• Forum - Cellules, Pression, Sélection

[Biologie Cellulaire] Comportement étrange HEK293 EBNA transfectées

La décongélation se passe bien, les cellules arrivent à adhérer, elles se développent bien sans pression de sélection, mais lorsque je rajoute celle-ci quelque chose d'étrange se passe.  [...] J'ai remarqué que cela intervenait après l'ajout de la pression de sélection. Donc la puromycine peut être en cause ou alors les cellules elles même, je me demande si elles n'ont pas subi un trop grand nombre de passages surement + de 60 des cellules non transfectées.  [...]

[Evolution] [genetique] Transmission de caractères acquis

En ce qui concerne les cellules dites somatiques c'est-à-dire celles qui ne contribuent pas à former les générations suivantes, il existe une certaine forme de sélection naturelle dans des cas pas très réjouissants. l'évolution des cancers.  [...] Il s'effectue en fait une sorte de sélection des cellules cancéreuses sous la pression de sélection du système immunitaire qui essaye de contrôler et d'éliminer ces cellules.  [...]

Facteur de croissance des cellules endothelialesVEGF

Mais bien sur, a l'etat normal tout est bien regule, et les vaisseaux sanguins ne se developpent arnachiquement. En cas de tumeur, imagine un amas de cellules tumorales pas tres gentilles, qui ne pensent qu'a leur survie et a leur expansion. Elles ont besoin d'un acces direct au systeme sanguin, pour se nourrir et se propager.  [...] Par pression de sélection au bout de quelques générations on aura une population de cellules sécrétrices de VEGF assurant la croissance des autres.  [...]

[Evolution] L'homme est-il sorti de la théorie de l'évolution de Darwin? - Page 6

La reformulation de la théorie par Hamilton (assisté de George Price ) au début des années 1970 allait donner la base théorique d'une lente réhabilitation de la sélection de groupe. Il est maintenant admis que la pression de sélection se réalise à tous les niveaux d'organisation du vivant, des cellules de l'organisme pluricellulaire (darwinisme cellulaire) aux écosystèmes, en passant par les individus et les groupes.  [...] Les conflit inter-groupe, la compétition, la sélection entre groupes génèrent des pressions de sélection des comportements altruistes...Voilà le paradoxe. Ecce Homo. Et c'est cela que Price n'a pas pu supporter.  [...]

[Biologie Cellulaire] Plasmide eucaryote/bactérien dans une lignée cellulaire

Sur beaucoup de plasmide si tu ne maintient pas de pression de sélection le plasmide est perdu très rapidement et au final tu vas regarder des cellules sans plasmide.  [...] Pas besoin de sélectionner si c'est du transitoire, en revanche il faut s'assurer que les meilleures conditions ont été choisies pour voir une expression, tu transfectes les cellules auquel cas, il faut tester plusieurs conditions de transfections, différentes quantités de vecteurs avec différentes quantités en excès de lipofectamine ou autre transfectant, car tu es peut-être dans des conditions ou tu ne transfectes pas beaucoup, puis tester l'expression à 24h et 48h post-transfection comme l'a proposé Yoyo.  [...]

[Biologie Moléculaire] siRNA, shRNA ??

Juste une dernière précision. lorsque le shRNA est codé dans un plasmide, il n'a pas besoin d'être intégré dans le gênôme de la cellule hôte pôur être stable... Une simple pression de sélection par un antibiotique (par exemple) permet une transfection stable.  [...] Oui je rejoins LXR sur ce point, en dehors du cas bien particulier des vecteurs épisomaux, la pression de sélection va permettre de selectionner les cellules qui ont intégré le plasmide, sinon celui-ci est perdu au fur et à mesure des divisions cellulaires.  [...]

pourquoi garder hétérochromatine dans l'évolution ?

Enfin comme le dit tubuline l'hétérochromatine d'un type cellulaire n'est pas la meme dans tous les types cellulaires. en d'autres termes les zones réprimées dans une cellules ne le sont pas forcemment dans une autre, et peuvent avoir un role fondamental (induisant une pression de contre selection des recombinants telle, qu'il y a conservation systématique).  [...] Il existe aussi au moins une espèce d'anoure sans poumon (répression génétique ). Donc on peut quand même supputer qu'un minuscule avantage, s'il est exploité et surtout sélectionné positivement, peut potentiellement conduire à l'acquisition d'une fonction ou même d'un organe.  [...]

[Génétique] Conséquence de l'intégration d'un vecteur dans une bactérie

C'est d'ailleurs un fait tellement connu qu'on se sert (presque ) systématiquement d'une résistance à un antibiotique donné comme marqueur et sélection des bactéries transformées.  [...] Cela ne l'est pas dans une population de milliards de milliards de cellules se reproduisant vite, une petite différence au départ peut conférer finalement un avantage non négligeable. Sans parler des questions de plasmide multi-copies. C'est un principe général, on enlève la pression de sélection, le gène de résistance subit la dérive, voire même est contre-sélectionner si son maintien/ expression a un coup.  [...]

[Génétique] Production d'interleukine 2

Pour produire la protéine à partir de là, il faut que tu réalises une transfection en cellule eucaryote (HEK293 par exemple) en utilisant un agent de transfection (lipofectamine...). Tu appliques également une pression de sélection par un antibiotique. Là il va falloir attendre un peu et comparer la mortalité de tes cellules avec des HEK non transfectées également sous antibiotique.  [...] L'Il2 étant sécréter, cela va te simplifier la vie... Après ta sélection, tu peux prendre ton surnageant de culture, le concentré un peu (centricon) et réaliser une analyse par électrophorèse SDS PAGE ou encore mieux en western blot afin de valider que tes cellules produisent ta protéine.  [...]

[Evolution] Apparition du sonar

C'est aussi l'impression que je m'étais faite, en tout cas, l'hypothèse la plus plausible pour moi... l'idée de l'organe inutile me paraît en effet évolutivement peu défendable.  [...] Par servir à rien, réellement provocateur dans un contexte évolutionniste, j'entendais servir peu (encore une hypothèse car la détection des ultra-sons peut apporter un avantage évolutif même si l'espèce est incapable d'en émettre, pourquoi pas). Quand on voit que des cellules ayant un transgène intégré de façon stable arrivent à le faire sauter s'il leur sert à rien (plus de pression de sélection), la vie est clairement contre la dépense énergétique inutile.  [...]