• Forum - Biologie moléculaire, Protéines, Extraction

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN bactéries lactiques

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN bactéries lactiques.  [...] Je cherche actuellement à extraire les ARN totaux de cellules de bactéries lactiques dans le but de faire de la RT-PCR quantitative (mesure de l'expression d'un gène dans différentes conditions).   [...]

[Biologie Moléculaire] Quel Kit d'Extraction des RNA Totaux ?

Ben moi je travaille pas du tout sur ce genre de matériel, mais j'utilise les kits d'extraction d'ARN de chez Qiagen surtout le micro car j'ai des petits échantillons, et le mini aussi et j'ai de très bon rendements.  [...] Ce sont des extractions sur colonne qui sortent effectivement de bons rendements et des échantillons relativement peu contaminés.  [...]

[Biochimie] La synthèse des protéines !

Cellule nuclée et énuclée. des acides aminés radioactifs (leucine h3) ont été ajoutés au milieu nutritif des cellules en culture. Certaines cellules sont normales, d'autre ont été énuclées ( extraction du noyau) avant l'introduction de h3 dans le milieu. Cette technique d'autoradiographie permet de localiser la leucine incorporée dans les proteines.  [...] Tu peut en conclure que l'extraction du noyau ne stop pas la synthèse des protéines. Lorsque le noyau est retiré, il reste des ARNm dans ta cellule, et ce sont ces ARN qui sont traduit en protéines.  [...]

Purif d'ARN par le tryzol

Donc en gros ca te sert a te debarrasser des proteines et des lipides qui sont present lors de l'extraction des ARN. CA inactive aussi les RNAse, ce qui est bien pratique si tu ne veux pas recuperer a la fin des nucleotides libres.  [...] Donc en gros ca te sert a te debarrasser des proteines et des lipides qui sont present lors de l'extraction des ARN. CA inactive aussi les RNAse.  [...]

[Biologie Moléculaire] Conservation de tissus à -80°C

Dans les fait j'ai prélevé des tissus il y a 4 mois en vue d'une extraction simultanée protéines/ARN. J'ai eu à bosser sur autre chose entre temps et je commence à m'inquiéter un peu quand à l'intégrité de mes ARNs.  [...] Dipediou, c'est pas mal le RNA later (on en utilise d'ailleurs). Mais dans mon cas j'extraie les ARN et les protéines à partir des mêmes échantillons. Le RNA later ne permet pas d'extraire les protéines, donc je n'avais que le choix de la congélation.  [...]

Solubilité

solubilitée extraction par solvant...un soluté est plus soluble dans un solvant que dans un autre donc on peut l'extraire facilement, chromatographie...ca permet la séparation de proteines par exemple en fonction de leur solubilité, phénomène de saturation.  [...] ..precipitation qd la concentration en substance dissoute est trop importante, relarguage...trop de sels dans une solution de proteines vont faire precipiter ces proteines elles sont dénaturées. Les exemples sont tres nombreux en biologie et en chimie, a toi de choisir.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN, ARN et protéines

On c'est amusé à le faire une fois. C'était jouable. Cependant, pour une série de manip plus fréquente et plus grosse que quelques tubes je conseille aussi l'utilisation d'un kit. La manip est moins prise de tête et le résultat sans doute plus propre.   [...] je souhaite réaliser une extraction ADN génomique sans kit. Je voudrais savoir si quelqu'un a un protocole qui marche avec une quantité de l'ordre de 50 à 100 ng d'ADN extrait pour faire une PCR ensuite.  [...]

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes?

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes.  [...] Comment désagréger des protéines recombinantes La protéine est produite dans E.coli puis je procède à une extraction protéique, une purification IMAC et un dessalage. Enfin, je la filtre à 0.2um avant de la tester sur cellules mais la protéine d'intêret forme des agrégats après quelques jours de conservations à 4°C ce qui m'oblige à relancer des campagnes de production.  [...]

[Biochimie] Extraction proteine nucleaire nematode

Si c'est un facteur de transcription tu as différentes solution, soit tu fais un ChIP mais il te faut un anticorps contre ta protéine d'intérêt.  [...] Sinon tu peux taggé ta proteine mais ca va te prendre du temps, si tu as la séquence tu fais un histidine tag ou une fusion avec la gst et tu isole sur colonne d'affinité. Mais pour ca va falloir faire des constructions, les microinjecter, et avoir des vers transgéniques.  [...]

Anomalie chromosome N°15

Parmi les causes il peut y avoir des mutations génétiques dans des gènes codant pour certaines protéines impliquées dans le fonctionnement des neurones, et sans doute d'autres causes sporadiques pas forcément identifiées.  [...] Apparement il existe cette anomalie chez des personnes qui ne présente pas de syndrome particulier. Vos médecins vont chercher dans les bases de données et la bibliographie de plus amples informations pour vous aider à determiner la cause de ce syndrome.   [...]