• Forum - Cellules, Passages

[Biologie Cellulaire] Compter les passages

je travaille actuellement sur des cellules HEK. J'aimerai savoir comment sont comptabilisés les passages Logiquement, on devrait repartir de P0 lorsque l'on décongèle un lot mais je ne suis pas sur que cela marche comme cela - j'ai lu un travail (Luo et coll, 2005) qui parle de l'extinction de certaines protéines avec le nombre de passage.  [...] Si tu as des anticorps dirigés contre ta protéine, tu peux faire une IF pour regarder le % de cellules exprimant ta protéine au cours des passages. Cela te permettra aussi de voir la localisation de ton récepteur qui peut éventuellement varier.  [...]

[Biologie Cellulaire] Nombre de passages

Non, pourquoi cette idée qu'on doitaller jusqu'à 100 passages Au contraire, comme le disait Vince, au bout d'un certain nombre de passages, certaines propriétés des cellules sont suceptibles de changer, sans compter le fait qu' au fur et à mesure, des cellules meurent et qu'on réalise une sorte de clonage ou seules les cellules les plus résistantes persistent.  [...] .. Bref, ce n'esyt pas très bon e mulptiplier le nombre de passages. En attendant, j'attends toujours vos réponses sur le cas des cellules non adhérentes... merci d'avance.  [...]

[Biologie Cellulaire] Comportement étrange HEK293 EBNA transfectées

J'ai remarqué que cela intervenait après l'ajout de la pression de sélection. Donc la puromycine peut être en cause ou alors les cellules elles même, je me demande si elles n'ont pas subi un trop grand nombre de passages surement + de 60 des cellules non transfectées.  [...] Il est clair que le nombre de passages est énorme, à environ 40 passages je les jette... Sinon une chose simple, avez vous changé le modèle de vos boites de culture, sachant que les HEK ne sont pas des cellules qui adhèrent fortement au plastique je pense que ce paramètre peut avoir son importance.  [...]

[Biochimie] contamination culture importante

Un conseil. lorsque tu décongèle une ampoule, lors des passages qui suivent tu amplifies le nombre de cellule (tu les repiques toutes, tu n'en jette pas une seule). Quand tu en as suffisamment (10-20 millions) tu te refais un stock de cellules en les congelant.  [...] Ainsi si un problème survient ou que le nombre de passages de tes cellules atteint un nombre élevé (au-dessus de 40 pour les Cos je pense), tu pourras repartir sans débourser 400¬ à chaque fois.  [...]

[Biologie Cellulaire] Culture de myocytes ?

désolée je n'y connais rien en myocytes mais si tu envisages de cultiver des cellules de patients, sache que ca ne tient pas très lontemps en culture.. Peut etre peux tu envisager de travailler avec des lignées humaines, ca serait plus facile. Je n'ai pas lu l'article mais tu pourrais éteindre mdr1 (si ou sh RNA) rt voir si ca affecte ton niveau de distrophine.  [...] J'ai fait de la culture de cellules musculaires lisses humaines alors je ne sais pas quelles sont les cellules qui t'intéressent( cardiomyocytes, SMC) mais les SMC ne supportent que 6 passages en culture. J'espère que cela t'aide.  [...]

[Biochimie] presse de french

Oui c'est tres efficace en un seul passage. Maintenant ca dépend aussi beaucoup du type de cellules que tu veux casser et des applications apres les cassages.  [...] Tu peux faire plusieurs passages, si un seul ne suffit pas à casser tes cellules. Tu peux aussi y appliquer une pression plus forte.  [...]

conseil culture cellulaire

tout depend du type de cellules... je dirais laisse leur quelques jours puis fais un passage (ca permet de selectionner les cellules parfois).  [...] En général, je les décongèle une semaine avant usage, et je fais deux passages (selon le type de cellules) pendant cette semaine.  [...]

[Biologie Cellulaire] "Lignée Cellulaire" c'est quoi ?

C'est une culture de cellules qui s'est développée à partir d'une unique cellule. En théorie, toutes les cellules d'une même lignée partagent le même patrimoine génétique. En pratique, certaines dérives peuvent être observées au fur et à mesure des passages successifs, mais disons que le phénotype reste globalement inchangé.  [...] La définition de TanguyE est exacte, mais il faut préciser que l'on parle de lignée pour définir des cellules immortelles, qui sont donc capables de proliférer indéfiniment. C'est le cas des cellules cancéreuses, c'est pour cette raison que les laboratoires de biologie cellulaire utilisent des lignées comme modèles pour travailler, puisqu'elles sont immortelles, plus simples à cultiver que des cellules saines.  [...]

[Biologie Moléculaire] culture cellulaire

Tout dépend de sa couleur. Si ton milieu devient jaune c'est qu'il s'acidifie car augmentation du nombre de cellules. En général je ne change jamais mon milieu entre deux passages.  [...] Cela dépend de la vitesse de prolifération de tes cellules. certaines poussent très lentement et d'autres très rapidement. Les HeLa poussent rapidement donc il faut les passer assez souvent. Pour les HEK c'est un tout petit peu plus lent.  [...]

[Biologie Cellulaire] sénescence culture primaire

je cultives des cellules primaire des fibroblastes cutanés issus de patients et je me demandais jusqu'à combien de passages elle continuerons à pousser parceque là j'en suis au passage 9 et je trouves que mes cellules poussent de moins en moins bien avec plein de débris cellulaire. sa y j'y suis à la phase de sénescence.  [...] Pour une culture primaire, arriver à P9 c'est déjà beaucoup. Il est fort probable en effet que tes cellules soient épuisées.  [...]