• Forum - Cellules, Boîte, Concentration

[Biologie Moléculaire] clonage

Bonjour, SVP je voudrais savoir comment on appel le fait de mettre des cellules eucaryote dans une boite de pétrie a une concentration assez faible (100cellules par ml) afin d'obtenir des colonies individualisées et les mettre en culture par la suite dans des puits de sorte a retrouvé une colonie par puits dans une boite de 24 puits par exemple.  [...]

DMSO : utilisation thérapeutique?

Ce qui me dérange dans le DMSO, c'est son absence de spécificité. Donc même s'il a des avantages, les effets secondaires doivent être redoutables. Je reconnais que c'est un solvant particulier puisque à forte concentration il provoque la différenciation de précurseurs de neurones en cellules musculaires.  [...] Pour ce qui est des effets indésirables (j'avoue ne pas avoir tout saisi des implications de la différenciation de précurseurs de neurones en cellules musculaires, mon bagage scientifique est assez léger...) tu parle d'une forte concentration mais...tu peux préciser si tu parles d'un homme, d'une boite de Petri, d'une solution à 90% de DMSO ou de 5L de DMSO.  [...]

[Biologie Cellulaire] Adhérence cellulaire

bonjour à tous, une petite question toute bête...comment les cellules adhèrent elles à la boite de culture et donc qu'est ce qui différencie les cellules adhérentes et les non adhérentes du point de vue moléculaire.  [...] J'avais lu dans un livre comment effectuer une culture de cellule souche et je l'ai même retrouvé sur un site où ce trouve un passage qui parle de l'adhésion de ces cellules sur une boite de culture, et il est vrai qu'il existe des cellules fortement adhésive comme les fibroblastes et des cellules faiblement voir non adhésive comme certaine cellules du sang, de la rate et de la moelle osseuse.  [...]

Relation cancer(s)/candida albican - Page 3

La reponse se trouve partout dans ses bouquins, et son site web, et elle constitue la clef de sa theorie. Tout simplement par ce que le cancer est cree par candida albicans, et que celui ci est un champignon pouvant etre detruit par le bicarbonate. En fait sa theorie, c'est qu'une infection de candida albicans va etre nocive pour les cellules avoisinantes et va donc declencher une multiplication excessive.  [...] Et en ce qui concerne le point 3 du postulat, c'est surtout valable pour les injections de cellules transformées et pas pour les agents infectieux (si tu injectes l'HBV, tu auras développement d'une hépatite virale et beaucoup plus tard d'un CHP mais qui sera due à une association d'évènements et pas seulement au HBV).  [...]

Méthode ELISPOT !

la question,,, si j'arrive a mettre dans ma boite Elispot,, plusieurs type de recepteurs ou de molécules d'adhesions trouvé sur toutes les cellules,, quand je ferais pousser mes cellules dessus. y'en à qui vont se fixer,, avec l'intermédiaire de molécules d'adhesion differentes,,, ces molecules qui se fixent peut etre muc1,, mais pas nécesairement,,,  [...] Donc questions,,,, le lavage,,, est-ce quil casse les liaisons entre les cellules et les ligands,,, ou au final y'auras un nombre de cellules collé dans ma boite.  [...]

[Biologie Cellulaire] Aide pour culture en boite de Pétri de cellules type cellules d'oignons.

Je desirerai cultiver des cellules comme les cellules d'épidermes d'oignons (cellules ou l'on distingue facilement le noyau du cytoplasme à un grossisement microscopique faible) dans des boites de Pétri.  [...] Pour m'aider, je voudrai juste que vous me disiez quelles cellules peut on cultiver dans des boites de Pétri (sur un milieu gélosé de préférence). Cellules végétales ou animales Si je parle de cellules d'épiderme d'oignon, c'est parceque ce sont des cellules qui sont relativement grosse, de forme rectangulaire ou l'on distingue le noyau.  [...]

[Biologie Cellulaire] Western blot + extraction proteine

Par contre, si je n'ai pas beaucoup de cellules sur ma boîte, ou si j'ai peur que les protéines soient trop diluées, je racle mes cellules dans du PBS et je transfère le tout dans un eppendorf. Je centrifuge un peu pour faire tomber les cellules, un lavage au PBS en plus, et je reprend le culot dans 50ul de RIPA.  [...] En ce qui concerne le volumen de lyse, je ne travaille pas en flasque, mais je lyse une boite de 6cm avec environ 1 à 2 millions de cellules, et ensuite je charge environ 15 à 25 µL ce qui correspond à 30000 ou 50000 cellules par puit. Mais après tout dépend de la protéine que vous voulez détecter.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de construction d'une banque d'ADNc

En fait, j'ai vérifié toutes les étapes depuis l'extraction de l'ARN jusqu'au fractionnement... j'ai aussi vérifié la compétence de mes cellules... toujours aucune colonies sur boite.  [...] Apparemment c'est la ligation qui bloque... en utilisant une ligase différente de celle du kit et en étalant les cellules après centrifugation (concentrées) je me suis rendue compte qu'il y a des colonies sur ma boite.  [...]

culture cellulaire carcinome HNSCC

Je ne connais pas ces cellules en particulier, mais si les cellules ont été mal séparées lors du dernier passage, vous avez des amas qui vont rester dans votre suspension et vont se coller au fond de la boite. Ils grandissent souvent un peu mais ont plutôt tendance à se décoller.  [...] Autre point, avez vous regardé l'ensemble de la boite Si votre incubateur n'est pas droit, ou mal monté, vos boites vont être inclinées et vous aurez énormément plus de cellules dans un coin de la boite par rapport au reste de la boite. Il m'est déjà arrivé de regarder rapidement une boite, voir 50% de confluence et puis de screener un peu et de me rendre compte que dans un autre coin de la boite on était à 100%.  [...]

[Microbiologie] l'antibiogramme

Sur un milieu gélosé (boite), la souche est étalée de sorte a avoir un tapis cellulaire. Puis un ou plusieurs disque(s) est(sont) ajouté(s) sur la boite. Après un certain temps au frigo (pour que l'antibio diffuse dans la boite), les cellules sont mises à l'étuves.  [...] La diffusion de se fait grace à un gradient de concentration (l'Ab diffuse de la pastille concentrée vers le reste de la boite). Le passage au frigo, à mon avis, permet de mettre en place un gradient cst sans qu'il y ait de croissance bactérienne (pour éviter les erreurs d'interprétation).  [...]