• Forum - Cellules, Pression, Sélection

[Biologie Cellulaire] Comportement étrange HEK293 EBNA transfectées

La décongélation se passe bien, les cellules arrivent à adhérer, elles se développent bien sans pression de sélection, mais lorsque je rajoute celle-ci quelque chose d'étrange se passe.  [...] J'ai remarqué que cela intervenait après l'ajout de la pression de sélection. Donc la puromycine peut être en cause ou alors les cellules elles même, je me demande si elles n'ont pas subi un trop grand nombre de passages surement + de 60 des cellules non transfectées.  [...]

[Evolution] [genetique] Transmission de caractères acquis

En ce qui concerne les cellules dites somatiques c'est-à-dire celles qui ne contribuent pas à former les générations suivantes, il existe une certaine forme de sélection naturelle dans des cas pas très réjouissants. l'évolution des cancers.  [...] Il s'effectue en fait une sorte de sélection des cellules cancéreuses sous la pression de sélection du système immunitaire qui essaye de contrôler et d'éliminer ces cellules.  [...]

[Biologie Moléculaire] siRNA, shRNA ??

Bien sûr mais la pression de sélection ne permet que de sélectionner les plasmides intégrés et les plasmides épisomaux répliqués. Dans ce dernier cas, il leur faut une origine de réplication exploitable par la cellule transfectée, comme par exemple un plasmide contenant l'origine de SV40 avec les cellules COS-7 qui possèdent l'antigène T nécessaire pour répliquer les plasmides contenant cette origine.  [...] Oui je rejoins LXR sur ce point, en dehors du cas bien particulier des vecteurs épisomaux, la pression de sélection va permettre de selectionner les cellules qui ont intégré le plasmide, sinon celui-ci est perdu au fur et à mesure des divisions cellulaires.  [...]

Facteur de croissance des cellules endothelialesVEGF

En fait dans une tumeur, les mécanismes de sélection naturelles sont à l'oeuvre, les moins adaptées meurent. Ainsi au fil des divisions anarchiques des cellules de la tumeur et des mutations qu'elle accumule et ce d'autant plus facilement que les systèmes gardiens sont inopérants, certaines cellules se mettront à sécréter de nombreux facteurs de croissance, parmi eux le VEGF, qui va permettre une néo-angiogénèse et assurer la nutrition de la tumeur.  [...] Par pression de sélection au bout de quelques générations on aura une population de cellules sécrétrices de VEGF assurant la croissance des autres.  [...]

[Evolution] L'homme est-il sorti de la théorie de l'évolution de Darwin? - Page 6

La reformulation de la théorie par Hamilton (assisté de George Price ) au début des années 1970 allait donner la base théorique d'une lente réhabilitation de la sélection de groupe. Il est maintenant admis que la pression de sélection se réalise à tous les niveaux d'organisation du vivant, des cellules de l'organisme pluricellulaire (darwinisme cellulaire) aux écosystèmes, en passant par les individus et les groupes.  [...] Les conflit inter-groupe, la compétition, la sélection entre groupes génèrent des pressions de sélection des comportements altruistes...Voilà le paradoxe. Ecce Homo. Et c'est cela que Price n'a pas pu supporter.  [...]

[Biologie Cellulaire] Plasmide eucaryote/bactérien dans une lignée cellulaire

Sur beaucoup de plasmide si tu ne maintient pas de pression de sélection le plasmide est perdu très rapidement et au final tu vas regarder des cellules sans plasmide.  [...] Pas besoin de sélectionner si c'est du transitoire, en revanche il faut s'assurer que les meilleures conditions ont été choisies pour voir une expression, tu transfectes les cellules auquel cas, il faut tester plusieurs conditions de transfections, différentes quantités de vecteurs avec différentes quantités en excès de lipofectamine ou autre transfectant, car tu es peut-être dans des conditions ou tu ne transfectes pas beaucoup, puis tester l'expression à 24h et 48h post-transfection comme l'a proposé Yoyo.  [...]

pourquoi garder hétérochromatine dans l'évolution ?

Enfin comme le dit tubuline l'hétérochromatine d'un type cellulaire n'est pas la meme dans tous les types cellulaires. en d'autres termes les zones réprimées dans une cellules ne le sont pas forcemment dans une autre, et peuvent avoir un role fondamental (induisant une pression de contre selection des recombinants telle, qu'il y a conservation systématique).  [...] Il existe aussi au moins une espèce d'anoure sans poumon (répression génétique ). Donc on peut quand même supputer qu'un minuscule avantage, s'il est exploité et surtout sélectionné positivement, peut potentiellement conduire à l'acquisition d'une fonction ou même d'un organe.  [...]

[Evolution] Utilité des virus ?

Ils n'ont donc aucun intérêt pour aucun être vivant, sauf exception qui me serait méconnue. De plus, il n'y a aucun but dans ce que la nature crée, les nouveaux organismes apparaissent d'ancêtres qui ont divergé vers une nouvelle espèce par dérive génétique et/ou sélection naturelle.  [...] Par exemple le gènes qui permet au cellules de fusionner et de donner le placenta et d'origine virale... l'infection d'un hôtes par un virus à permis l'émergence des mammifères. 2) la luttes incessante entre le virus et son hôtes permet une pression de sélection qui sélectionne activement certaine invention.  [...]

[Génétique] Conséquence de l'intégration d'un vecteur dans une bactérie

C'est d'ailleurs un fait tellement connu qu'on se sert (presque ) systématiquement d'une résistance à un antibiotique donné comme marqueur et sélection des bactéries transformées.  [...] Cela ne l'est pas dans une population de milliards de milliards de cellules se reproduisant vite, une petite différence au départ peut conférer finalement un avantage non négligeable. Sans parler des questions de plasmide multi-copies. C'est un principe général, on enlève la pression de sélection, le gène de résistance subit la dérive, voire même est contre-sélectionner si son maintien/ expression a un coup.  [...]

[Génétique] Production d'interleukine 2

Pour produire la protéine à partir de là, il faut que tu réalises une transfection en cellule eucaryote (HEK293 par exemple) en utilisant un agent de transfection (lipofectamine...). Tu appliques également une pression de sélection par un antibiotique. Là il va falloir attendre un peu et comparer la mortalité de tes cellules avec des HEK non transfectées également sous antibiotique.  [...] L'Il2 étant sécréter, cela va te simplifier la vie... Après ta sélection, tu peux prendre ton surnageant de culture, le concentré un peu (centricon) et réaliser une analyse par électrophorèse SDS PAGE ou encore mieux en western blot afin de valider que tes cellules produisent ta protéine.  [...]