• Forum - Biologie moléculaire, Concentration, Protéine

[Biologie Moléculaire] Concentration protéine cellulaire

[Biologie Moléculaire] Concentration protéine cellulaire.  [...] Jouer sur la concentration en IPTG (pour le T7 par exemple) jouer sur le temps d'induction Utiliser différents promoteurs.  [...]

[Biologie Moléculaire] Petit point sur les interactions protéine-protéine

[Biologie Moléculaire] Petit point sur les interactions protéine-protéine.  [...] As-tu la chance d'avoir ces deux protéines purifiées ou non Si non le double hybride est le plus facile, quoiqu'un peu simpliste (et pas forcément certains à 100%...), si tu as des protéines purifiées il existe pas mal de techniques intéressantes. Je t'en parlerai si tu le désire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Base de données interactions protéine-protéine ?

[Biologie Moléculaire] Base de données interactions protéine-protéine.  [...] Je cherche une base de données regroupant, pour une protéine donnée, tous ses partenaires protéiques répertoriés dans la littérature (toutes techniques confondues, et sans vouloir me taper PubMed à coup de keywords). Les base de données protéiques que je connais ne fournissent pas ce genre d'informations (elles sont axées sur la reconnaissance de domaines/motifsconservés, ou compilent des infos sur une famille de protéine, etc.).  [...]

[Biologie Moléculaire] Calcule de Concentration finale.

Je sais qu on doit utiliser cette formule, mais je ne sais pas comment convertir les unités justement... Est-il possible de me detailler.   [...] Après, votre solution finale est plus concentrée que la solution initiale... Pas possible. Sinon, ça donnerait Vi=100x5/25=20.  [...]

[Biologie Moléculaire] Titrage/ concentration Ac et ELISA

[Biologie Moléculaire] Titrage/ concentration Ac et ELISA.  [...] J'ai un doute, mais je pense qu'on parle de titre, lorsque l'on ne connaît pas exactement la nature de la réaction Ag/Ac. Au contraire la concentration, c'est quand il y a un seul Ac qui reconnaît un seul épitope antigénique. Avant d'aller plus loin dans ma démarche, pouvez vous me dire, dans quelle situation vous parlez de titrage Ac et non de concentration. (par ex, lorsque vous réalisez une ELISA).  [...]

[Biologie Moléculaire] Marquage Dig en Klenow, concentration de réactifs

je veux dire par là, pour la DIG-11-dUTP, tu as 125 nmol dans 125 µl Ou tu as une concentration de 125nM (nmol/L) Dans le premier cas, pas de problème. Dans le second, tu as une concentration plus faible, donc il te faut concentrer la solution (ou en acheter une nouvelle).  [...] Où Ci = concentration initiale de ton composé, Vi son volume initial (ce que tu veux savoir), Cf sa concentration finale (ce que tu désires avoir) et Vf le volume final (le volume dont tu as besoin pour ta réaction et un petit peu plus).  [...]

[Biologie Moléculaire] Définition "protéine hétérologue"

Alors que protéine homologue fait référence à une protéine normalement synthétisé dans l'organisme considéré ( l'insuline est une protéine homologue chez l'homme).  [...] selon de brêves recherches (vive google), il semblerait bien que protéine hétérologues = protéines recombinantes. Donc, tes définitions semblent justes.  [...]

[Biologie moléculaire] Immunomarquage et protéine G

Je voudrais faire un double immunomarquage avec deux anticorps de même origine (mouse) et utiliser pour bloquer la première réaction de la proteine G recombinante. Je dispose d'un tube de proteine G Zymed lyophilisée sans aucune indication de reconstitution ni de dilution.  [...] Est-ce-que quelqu'un aurait déjà utilisé cette proteine, comment, et à quelle dilution.  [...]

[Biologie Moléculaire] Nouvelle protéine humoristique

[Biologie Moléculaire] Nouvelle protéine humoristique.  [...] Mémo personnel. à caser dans une conversation. Ca devrait passer, dit avec un un air sérieux.   [...]

[Biologie Moléculaire] western blot / proteine hrp

Je ne comprends pas bien. On peut tout à fait faire un western avec SDS et utiliser un anticorps couplé à la péroxydase. Le SDS agit pendant la migration mais une fois que les protéines sont sur la membrane, il n'y a plus de SDS et si il en reste il disparaît avec les lavages donc aucun problème pour la péroxydase (et d'ailleurs intuitivement ça coule de source car les anticorps que vous allez utiliser, avant la péroxydase, nescessitent leur conformation 3D ce qui prouve que le SDS ne bouleverse pas la manipe une fois que l'on est sur la membrane).  [...] A priori si tu es non dénaturant tu dois conserver la structure et la fonction de la péroxydase donc j'aurai tendance à dire que c'est possible tout en sachant que la migration et le transfert vont certainement quand même abimer ta protéine. Il faut essayer... tu me tiens au courant.  [...]