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[Microbiologie] dilution et colonies de bactéries

Imaginons que l'on prenne 5ml avec une concentration de 10^8 bactéries/ml. On dilue en prenant chaque fois 0.5 ml ce qui donnera dans le prochains tubes 10^7 bactéries/ml, 10^6, 10^5 etc. On fait cela jusqu'à 10^3 bactéries/ml.  [...] Prenons maintenant un exemple. En étalant 0.1ml de la suspension du dernier tube de dilution sur une boîte (celui ou il y avait 10^3 bact/ml), nous observerons 100 colonies après incubation de la boîte. comment remonter à la concntration de bactéries dans ce tube.  [...]

[Divers] Bactéries

Pour faire le dénombrement de bactéries,on fait différentes dilutions de rapport 10 et ensuite on met cultiver ces solutions dans des boites de Pétri.Plus la dilution augmente, moins on aura de colonies sur la boite.  [...] Méthodes de dénombrement bactérien. Tout va être basé sur des méthodes de dilution car on ne peut pas compter les bactéries sur un champ s'il y en a 1 milliard par exemple. Il faut diluer pour avoir quelques bactéries par champ. C'est la même chose sur une boîte de Pétri, si on a plus de 1000 colonies, on ne peut plus compter car on a une nappe de bactéries, de colonies qui sont confluentes.  [...]

aide pour culture bactérie

Pour récuperer des bactéries c'est assez simple. Vous prenez une boite de culture avec du milieu, vous mettez vos doigts dessus (pas fraichement lavés), vous incubez à 37°C durant une nuit (ou deux) et vous devriez voir des colonies. Vous devriez trouver des colonies jaunes qui correspondent à staphylococcus aureus (staphylocoque doré).  [...] Une autre méthode facile pour cultiver des bactéries est de partir d'un yaourt. quelque millilitres dilués et étalés sur une boite devrait vous fournir des belles colonies de bactéries lactiques. Moins contraignantes que les Staph, les bactéries lactiques sont par contre plus résistantes à un certain nombre d'antibiotiques.  [...]

Plasmide recombinant

L'ampicilline est l'antibio classique qui permet de sélectioner les bactéries qui contiennent le plasmide quand tu les transformes (seuls poussent les bactos qui ont le plasmide). C'est l'étape de la contruction et de la sélection.  [...] cette sélection s'effectue en étalant les bactéries transféctées sur une boite d'agar contenant la Tet, toutes les colonies obtenues de cette façon contiennent un plasmide.ces colonies résistantes sont ensuites téstées pr leur capacité de croitre sur un milieu contenent l'Amp.  [...]

[Microbiologie] la différence entre 2 milieux de culture

un milieu d'isolement est en général un milieu où tu as le plus de chance que tes bactéries poussent bien, pour pouvoir à partir d'un mélange de bactéries les isoler (obtenir des colonies isolées sur ta boite apres ensemencement).  [...] un milieu sélectif va contenir des inhibiteurs qui vont bloquer la pousse de certaines bactéries, ou en favoriser d'autres, il sert à selectionnerou mettre en evidence des bactéries. tu peux aussi réaliser un isolement dessus, mais dans la limite des bactéries pouvant pousser dessus.  [...]

[Microbiologie] Les différents systèmes de comptage de colonies en boîte de Petri

je viens de commencer mon mémoire de fin d'etudes qui porte sur l'analyse et le comptage de colonies (bactéries) dans une boite de petri,et j'aimerais juste avoir quelques informations sur les différents systèmes ou méthodes de comptage de colonies en boite de petri, et lesquelles, svp.  [...] Parfois on compte les colonies à l'oeil nu, d'autres fois on dilue la culture avant d'étaler pour éviter d'avoir des tapis ou un trop grand nombre de cellules (genre 10'000 colonies par boite), en procédant par dilutions en série d'un facteur 10 à 10^-10 maximum je pense.  [...]

[2nde] L'ADN...

Résultat du transfert d'ADN. La protéine GFP rend fluorescente les organismes dans lesquels elle est présente, lorsqu'on les soumets aux rayonnements ultraviolets. Sous une lumiere normale, il apparaît autant de colonies de bactéries dans les 2 boîtes ( ci-dessus il y à 2 boites, une boîte témoin et une boîte experience ).  [...] Moi je pense que ce type de marqueurs fluorésents permettent de mettre en évidence les bactéries mutées, c'est à dire celles qui ont réçues le gène d'intérêt, ce qui permet aux scientifiques de les retrouver plus facilement. Fait attention à mon avis c'est pas des bactéries que tu vois dans les boites mais des colonies de bactéries, si ça pas une image de microscopie bien sur.  [...]

[Biochimie] Question sur la biotechnologie

Une méthode simple de criblage est l'hybridation sur membrane avec une sonde radioactive. Par exemple, si tu as réalisé ta banque par clonage avec des plasmides chez E. coli, tu fais une réplique des boîtes de Petri contenant la banque sur une membrane de nitrocellulose, tu soumets la membrane à l'action de la soude (qui lyse les bactéries et dénature l'ADN), ensuite tu incube la membrane avec une sonde radioactive complémentaire de ta séquence d'intérêt, puis tu révèles par autoradiographie.  [...] Dans une banque tu as de nombreux clones différents. Ceux identiques sont ceux qui forment une colonie (=un clone) sur ta boîte (car il faut des millions de bactéries pour former quelque chose de visible à l'oeil nu). Sur une boîte de Petri tu peux avoir des centaines de colonies qui correspondent à un fragment d'ADN unique au sein de la banque.  [...]

[Biologie Moléculaire] Mutagenèse par PCR : Tm des oligos

Etes vous certain que c'était bien du pGLO une manip très simple pour savoir c'est de transformer des bactéries avec du pGLO, de les étaler sur boite de Pétri et ensuite de mettre la boite de Pétri au dessus d'un trans-illuminateur, les colonies devraient devenir vertes.  [...] Justement la suite du TP était une digestion par Dpn1 et après de transformer des bactéries avec ce produit de PCR. nous avons eu quelques colonies mais pas assez de temps pour les laisser grossir et pouvoir voir qu'elle étaient vertes ou bleues, et en plus on était pas équipé pour le voir.  [...]

dosage des protéines

j'ai penser aux méthodes de dosage par l'ONP mais concretement je ne sais pas si je dois prélever les bactéries de la boite de petri (colonies) et réaliser le dosage directement.  [...] a partir des colonies sur la boite de petri tu en prends une que tu mets dans un milieu de culture liquide (5ml) tu mets le tout a agiter la nuit a 37°C.  [...]