• Forum - Cellule, Rendement, Extraction

extraction et dosage des protéines totales

J'ai ensuite trouvé que 40% d'une cellule est constituée de protéines. Mais bon il me manque encore le poids d'une cellule et le rendement d'un extraction... hin hin... je sais pas si c'est la bonne direction pour répondre à ma question.  [...] Je crains que ca depende énormément du type cellulaire utilisé et des techniques d'extraction. Le plus simple me semble de faire toi meme l'essai pour voir.  [...]

[Biochimie] lyse de cellules de champignons filamenteux

[Biochimie] lyse de cellules de champignons filamenteux.  [...] Je cherhce à augmenter le rendement d'extraction d'enzymes (pectine esterase et pectine lyase) à partir d'une culture de champignons filamenteux. Pour le moment la methode utilisée est le broyage mécanique avec une solution d'extraction saline (NaCl). Je souhaiterai savoir si qq'un peu me conseiller sur des méthodes de lyse cellulaire (physique, chimique).  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ARN

J'ai juste remarqué qu'en travaillant sur des échantillons congelés dans le TRIzol, j'avais un meilleur rendement que si je les traitais de suite après le prélèvement. Le fait de chauffer les échantillons pour favoriser la dissolution des sels avant extraction augmenterai mon extraction d'ARN.  [...] Juste pour vous dire que j'ai retenté une extraction d'ARN en faisant un lavage supplémentaire au chloroforme et mon rapport DO 260/230 est passé de 0,4 à 1 donc nette amélioration. J'ai dû cependant compenser la perte de rendement d'ARN en partant d'une quantité d'échantillon de 30% supérieure.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction ARN

Le problème c'est que mon extraction avec le Tripure à un rendement faible et ensuite ma PCR ne donne pas de résultats. Enfait le signal de mon blanc est plus élevé que pour mes cellules péritonéales. Je pense peut-être à la présence d'un inhibiteur.  [...] J'ai des résultats avec la méthode d'extraction par colonne, par contre toujours rien pour le Tripure. Connaissez vous un kit permettant d'éliminer les éventuels inhibiteurs de pcr présents dans le tripure.  [...]

Biologie moléculaire: quantité de plasmide

Tout d'abord, nous avons des cultures de bacteries et on effectue l'extraction des plasmides.  [...] Ensuite, expérimentalement, on n'est pas capable d'extraire toute cette quantité car il y a des pertes dues à l'extraction elle-même. On te dit que le rendement de l'extraction est de 75%. Combien peux tu alors espérer en récupérer.  [...]

Pourquoi la cellule eucaryote est-elle compartimentalisée ?

Vu comme ça, ce ne sont pas des arguments (douteux) comme un meilleur rendement qu'il faut chercher, mais la niche des eucaryotes et comment leur structure est adaptée à cette niche (et réciproquement.). Mais j'ai peur que ce ne soit pas dans les cours de prépa qu'on trouvera les réponses à cette intéressante question.  [...] La taille d'une cellule est fondamentale. La biologie, c'est de la chimie. Si vous voulez qu'une réaction se fasse, vous avez besoin des concentrations adéquates. Dés lors, soit vous compartimentez et abaissez ainsi le volume de réaction, soit vous augmentez les concentrations cellulaires globales des produits considérés.  [...]

[Biologie Moléculaire] Meilleure technique d'extraction ?

Pour l'extraction nous utilisons un kit qui donne un bon rendement et de l'ADN assez propre, mais la nouvelle responsable du service nous le déconseille, en disant que l'extraction phénol-chlorophorme nous permettra une meilleure conservation de l'ADN.  [...] Perso, je faisais une extraction phénol-chlo après les étapes de déplétion (je travaillais sur du sang total) et puis, plusieurs amplification de génomes totaux de pathogènes avant d'hybrider sur la puce.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN

Je suis entrain d'optimiser une extraction d'ARN chez le chêne Liège. J'ai essayé un kit commercialisé mais la pureté et le rendement en ARN est très faible. J'ai trouvé ds un article un kit maison, il utilise du glycogene pour précipiter l'ARN. Est ce que qlq'1 connaît un autre produit pour substituer le glycogene.  [...] Je n'ai jamais fait de BV, mais avez-vous essayé une extraction au thiocyanate de guanidinium-phénol-chloroforme (trizol, RNAplus, etc...) Le rendement est plutôt bon et ce n'est pas très cher.  [...]

[Biologie Moléculaire] Ligation

Pour les sous-clonages que je suis en train de réaliser, cela fais un moment que j'ai abandonné l'extraction sur gel qui, pour toi aussi apparemment t'as porté préjudice. Maintenant je suis passé sur un PCR extraction kit qui permet de se débarasser des enzymes de PCR ainsi que de restriction et de la phosphatase alkaline, par un système de colonne.  [...] Sinon les problemes liées à l'extraction des bandes des gels sont la conséquence d'un mauvais rendement d'extraction J'utilise le kit de promega et personnellement je n'ai jamais eut de probleme, mais comme piwi j'essaye au possible de ne pas passer par la, a cause de la quantité d'ADN perdue.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ARN à partir de coupes cryostat

Puis-je faire des coupes que je congèle à -80°C avant de lyser et d'extraire l'ARN Ou vaut-il mieux que je lyse mes coupes, puis que je congèle le lysat à -80°C en vue d'une extraction plus tard.  [...] tu peux très bien conservés tes coupes à -80°C et faire l'extraction après. Je l'ai déjà fait et si les coupes sont très bien conservées il n'y a absolument pas de problèmes.  [...]