bactos rendu compétente (par du Ca2+ et non pas par du Na+), tu as plusieurs possibilités dont le choc thermique (celle que j'utilise habituellement) qui consite en un passage d'environ 45 secondes à 42°C, ou également la lipofection, l'électroporation, etc.  [...] En biologie moléculaire, on utilise ces plasmides pour intégrer des morceaux d'ADN dans des bactéries rendues compétentes, c'est-à-dire perméables, l'ADN rentre tout seul dedans grâce à un choc électrique ou un choc thermique.  [...]

[Biochimie] Mutagénèse dirigée

D'apres ce que tu as décris, il me semble que tu essayes de transformer les bactéries avec seulement le produit de PCR et que tu ne mets pas le plasmide. Ce dernier, qui doit surement contenir un gène de résistance aux antibiotiques, ne peut donc pas empêcher les bactéries de mourir au contact du milieu LB+ampicilline.  [...] A ne pas négliger, le fait que tu es choisi d'autres bactéries que celle du kit. Sont-elles compétentes pour une transformation par choc thermique Est-ce les mêmes que celles utilisées pour les clonages qui ont fonctionné précédemment.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage TOPO dans JM-109

J'ai effectué la ligation dans le vecteur topo pCR®2.1 et la transformation dans des bacteries compétentes JM-109 (via choc thermique).  [...] le protocole c'est du grand classique ligation (vecteur+insert (purification)+solution de sel). 15 min à température ambiante. Puis transformation avec choc thermique (45 sec à 42°C).  [...]

transfo de levure

question sur la transfo de levures...Faut il placer les levures dans la glace après les avoir laisser qq minute à 42°c pour créer un choc thermique comme pour les bactéries chemically competent ou n'est ce pas la peine.  [...] Non ca n'est pas utile, tu centrifuges rapidement, puis tu retires le PEG/Liac, tu resuspend dans le milieu adequate et tu etales sur tes boites de selection.   [...]

isolation d'un plasmide

De plus, lorsqu'on veut transformer une bactérie, vaut il mieux donner un légr choc thermique et une source chimique pour faciliter l'incorporation du plasmide.  [...] Pour les transformations, les deux sont possibles et en pratique c'est selon les bactéries dont on dispose. Maintenant je crois que le plus courant est d'avoir des bactéries que l'on soumet à un choc thermique.  [...]

[Biochimie] bactérie anaérobie stricte et sporulée

Alors j'ai cherché sur Internet anaérobie stricte et j'ai trouvé que ça signifie que la bactérie ne peut vivre dans le dioxygène, c'est un gaz toxique pour elle. Mais pour sporulé je ne trouve que producteurs de spores... Ca m'étonne un peu.  [...] pour sporulé, c vrai la production des spores c a d ce type des bactéries produisent les spores et ce dernier est un forme de conservation lorsque les germes entrent dans un milieu défavorable pour sa croissances comme le choc thermique par exemple.  [...]