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[Biologie Cellulaire] Congélation sans sérum

Quelqu'un aurait il un protocole pour congeler des cellules sans présence de sérum de veau foetal.  [...] L'ajout de sucrose (jusqu'à 25%) peut également aider à la survie après décongélation (permet de faire migrer plus rapidement le DMSO dans la cellule).  [...]

[Biologie Cellulaire] Effets de la congélation

Le premier avec uniquement le milieu de culture ordinaire (Sérum de Veau Foetal SVF) donnait à la fin 100% de cellules mortes.  [...] La surgélation est une technique industrielle qui consiste à refroidir brutalement (quelques minutes à une heure) des aliments en les exposant intensément à des températures allant de -35 °C à -196 °C. Grâce à ce procédé, l'eau contenue dans les cellules se cristallise finement limitant ainsi la destruction cellulaire dixit wikipedia mais ils ont du la prendre d'ailleurs et elle correspond à la réalité.  [...]

[Biologie Cellulaire] Aide pour culture en boite de Pétri de cellules type cellules d'oignons.

Des cellules en forme de synapse serait dur à distinguer l'une de l'autre si elles se collent. Ensuite, j'aimerai pouvoir voir les cellules lors de leur mitose, car mon projet se penche particulierement sur cet aspect. Enfin, je cherche des cellules pas trop complexe, car il m'est necessaire de connaitre des protéines vitales à son fonctionnement et leur chaine pepitidique (je prends mes sources sur NCBI.org, peux tu me conseiller un autre site ).  [...] Les cellules HEK-293 sont cultivées dans du milieu DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) contenant du Glutamax, supplémenté avec 10% de sérum de veau fStal, 2mM de L-Glutamine, 100UI/ml de pénicilline, 100µg/ml de streptomycine et 0,25µg/ml d'amphotéricine B à 37° dans une atmosphère à 5% de CO2.  [...]

[Biologie Cellulaire] Congélation de cellules adhérentes

j'ais fait un TP où j'ais congelé des cellules (adhérentes mais ici ce n'est pas important je pense). Dans le milieu de congélation j'ais plusieur concentration de DMSO et une concentration fixe de FCS (50%) (sérum de veau foetal) afin de determiner le milieu de congélation adéquat après décongélation.  [...] Mon problème c'est que je ne comprends pas l'utilisation de FCS (je suis déjà dans un milieu complet contenant 10% de FCS.) apparament le FCS à un rôle particulier dans la congélation qui m'échappe.   [...]

Vaccin hépatite B - Page 4

Les étapes de fabrication ont été choisies pour leur efficacité dans l'élimination des impuretés apportées par le substrat cellulaire utisé comme les protéines, l'ADN cellulaire, les rétrovirus pouvant être présents dans la cellule CHO ainsi que celles apportées par le milieu de culture (sérum de veau).  [...] Mais......on s'en fout du SVF (Sérum de veau foetal), c'est un constituant classique des milieux de culture cellulaire parce que la cellule y trouve tout ce dont elle a besoin (facteurs de croissance, etc...).  [...]

[Biologie Cellulaire] Milieu de culture

Bonjour à tous, quelle est la composition des milieux de culture et pourquoi diffèrent-ils d'un type cellulaire à l'autre et a quoi sert le sérum que l'on ajoute que contient-il et pourquoi n'est il pas présent dans le milieu d'origine.  [...] Le sérum que l'on ajoute est le plus souvent du sérum de veau foetal. Il contient notamment de nombreuses protéines (comme de l'albumine fibronectine (adhesion) insuline (glucose)) pour le maintient des cellues + facteurs croissance, anticorps et je sais plus trop quoi ^^.  [...]

milieu RPMI 1640

Il s'agit d'un milieu que l'on a utilisé pour la culture cellulaire qui est le milieu RPMI 1640 et qui ne contient ni glutamine, ni pénicciline, ni sérum de veau foetal. J'aurais aimé savoir à quoi servait réellement ce milieu et quel en était la signification exact.  [...] En gros le milieu contient des vitamines et des acides amines nécessaires pour la survie et la réplication des cellules ainsi qu'un tampon permettant d'éviter des variations de pH trop importantes du a l'accumulation de déchets dans le milieu.  [...]

Immunomarquage de la rétine du macaque

Les sérums d'autres espèces sont utilisé pour bloquer les sites non spécifiques. Le SVF (Sérum de Veau FStale) est le plus commun. Il est également possible d'utiliser le sérum d'autre espèce dont on utilise l'anticorps.  [...] On rince de nouveau, puis on (peut, c'est pas toujours réalisé, cela dépend des expériences) saturer les sites de réaction de l'anticorps de chèvre avec un sérum de chèvre.  [...]

[Biochimie] Conservation des milieux de culture cellulaire

D'une manière générale on dit que le milieu complet (serum + antibio) se conserve trois semaines au frigo. 4 ou 5 semaines devraient peut être encore aller.  [...] Les milieux de culture les plus utilisés (DMEM et RPMI) sont colorés au rouge de phénol qui est jaune à pH acide (provoqué par le métabolisme des cellules en culture) ou violet (provoqué par la dégradation de la glutamine au cours du temps, ce qui génère de l'ammoniaque qui est basique).  [...]

[Microbiologie] leishmanies test MTT

J'ai eu quelques difficultés avec le test MTT que je trouve peu sensible, en tout cas avec ma culture cellulaire. Il faut t'assurer que la quantité de cellules présentes dans ton milieu suffit à engendrer une variation de DO. Ce qui, apparemment, n'est pas le cas.  [...] Essaye avec une population plus importante. Sinon, plus cher, mais plus sensible et sur le même principe, le test MTS, qui présente en plus, l'avantage de ne pas tuer les cellules.  [...]