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[Génétique] différence promoteur exécutif/signal d'adressage

voilà j'ai une petite question. Lorsqu'on réalise une construction génétique on peut y insérer un signal d'adressage. séquence qui va coder une séquence d'aa qui permettra le transfert de la protéine dans une certaine partie de la cellule tandis que le promoteur pourra envoyer la protéine dans certains tissus.  [...] Est ce que c'est donc la seule distinction qu'on peut faire entre un promoteur exécutif et un signal d'adressage. le promoteur va diriger la protéine dans une certaine région de l'organisme et le signal d'adressage dans une certaine région de la cellule.  [...]

Expression d'un transgène

Il doit exister des systèmes où tu exprimes un facteur de transcription sous contrôle de ton promoteur tissu spécifique, et ensuite ce facteur de transcription avec son propre promoteur s'occupe de ta protéine.  [...] Rien ne dit que le promoteur fort ne fera pas de fuite indépendamment du promoteur tissu spécifique, ni qu'il aura un effet positif sur le promoteur tissus spécifique.  [...]

[Génétique] Stochasticité dans l'expression des gènes

Sans compter les facteurs de transcription définissant l'identité cellulaire, ce qui concerne alors l'expression tissu- ou cellule-spécifique de ces facteurs. En plus de ça on a les histones acétylases, déacétylases, les méthylations du promoteur au niveau d'ilôts CpG mais aussi celle des histones qui influencent très fortement l'expression d'un gène.  [...] Pour reprendre ton post ci-dessus, ce que j'ai compris c'est que la cellule explorerait aléatoirement les champs phénotypiques possibles et qu'une stabilisation de l'un des phénotypes interviendrait (par exemple une protéine membranaire serait exprimée et elle serait stabilisée par une interaction avec une autre protéine membranaire).  [...]

[Biologie Moléculaire] Promoteurs altérnatifs

OK merci Taz 79. Encore une petite chose. Lorsqu'un gène comporte plusieurs promoteurs, est-ce que tous ses promoteurs sont actifs ou seulement certains Cela dépend du type de protéine qu'on veut produire ou pas.  [...] Je pense que la concentration de la protéine peut jouer indirectement sur l'activation du promoteur et le choix du promoteur. Je m'explique. Par exemple, si ta protéine est synthétisée à un niveau basal dans la cellule et que soudainement il n'y en a plus.  [...]

[Biologie Moléculaire] Promoteur alternatif

Donc cette utilisation de promoteurs alternatifs permet une très haute spécificité de l'expression génique et le choix de promoteurs dans la cellule n'est pas fait au hasard.  [...] Une cellule ( X) contient un promoteur X qui contient un exon X que n'a pas une cellule Y ( parsque pas le promoteur X). Alors la production de l'ARN chez la cellule X serait 30 fois plus grande que chez la cellule Y ( ce n'est qu'un exemple ( c'est pas valable tout le temps), c'est pas évident a comprendre mais c'est de la logique ).  [...]

système Cre-ER(T2)

Tout n'est qu'une question de promoteur. En plus claire, le promoteur qui sera utilisé pour conduire l'expression de ta fusion Cre-ER peut etre constitutif, dans ce cas Cre-ER sera exprimé dans tous les tissus mais défloxera que si l'animal recoit l'agoniste de ER.  [...] ou bien le promoteur est tissu-spécifique et c'est là ou les choses se compliquent car en réalité il faut parler de promoteur tissu-sélectif et non plus de tissu-spécificité. En plus claire, un promoteur qui est censé entrainé l'expression du transgene dans le muscle squelettique uniquement (car c'est ce qu'il fait naturellement lorsqu'il est dans le genome à son locus), présentera des fuites transcriptionelles plus ou moins négligeable cad suivit ou non de la synthese de Cre-ER (ou de tout autre transgene).  [...]

[Biologie Moléculaire] transgenése

Vu qu'un le virus pourrait passer d'un tissu à l'autre si tu veux inoculer un organisme entier mais rester specifique sur le tissu infecté (a moins de cibler un recepteur de surface qui soit specifique de ce tissu pour que le virus se fixe et entre que sur les cellules qui possède ce recepteur), une alternative serait de transformer ton organisme entier avec ton gène qui donnera un miRNA spécifique de la sequence que tu veux inhiber dans la cellule, mais lui flanquer un promotteur spécifique du tissu.  [...] dans ce cas tous les tissus auront le gène mais il ne sera exprimé que dans le tissu qui exprime les gènes avec ce promoteur, et ce tissu synthétisera son propre miRNA spécifique du gène a éteindre.  [...]

[Biochimie] Combient de different types de cellules dans le cerveau d´un mamifère

De plus je me demande comment on peut isoler une cellule (voire même un nombre restreint de cellule) d un tissus déjà bloque dans la paraffine.  [...] De plus, je pense que seule certaine cellule exprime le transgene à cause du promoteur inséré. Dans ce cas ne serait il pas plus judicieux d' essayer d' amplifier uniquement l' ARN (PCR avec un seul primer).  [...]

[Biologie Moléculaire] Plasmide

Des séquences contenues au sein d'un plasmide peuvent s'intégrer par recombinaison homologue dans l'ADN génomique d'une cellule eucaryote. Ce procédé peut être réalisé avec une transfection classique suivie d'étapes de sélection (G418 le plus souvent) sur plusieurs semaines pour sélectionner les clones stables. on parle alors de transfection stable.  [...] imaginons que je veuille étudier une protéine tagguée ou un promoteur a l'aide d'un gène reporteur, dois-je obligatoirement utiliser un plasmide pr transfecter ma cellule par lipofection ou biolistique.  [...]

[Biochimie] La traduction ADN - ARN

La fonction de signal ne sert pas qu'entre cellules, mais aussi au sein de la cellule (ex. facteurs de transcription se fixant sur un site promoteur d'un gène).  [...] Je travaille avec le CNED. (Sur la photo je sais que j'ai faux aux réponses dans les petits rectangles, il ne faut pas y faire attention ^^) mais je ne comprends pas pourquoi il demande de donner le nom général des molécules numérotées de 1 à 6 donc j'avais mis Met, Phe, Leu, Ala, Tyr, Arg et ensuite il demande de compléter les deux rectangles et indiquer le nom précis de chacune des molécules 1 à 6.   [...]