• Forum - Cellules, Concentration, Suspension

[Biologie Cellulaire] Questions pour un TP...

1°) On me demande de trouver la concentration en µg/cm² à partir de celle en µg/mL pour une solution de fibronectine. Je pensais utiliser le nombre de site ancrage sur du verre des protéines 10^14 sites, la MM (220-250kDa), mais je ne sais pas s'il s'agit de la bonne méthode.  [...] 2°) On me demande la densité cellulaire d'ensemencement. je crois que c'est le nombre de cellules par cm² en ayant juste la concentration en cellules de la suspension. 10^5 cellules /mL. Je ne vois pas quoi utiliser comme formule pour résoudre ce problème.  [...]

[Biochimie] Chromatographie d'acides aminés

2°) mettre un nombre conséquent de colonies en suspension dans une solution H2O, NaCl super-hyper-concentrée (les cellules exsuderont).  [...] 3°) (centrifuger puis) analyser le surnageant par chromatographie - attention à la concentration en NaCl. si ça dissout les protéines et les acides aminés, est-ce que ça ne gêne pas les réactions avec le révélateur choisi Dans ce cas une dilution ne serait pas mal.  [...]

[Biotechnologie] prolifération de cellules en suspension

Comment fait on pour faire proliférer des cellules en suspension dans un milieu liquide alors que la prolifération necessite que la cellule soit ancrée.  [...] ok merci beaucoup... Donc toutes les cellules n'ont pas forcement besoin d'être ancrées, et pour celles qui en ont besoin on ajoute des produits dans la suspension merci.  [...]

[Biologie Cellulaire] adaptation protocole confocal à cytométrie en flux

Mon problème est que dans tous ce que j'ai pu lire, pour la cytoflux l'incubation avec les Ac semble se faire sur cellules en suspension et pendant quelques minutes (30 minutes) seulement.  [...] Du coup, je me demandais si c'était lié au fait que les cellules étaient plus facilement marquées en suspension ou si il valait mieux que je maintienne mon incubation overnight.  [...]

[Biologie Cellulaire] gros besoin d'aide: toutes mes cellules C2C12 sont mortes!

- Ensuite, j'ai décongelé mon ampoule que j'ai reprise dans 10 ml de milieu, et c'est sur cette suspension que j'ai fait mon test de viabilité. Donc avant même d'ensemencer mes cellules.  [...] Déjà quand tu décongèles, il faut que tes cellules soient le plus concentrées possible de manière à optimiser leur reprise. Généralement, je décongèle une ampoule dans un T25. En plus l'ATCC ils sont assez radins et leurs ampoules ne comptent pas plus de 500000 cellules, raison de plus pour décongeler ce genre d'ampoule dans le plus petit conditionnement possible.  [...]

[Biologie Cellulaire] HEK et nitrogène

Je comprends le truc de l'azote, j'ai bénéficer de cette condition aussi aux USA lors d'une stage post-doc. Pour ce qui concerne mon problème actuel, lorsque je sème me cellules fraîchement décongelées et que j'observe ma boite au microscope il me semble qu'elles ont un aspect tout à fait correct en suspension.  [...] .. Quelques heures après elles restent toujours en suspension et finissent par se nécroser - j'ai essayé avec 2 types de cellules (cellules natives HEK et cellules HEK transfectées), le résultat est le même. elles ont du mal à redémarrer. J'utilise du DMSO à 10% pour les congeler, est-ce que quelqu'un a eu un problème avec ce produit avant (c'est le seul point commun que je vois).  [...]

[Biologie Cellulaire] Aide pour une perfusion de cellules isolées

Je ne pense pas qu'il s'agisse de microinjecter des cellules puisqu'elles sont en suspension. On peut le faire sur des cellules posées sur lame grâce à des micro-aiguilles, mais là, on ne pourra pas. Le terme perfusion est dés lors assez mal choisi.  [...] En l'occurrence, mettre en place un système de filtration à vide et un système de surperfusion. Ayant déjà fait le TP, ma question porte sur le rapport que j'ai à faire, mon groupe était sur la filtration à vide et du coup je galère pour la partie concernant le système de renouvellement de milieux.   [...]

[Divers] matière totale d'un échantillon

1-sachant que la tare du filtre est de 1.2344g déterminer la concentration en mg/l des matières en suspension MES et des matièrs volatiles en suspension MVES sachant que.  [...] dans la dernière question on nous demande de déterminer la proportion biodégradable des matières totales de cet échantillon.   [...]

culture cellulaire carcinome HNSCC

J' ai effectué une mise en culture en flasque avec du milieu a 20% SVF avec péni/ strepto. Des cellules de type epithéliales commencent à apparaitre mais chose curieuse, j'ai remarqué des cellules en suspension qui forment des amas. comme des clusters de Lymphocytes. Est ce normale.  [...] Je ne connais pas ces cellules en particulier, mais si les cellules ont été mal séparées lors du dernier passage, vous avez des amas qui vont rester dans votre suspension et vont se coller au fond de la boite. Ils grandissent souvent un peu mais ont plutôt tendance à se décoller.  [...]

[Biologie Cellulaire] Exercice Bio PCEM1

Sachant que la suspension S avait elle-même été obtenue en concentrant par un facteur 5 une culture C, combien y avait-il de cellules par mL dans la culture C.  [...] Pour concentration la culture, il est probable que la culture C ait été centrifugé. les colonies ont donc été culottées au fond d'un tube et resuspendues dans du milieu de culture, dans un volume 5x plus petit que celui de C (c'est cela que signifie concentrer une culture ).  [...]