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[Biologie Cellulaire] Immunofluoresence

Mais si tu veux mon avis ils veulent savoir si ton virus AAV est endocyté via les puits de clathrine des cellules HEK. Donc ils incubent les cellules avec le virus couplés au fluorophre Alexa 488 laissent incubé quelque temps, ensuite ils perméabilisent les cellules pour faire entrer les anticorps couplés a un autre fluorophore (rouge celui la) et dirigé contre la clathrine.  [...] Et si les cellules sont en train d'endocyter le AAV via les puits de clathrine, ils devraient y avoir une colocalisation du marquage vert (AAV) et rouge (clathrine) au niveau sous membranaire voire membranaire.  [...]

[Biologie Cellulaire] les glandes

dilatation des vaisseaux sanguins, accélération du coeur, production de glucose par le foie, dilatation de la pupille, plus grande réactivité musculaire... On classe les hormones selon deux types. celles qui se fixent aux membranes cellulaires (insuline) et celles qui se fixent sur l'ADN dans les cellules (corticoïdes).  [...] ..) une ou plusieurs substances qui ont toutes en communs d'être des molécules - des atomes liés de façon covalente - ou des couples d'ions (ex. l'acide chlorhydrique de notre estomac), mais pas des cellules.  [...]

[Biologie Moléculaire] Quelle stratégie adopter?

Pour se faire j'ai construis deux vecteurs, le  [...] contient un promoteur fort puis la PG1 et la GFP et le deuxième contient un promoteur fort puis la SIRT1 puis la luciférase je réalise un BRET en excitant la luciférase avec coelenterazine j'ai donc fluorescence de la GFP j'ai donc bien montré l'interaction or le professeur me demande de faire un test de localisation puis un test de fonction de la proteine endogène pour cela est ce que je dois prendre des cellules hépatiques non transfectées comme temoin pour la localisation il me semble qu'il serait judicieux de faire une immunohistochimie mais est ce que je detecte les 2 proteines dans la meme cellule et ceci avec 2 anticorps différents couplés avec une fluorescence différenteet pour la fonction je ne sais pas dutout d'autant plus qu'il faut savoir si la proteine chimerique modifie les fonctions endogènes de la proteine pour ca je netrouve pas de strategies.  [...] est ce que je dois prendre des cellules hépatiques non transfectées comme temoin pour la localisation il me semble qu'il serait judicieux de faire une immunohistochimie mais est ce que je detecte les 2 proteines dans la meme cellule et ceci avec 2 anticorps différents couplés avec une fluorescence différente.  [...]

l'ion le plus abondant dans l'organisme

Je me demande si c'est l'acidité (au sens de pH global. 7 dans l'eau, d'ailleurs est-ce en rapport avec les conditions normales (P atm, 25°C et pH (hydrogène) acide des couples redox) qui domine la plupart () des organismes de la biosphère Même les virus (ARN, ADN).  [...] Ben oui, j'en suis resté là et si je dis pas n'importe quoi () K + est plus indispensable que Na + (d'un point de vue réactionnelle), vu qu'il y en a dans toutes les cellules donc les organes, [SIZE=1].  [...]

essai vaccin contre le sida

hier aux infos ils ont parlé de la mise en place d'un vaccin contre le virus du sida, dit de phase II il me semble... Je serai très curieuse de savoir de quoi il est composé, si quelqu'un peut m'en dire plus.  [...] Pour résumer, c'est bien un essai de vaccin ou ils utilisent une combinaison de 5 peptides de HIV couples a des lipides pour declencher une réponse immunitaire contre le virus. La phase II consiste à tester l'efficacité de cette réponse (sur une centaine de personne) et d'en déterminer les meilleures conditions.  [...]

biotopes artificiels pour notre production de bactéries multirésistantes ?

Les poliovirus synthétiques induit le même phénotype neurovirulente que le poliovirus sauvage. Le [var phi] X174 de génome du bactériophage (5386 pb) a également été synthétisé et utilisé pour infecter des cellules de E. coli (Smith et al, 2003). Dans d'autres travaux, le génome du bactériophage T7 a été remaniée pour rendre le virus plus simple à modéliser et plus propice à la manipulation (Chan et al, 2005).  [...] Enfin, j'ai conçu synthétique dans des capteurs in vivo des gènes de résistance aux antibiotiques qui peuvent être couplés avec des composants effecteurs pour tuer les cellules portant des gènes de résistance ou de bloquer la transmission horizontale de ces gènes.  [...]

[Biologie Cellulaire] antiport Na/Ca

Bonjour. Je voudrais savoir si les transports antiports, et plus particulierement l'antiport calcium sodium dans les boutons terminaux des neurones est un mécanisme utilisant de l'ATP.   [...] Ben en quelque sorte oui mais de façon indirecte, car l'antiport Na+/Ca2+ couple l'expulsion de Ca2+ à l'entrée de Na+(les cotransports couplés à l'entrée du Na+ dans la cellule sont les mécanismes les plus fréquents d'assimilations des métabolites extracellulaires par les cellules animales).  [...]

[Immunologie] Déficience en béta-2-microglobuline

Dans les années 1990, l'inactivation génique de plusieurs gènes intéressants des molécules du système immunitaire a été réalisée, notamment les molécules impliquées dans la reconnaissance du SOI et du NON-SOI. En particulier, différentes équipes ont produits des souris déficientes pour la ²2-microglobuline, le CD4 et l'une des chaines constituant la molécule de CD8.   [...] L'analyse par cytométrie en flux des cellules lymphoïdes présentes dans les ganglions et le thymus a été réalisée au moyen de plusieurs anticorps couplés à des fluorochromes de différentes natures afin de permettre une étude de co-marquage (anti-CD3-FITC, anti-CD20-FITC, anti-CD4-FITC, anti-CD8-PE).  [...]

[Biologie Moléculaire] Etapes de mise au point qPCR - gène peu exprimé

Je n'ai jamais eu de réelle formation qPCR, et j'aimerais qu'on partage nos expériences. Je vais vous raconter les étapes de mise au point de ma qPCR sur un gène peu exprimé dans les cellules de peau, et j'aimerais bien vos commentaires, ce que vous auriez fait de plus ou de moins, ou différemment.  [...] J'ai passé en qPCR tous mes couples d'amorces parallèlement à mes 2 gènes housekeeping préférés, sur des ADNc de cellules qui surexpriment mon gène en faisant des gamme de dilution de mes ADNc de 10-1 à 10-5. Grosse déception, seuls 2 couples sur les 6 designés ont eu une courbe de fusion acceptable, et une efficacité correcte.  [...]

fistfuck et sida?

Une des questions importantes actuellement, et pour l'avenir, concerne les enjeux des nouveaux traitements, et notamment leur efficacité pour éliminer non seulement, la réplication virale, mais aussi les cellules infectées. L'exemple du lopinavir montre une très mauvaise diffusion dans le liquide séminal.  [...] Depuis quelques années, dans le contexte de l'assistance médicale à la procréation (AMP) pour les couples sérodifférents dont l'homme est séropositif, la présence du virus dans le sperme est explorée de façon à préparer des suspensions spermatozoïques exemptes de virus et être sûr qu'il n'y a pas de particules virales qui collent aux spermatozoïdes.  [...]