• Forum - But, Contrôle, Positif

Question manip!

Je cherche une protéine de contrôle (un contrôle négatif), n'induisant aucune sécrétion d'interleukine lorsqu'on l'ajoute sur des cellules dendritique. J'ai essayer la BSA mais j'obtiens une activation des DC avec sécrétion d'IL.  [...] Lol oui en effet ça fait un contrôle positif mais c'était pas vraiment le but...^^.  [...]

[Biologie Moléculaire] Est-il possible d'effectuer une PCR directement à partir d'ARN ?

Dans le cas d'une RTPCR, à quoi sert le controle positif ARN ( contamination par ADN.  [...] Oui c'est le but du controle positif, on fait une PCR sur le tube avant la RT, ainsi si y a ampli c'est qu'il y a de l'ADN dans ton échantillon.  [...]

[Biologie Cellulaire] Induction d'apoptose 3T3

Je cherche actuellement à induire l'apoptose de 3T3 swiss albino pour effectuer le contrôle positif d'une manip de cytométrie (autre que la staurosporine, trop chère pour le labo...). Quelqu un aurait-il une idée.  [...] - je souhaite effectuer une manip de détection Annexine V / PI par cytométrie en flux. Je cherche donc à avoir un contrôle positif pour chacun de ces paramètres. Si j'ai bien compris, il me suffit d'avoir des cellules nécrotiques, ce que je cherche donc à obtenir.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de PCR

Pour savoir quel est le réactif de la PCR qui est contaminé, on a procédé à refaire une autre PCR mais cette fois ci sans l'ADN de nos échantillons. (Je sais qu'il est plus pratique de jeter les anciens réactif suspects d'être contaminés et refaire le travail avec un tt nouveau kit.   [...] pour le contrôle positif, pourrais tu me dire comment le faire et surtout qu'est ce que ça doit m'apporter.  [...]

[Biologie Moléculaire] Probleme de clonage avec pT7Blue

Si j'ai bien compris le TP (en anglais...) vuque le test positif n'a pas marché avec pT7Blue plasmide, on a donc utiliser pBluescript, mais je n'en suis pas sure... En cas de controle positif du kit commercial negatif, il faut donc changer le vecteur A quoi peut etre dut cet echec.  [...] le controle positif fut fait au debut du TP... mais il ne marcha pas avec le plasmide pT7Blue, quelles sont les raisons possibles.  [...]

[Biotechnologie] Résultats d'un criblage biologique...

Quoi qu'il en soit, lorsqu'on fait un crible, la valeur du signal n'est pas importante. On compare toujours la valeur obtenue avec l'inhibiteur par rapport à un contrôle positif (sans inhibiteur - signal max) et un contrôle négatif (sans ligand marqué - signal min) et on obtient ainsi un pourcentage d'inhibition.  [...] On compare toujours la valeur obtenue avec l'inhibiteur par rapport à un contrôle positif (sans inhibiteur - signal max) et un contrôle négatif (sans ligand marqué - signal min) et on obtient ainsi un pourcentage d'inhibition.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de clonage dans le pGEM-T easy vector.

Déjà une chose, ça a pris plus de temps que d'habitude pour avoir des colonies. Le contrôle positif fait avec un de mes vecteurs et les cellules a donné des colonies après une nuit (normal). Pour mes plaques de transformation, j'ai du attendre 1 jour pour avoir des coloniees bien visibles.  [...] Encore une petite chose par rapport à l'Arc qui est arrivé lors de l'électroporation. Le background control de promega était ok, pas d'Arc. Par contre, LEUR contrôle positif avec les 2 ul de leur ADN à insérer m'a donné un Arc. Je ne comprends pas pourquoi vu que j'ai juste suivi le protocole.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème avec mes transformations

Le contrôle positif a été effectué en ajoutant du pUC18 aux cellules.  [...] C'est ce que je vais faire. Il faut que je quantifie exactement quelle concentration j'ai de mon vecteur. Ensuite j'essaierai d'avoir une quantité équimolaire des deux. J'ai réalisé la ligation dans 20 ul au total, car j'utilise une partie de la ligation pour mettre sur gel comme contrôle.  [...]

[Immunologie] Problème ELISA direct avec les puits non coatés

Effectivement, j'ai un contrôle positif qui donne de très bonnes D0 en duplicata (1,3 à 2,3), quoique le puits non coaté reste relativement élevé (0,5 à 0,9).  [...] Je ne vois pas de contre indication à l'utilistion du lait même pour un petit peptide, tu as autant de risque d'avoir une intéraction non spécifique que dans un tampon commercial.  [...]

[Biologie Cellulaire] Besoin d'aide pour savoir quel test statistique utiliser

Quelques jours après je réalise des traitements (différentes doses d'une même molécule + contrôle négatif (solvant) + contrôle positif) en triplicat, que je renouvelle 3 jours après. 3 jours après le dernier traitement j'évalue l'effet des traitements sur la prolifération cellulaire (comptage des cellules).  [...] Concernant l'analyse des résultats, j'exprime mes données en pourcentage de mon contrôle positif. Je fais la moyenne de tous les triplicats sur plusieurs manips. J'aimerais savoir comment identifier si les différences avec le contrôle négatif sont significatives ou non (quel test utiliser ANOVA Mann-Whitney autre ).  [...]