• Forum - Biologie moléculaire, Solutions, ARN

[Biologie Moléculaire] solutions d'ARN trop diluée

a la fin de la purification des ARN, on espère obtenir des solutions d'ARN a une concentration supérieure a 1ug/ul.  [...] si par malchance vos solutions d'ARN étaient trop diluée, proposez une stratégie pour les concentrer a 0.25ug/ul.  [...]

[Biologie Moléculaire] IMPORTANT Conservation produits de PCR

En fait on a longtemps considéré qu'il fallait tout conserver au congélateur un peu pour surprotégé nos précieux ADN, mais c'est un peu faux, et voire même abouti à l'inverse. La congélation entraine bien évidemment la formation de cristaux de glace qui vont possiblement endommager les molécules présentes dans le liquide.  [...] A l'heure actuelle, beaucoup considèrent qu'en biologie moléculaire, ce sont les solutions mères qu'on peut conserver à -20°C et le reste à +4°C (plutôt que -4°C ou votre frigo est TRÈS déréglé ).  [...]

TYPES d'eau

je ne peux répondre qu'à la première question. Il existe différents types de pureté, en pratique on a l'eau de ville consommable et utilisable mais chargée en différents minéraux et non stérile. Ensuite il existe différentes gammes de puretés. Allant du grade 3 au grade 1 dans l'ordre de la purification.   [...] Généralement on utilise de l'eau désionisée ou distillée pour les manipulations courantes (milieu de culture, solutions...) et de l'eau ultrapure (nécessitant un appareillage plus couteux) pour la biologie moléculaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Préparation de solutions d'oligonucléotides lyophilisés

Je suis un peu perdue car d'un côté j'ai l'impression qu'il y a des infos inutiles (qu'est-ce qu'on peut déduire de la DO sans la longueur de la cuve et le coefficient d'extinction molaire ), et d'un autre côté je me demande s'il ne manque pas autre chose (volume final des solutions à préparer ).  [...] Tu n'as qu'a transformer tes 200µM en nmol/µl par exemple pour savoir quel volume d'eau rajouter pour avoir 200µM. A partir de la obtenir une solution a 2µM est a la portée d'un enfant de CE1.  [...]

[Génétique] kit qiagen

Ceci dit, à peu de choses près, on sait tous ce qu'il y a dans les solutions des kits surtout pour une technique aussi simple que l'extraction de plasmides. Dans les tampons de lyse tu as du SDS et de la soude (pH 12-13), dans la seconde solution de neutralisation tu as un agent acide, les solutions de lavages sont à bases d'alcool, le TE est du Tris-EDTA et la colonne contient une résile en silice.  [...] Petit complément, la solution acide contient certainement de l'acide acétique vu l'odeur, en plus du fait que c'est souvent cet acide qui est utilisé en biologie moléculaire. L'alcool des lavages permet de conférer une certaine hydrophobicité aux solutions de lavages.  [...]

Est-il irréaliste de penser découvrir un remède miracle contre le cancer ?

Je ne suis pas certain que l'on puisse faire plus scinique& La cancérologie est en effet très intéressante mais une grande partie de cette discipline reste fondamentale. et ce sont les applications en cancéro qui permettent de trouver des solutions. Mais à la base c'est de la biologie moléculaire fondamentale.  [...] Cette inhibition passe par des facteurs moléculaires véhiculés par voie sanguine. Lorsque l'on enlève la tumeur primaire, on abolit cette inhibition et les métastases se développent... et là ça se corse.  [...]

[Biologie Cellulaire] Cellules humaines Explication

On peut répondre avec plusieurs approches (thermodynamique, chimique et biologique), mais il faut avoir des notions de chimie des solutions et des grandes classes de molécules qui existent dans la nature et leur comportement. Je pense que ce qui vous intéresse ici, est le concept d'auto-assemblage moléculaire, et comment on peut parvenir à une cellule de cette manière Est-ce bien cela Grossomodo, une cellule comporte quatre grands types de molécules.  [...] De fait, les lipides sont une grande famille de molécules qui ont la particularité d'être plus ou moins hydrophobe. Lorsque l'on plonge une solution d'un liquide polaire avec un liquide apolaire, les deux ne sont pas miscibles et forment deux phases. ici, lorsque des lipides sont dans une solution telle que de l'eau, au delà d'une certaine concentration, ils se regroupent entre eux et forment une phase à part.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction faible qté ARN

Certes ce genre de chose n'est pas spécialement bon pour les ARN (il est possible d'avoir une légère perte de qualité), mais je pense qu'à la fin tu y gagnes parce ton chlorophorme est mieux éparpillé dans ton tube, et il a plus de contact entre les solutions.  [...] Nous sommes un labo qui travaille de façon quotidienne avec de l'ARN (transcrits in vitro, extraction d'ARN, etc) et nous n'utilisons jamais de DEPC, juste des solutions autoclavées. Même les bacs à gels traînent à l'air libre, sans nettoyage. Il n'arrive qu'extrêmement rarement des dégradations, et d'habitude c'est dû à une contamination accidentelle de notre faute.  [...]

[Biologie Moléculaire] Conservation ARN

Merci bien pour cette réponse rapide, j'ai quand même trouvé qu'on pouvait les garder de manière stable pendant 18 mois à -20... et le représentant en congel qui est passé pour nous faire un devis nous a clairement dit que -40 suffisait largement pour des arn extraits.  [...] J'ai déjà vu des ARN se dégrader en moins de 18 mois à -20°C. Je conseille le -80°C et/ou maintenant on trouve des publicités avec des solutions pour stocker l'ARN à température ambiante.  [...]

[Biologie Moléculaire] ARN insoluble ??

Au moment de reprendre mes ARN dans l'eau, ceux issus des hépatocytes transfectés (Adénovirus et siRNA avec un transfectant, le PEI ) restent totalement insolubles dans l'eau, alors que les autres sont repassés en solution aisément.  [...] les ARN de cellules non transfectées se resuspendent bien. Le problème c'est que pour transformer des hépatocytes, c'est la seule solution. Mais le PEI a été évacué en changeant le milieu, et il y a eu un lavage avant extraction.  [...]