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[Immunologie] Lymphocytes B

Dans le myélome multiple, tu as une hyperprolifération de lymphocytes B dystrophiques(qui ont un aspect anormal) monoclonaux(issus du même clone cellulaire. En gros, ils se ressemblent tous) dans la moelle osseuse qui produisent tous le même anticorps(même chaîne lourde et même chaîne légère).  [...] Cet anticorps monoclonal qui présente un seul type de chaîne lourde et un seul type de chaîne légère sera fabriqué en très grande quantité par les plasmocytes myélomateux, ce qui empêchera la formation des autres anticorps(polyclonaux) par les plasmocytes normaux, il en résulte une immunodépression.  [...]

anticorps

Les lymphocytes sont produites au niveau des ganglions lymphatiques (si je me souviens bien, mes cours de bio commencent à dater...). Chaque lymphocyte possède un gène codant pour la chaine lourde de l'anticorps et un gène codant pour la chaine légère de l'anticorps.  [...] En fait comme l'explique mantos, il y a en fait des fragments de gènes qui vont se recombiner par excision des séquences d'ADN entre les fragments sélectionnés. Au niveau de la zone de ligature des fragments, il y a un mécanisme qui permet qu'elle ne soit pas réalisée excactement de la même façon, avec même un possible décalage du cadre de lecture (pour un chromosome, sacahnt qu'on a deux chaines et trois fragments à assembler ça fait relativement peu d'anticorps fonctionnels par décalage du cadre de lecture, en fait la cellule dispose d'une deuxième chance avec le chromosome homolgue si ça échoue), c'est l'explication de l'existence des régions hypervariables.  [...]

[Biologie Moléculaire] exprimer un anticorps entier dans des cellules eucaryotes

je travail actuellement sur la production de scFv, c'est une chaine polypeptidique qui contient les fragments variables de la chaine lourde et de la chaine légère d'un anticorps. je produit cette structure à l'aide d'un vecteur eucaryotes dans les cellules HEK293T.  [...] pour la suite de mon travail, je souhaite produire l'anticorps entier. j'ai donc besoin de 2 vecteurs. un avec les parties constantes de la chaines lourde auxquelles j'ajouterais la séquence de la parties variable de mon scFv, et le deuxièmes vecteur avec la même chose pour la chaine légère.  [...]

[Biochimie] Protéines SDS PAGE

est-ce que une bande sur gel SDS PAGE (pour séparer les protéines totales) correspond à une protéine ou peut être peptide ou peut être des protéines fragmentées.   [...] Ca dépend du type de gel utilisé. Dans le cas de gel dénaturant, on a des protéines fragmentées (ex. anticorps chaine lourde + chaine légère). Sinon on peut avoir une protéine complète.  [...]

nombre sites action anticorps

Pourquoi un anticorps n'a que 2 sites d'action avec l'élément étranger alors que si on regarde l'extrémité aminoterminale, il a 2 domaines ( qui proviennent des 2 chaines légères ) et 2 des chaines lourdes, ça fait 4 non.  [...] Un anticorps possède quatre domaines variables situés aux extrémités des deux bras. L'association entre un domaine variable porté par une chaîne lourde (VH) et le domaine variable adjacent porté par une chaîne légère (VL) constitue le site de reconnaissance (ou paratope) de l'antigène.  [...]

[Immunologie] Synthèse d'anticorps

Les genes fonctionnels des lymphocytes B s'expriment ce qui provoquent la production d'anticorps membranaires. Les protéines (différentes selon l'anticorps, donc selon les réarrangements) de la région variable de la chaine lourde d'un anticorps provoqueront la spécificité de l'anticorps.  [...] Cependant, comme les réarrangements sont différents, les séquences en acides aminés le sont aussi, donc les protéines ainsi codées sont différentes, ce qui est visible sur la partie variable de la chaine lourde et légère de l'anticorps, ces parties variables définissetn sa spécificité.  [...]

[Immunologie] Lympho B et exclusion allélique.

Durant le développement de la cellule B le réarrangement produisant la chaine lourde s'effectue avant le réarrangement produisant la chaine légére. Si la chaine lourde produite et pertinente, le réarrangement de la chaine légére s'enclenche alors et exclusivement sur le même alléle.  [...] Ok je suis tout a fait d'accord que le rearrangement sur les deux alleles pourraient aboutir a la formation de deux Ig de specificites differente se qui poserai pas mal de pb. Mais je ne vois pas pourquoi le rearrangement de la chaine legere doit obligatoirement s'effectuer sur le meme allele que celui de la chaine lourde.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pont de protocole

je vais bientot faire une overlappe PCR pour fusionner une séquence leader, une chaine légére d'anticorp et une chaine lourde. On a donc designé spécifiquement des primers que j'ai recu aujourd'hui. J'ai donc commencé par faire une PCR indépendante pour chacune des séquences.  [...] Vu que je sais que j'ai amplifié spécifiquement, n'était-il pas possible de centrifuger mes tubes contenant mes produits de PCR, pour avoir un culot correspondant aux séquences amplifiées, enlever le surnageant puis reprendre le culot dans quelques microlitres de tampon et enfin prendre quelques microlitres de chaque produits de PCR et les mélanger ensemble pour faire mon Ovelappe PCR.   [...]

[Immunologie] Réarrangement des chaînes lourdes et légères

De l'ADN était isolé de trois sources. des cellules hépatiques, des cellules de lymphome pré-B et des cellules de myélome sécrétrices d'anticorps. Chaque échantillon d'ADN était digéré séparément avec les enzymes de restriction BamHI et EcoRI qui clivent l'ADN des chaînes lourdes et des chaînes légères º de la lignée germinale comme il est indiqué dans la partie (a) de la figure d'accompagnement. Les échantillons digérés étaient.  [...] D'après mes premières observations je dirai que les cellules pré-B correspondent à la piste A puisque que ce sont les seules à avoir un réarrangement au niveau des chaînes légères, correspondant pour moi au deux bandes présentes sur le second southern blot.  [...]

clathrine

Les rôles de la chaîne légère de clathrine sont multiples. Elle est une protéine de structure en tant que sous-unité de la clathrine qui, agencée en trimère et regroupée en grillage protéique, constitue l'armature externe des vésicules clathrine-dépendantes (Lodish et al.  [...] Dans les cellules hépatiques, la chaîne légère de clathrine se lie avec une enzyme cytosolique particulière appelée chaperon protéique hsc70, qui dépolymérise les cages de clathrine en ses unités de triskélions, une réaction ATPasique. Il a été montré que les chaînes légères de clathrine purifiées stimulent l'hydrolyse de l'ATP par hsc70 (Kirchhausen, 2000).  [...]