• Forum - BSA, Mesure, Concentration, Protéines

role de la BSA dans la mesure de la concentration des protéines !!

j'ai lu un article et j'ai tombé sur cette phrase qui dit que la concentration des protéines a été mesuré en utlisant la Bovine serum albumin. j'ai pas compris comment ils ont fait. est ce qu'il y a un nom pour cette méthode parcequ'elle n'est pas mentionnée dans la bibliographie.  [...] En fait, cette méthode sert à quantifier des protéines inconnues en utilisant des protéines avec des concentrations connues à l'instar de la BSA. Avec cette derniére, tu crées une certaine plage de concentrations de sorte de pouvoir trouver la concentration de ta protéine inconnue en extrapolant les D.O.  [...]

[Biochimie] NanoDrop

Tu peux lire la DO ADN/ARN auquel cas il mesurera automatiquement 230/260/280 et te donnera les ratios et la concentration.  [...] Tu peux lire la DO proteine pareil, il va mesurer 260/280 et 230 ou 330 je sais plus, il a meme des proteines preintegree comme la BSA pour la quantif, sinon tu rentre toi meme ton coef et il te donne la concentration.  [...]

[Biologie Moléculaire] Preparation d'une gamme étalon ou standard pour PCRq

Car c'est surement une mauvaise lecture de ma part, mais en te lisant j'ai eu l'impression que tu voulais une gamme pour relier directement a une quantité en ng ou nmol initiale de ton gène, un peu comme en biochimie on prépare une gamme de BSA pour obtenir une concentration de protéines.  [...] Donc meme si tu as une séquence de ton gène en plasmide, que tu l'amplifie dans des bactéries, que tu l'extrait des bactéries, pose sur gel puis extrait du gel ta bande d'intéret, la purifie puis quantifie, tu auras la concentration que tu pourras diluer et te servir en qPCR, mais la meme quantité de transcrits, sur de l'environnemental ne donnera pas les mêmes résultats (ou alors il ne faut pas que tu utilise des primers dégénérés sur ton témoin car pour une meme quantité de primers tu n'auras pas le même taux de fixation, mais même dans ce cas, ton efficacité E ne sera pas la meme entre ton standard et ton echantillon).  [...]

[Biochimie] Role de la BSA dans une extraction protéique ??

Mais lorsque je dose ensuite mes protéines extraites, la BSA est utilisée dans la gamme étalon. Dans quelle mesure la BSA présente dans mes extraits (puisque dans le tampon d'extraction) ne va pas fausser la quantification des proteines extraites par la suite.  [...] Sauf que le BSA doit avoir précipité aussi et la reprise du culot va modifier la concentration en BSA parasite de mon extrait par rapport à la gamme étalon si je la fait dans mon tampon d'extraction (avec PVPP et BSA).  [...]

[Biochimie] [TP Séparation de molécules par chromatographie d'exclusion sur colonne] Niveau L1S1

Les deux et troisième manip du TP consistent à établir la gamme étalon du cytochrome c par dilution d'une solution-mère à 0,5mg/mL dans différents volumes et mesure d'absorption à 408nm ainsi que la gamme étalon pour le dosage des protéines grâce à une solution de BSA (albumine sérique de boeuf) à 1mg/mL avec du bleu de coomassie (méthode de Marion S. Bradford).  [...] On a ensuite dû prélever 20micro litres des fractions 1 à 11 (la dernière contenant les dernières molécules de cytochrome c) et d'y rajouter 1mL de bleu de Coomassie permettant de mettre en évidence la présence des protéines. Avec la gamme étalon du BSA, on a pu obtenir la quantité de protéine pour ces fractions, en micro g.  [...]

[Biochimie] méthode de BRADFORD

Normalement pour une concentration fixe de BSA tu dois obtenir a peu pret toujours la meme DO (le bradford n'est pas une technique precise, et 10 a 20% d'erreur n'est pas impossible).  [...] Merci de m'avoir répondu. Mais en fait, je suis dans la zootechnie, et j'ai à determiner les concentrations en protèine d'ordre de microgramme (glandes hypopharyngiennes des abeilles) et je ne sais pas quelle concentration BSA à utiliser pour tracer ma courbe d'étallonnage autrement dit comment je dois préparer la solution mère (quantité de BSA en poudre et la quantité d'eau distillée).  [...]

[Biotechnologie] méthode de Bradford

Et si j'ai bien compris la gamme de sérumalbumine bovine prédéfinie va réagir avec le Bradford qui aura une coloration de plus en plus intense plus la concentration sera élevée, en comparant avec notre solution à doser qui elle aussi à réagit avec le bradford et va donner une certaine coloration, on saura donner la concentration en proteine de la solution à doser en fonction de son intensité en bleu Ai-je bien compris.  [...] Le bradford est un réactif, il doit être ajouté dans chaque puits contenant une protéine à doser, que ce soit l'étalon (la BSA) ou la solution à concentration inconnue.  [...]

[Biochimie] TP activité de la phosphoénol pyruvate carboxylase, calcul vitesse initiale

J'ai calculé au préalable avec une gamme étalon de la BSA la concentration protéique pour chacune des deux espèces végétales mais je comprend pas ce qu'il faut faire pour calculer l'activité spécifique de la PEPcase.  [...] Ayant calculé le nombre de mole de PEPcarboxylé par min et ayant calculer la concentration protéique (extrait enzymatique) pour chaque espèce végétale, pour avoir l'activité spécifique de la PEPcarboxylase je dois juste diviser le nombre de mole de PEP caboxylé par min PAR la masse des extraits protéiques.  [...]

[Biochimie] dosage des proteines

quel sont les points de comparaison eventuel,entre un dosage de proteine avec la methode de brad ford,et un dosage par elisa indirect,c'est pour une conclusion general.  [...] bradford. 1_solution de proteine reference BSA dans des tubes a concentration ascendante,volumes finaux egaux ajuster avec du NaCl, 2_solution de la proteine a doser (x) dilué, 3_ reactif de bradford que l'on ajoute dans les tube,meme dans le banc (qui ne contien rien),..courbe detalonage.  [...]

PCR et amorce

Quand on veut faire de la PCR, on définit un couple d'amorces (une sens et une anti-sens) permettant d'amplifier la région d'intérêt.   [...] Le mélange réactionnel contient les différents réactifs (Tampon, dNTPs, BSA, Amorce sens, Amorce anti-sens, Taq polymérase) à des concentrations optimales pour assurer le déroulement de la réaction de PCR. On ne rajoute donc pas d'amorces au fur et à mesure, mais elles sont dans le mélange réactionnel de départ.  [...]