• Forum - Biologie moléculaire, Calcul, Sondes

[Biologie Moléculaire] calcul des concentrations des sondes

[Biologie Moléculaire] calcul des concentrations des sondes.  [...] Vous calculez la concentration en g/l dans votre tube initial, et faites un produit en croix ensuite pour avoir la dilution à appliquer.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transcription in vitro de sondes ARN marquées

j'aurai bien besoin de l'avis d'un expert en biologie moléculaire. Je cherche à synthétiser des sondes ARN marquées à la DIG ou à la biotine pour faire de l'hybridation in situ.  [...] Enfin bon, je lance ma transcription et j'ai des super rendements, les DO sont impeccables. Par contre à la migration de ces ARN après purification (lithium/ethanol) je vois des smears, et quelques bandes secondaires apparaitre. Le poids moléculaire de mes transcrits est aussi plus haut qu'attendu (peut-être à cause de la DIG ou de la biotine ).  [...]

Génétique/Élément P/Transoposons

Si on a deux souches avec chacune une insertion sur l'X d'un élément P, comment savoir si elles sont sur le même locus chromosomique.   [...] Je cherche une réponse purement génétique et non pas en utilisant des techniques de Biologie Moléculaire (sondes. Etc...).  [...]

[Biologie Moléculaire] Software pour le design de sondes FISH

[Biologie Moléculaire] Software pour le design de sondes FISH.  [...] Je me tourne vers la communauté Futura-Sciences pour demander de l'aide... Je suis actuellement sur un projet de microbiologie qui consiste à repérer des bactéries grâce à leur fonction dans un mélange complexe. Pour cela, on utilise la technique du Gene-FISH qui repose sur l'utilisation de sondes polynucléotidiques spécifiques du gène que l'on cherche à repérer.  [...]

[Biologie moléculaire] Linéarisation de vecteur PGEMt pour faire des sondes HIS

[Biologie moléculaire] Linéarisation de vecteur PGEMt pour faire des sondes HIS.  [...] J'ai une petite question concernant le vecteur PGEMt. Ce vecteur comprend un site multiple de clonage (avec mon insert d'intérêt) ainsi que des sites d'initiation de la transcription T7 et SP6. Je me demandais s'il était nécessaire de linéariser le plasmide avant de faire agir les polymérases SP6 et T7 ou bien s'il est prévu dans le plasmide des sites d'arrêt de transcription.   [...]

[Biologie Moléculaire] cDNA et TAG quelle relation?

et pour le plasmide pTTQ18 on dit que c'est un plasmide qui ne présente pas de cDNA,et pour ça on peut pas purifié le protéine recombinante qui en résulte par chromatographie d'affinité on utilisons le protéine de fusion issu de la traduction de la sequence TAG. est ce que c'est juste.   [...] - la première est une notion de biologie moléculaire. Les séquences EST (expressed sequence TAG) sont des petites portion de séquences obtenues après rétrotranscription de l'ARNm en cDNA qui sont situées en début ou fin d'ARN et qui vont servir de sondes pour aller identifier un gène.  [...]

diagnostic prénatal technique

Pour faire les diagnostics grace a la biologie moleculaire on utilise pour quasi toutes les techniques de diagnostic des sondes spécifiques d'une sequences qui serait responsable des pathologies a detecter, mais comment trouve t on que justement c'est cette sequence nucleotidique qui est la source de la pathologie.  [...] il est déposé sur cette puce l'ensemble de l'ADN humain sain sous la forme de petits fragments (peut être même de plusieurs humains, cette technologie évolue trop vite pour pouvoir la suivre sans l'utiliser). Il suffit alors de dégrader l'ADN de ton sujet test pour avoir des fragments de taille identique, puis de le déposer sur la puce.   [...]

[Biologie Moléculaire] Hybridation in situ et génération des sondes

[Biologie Moléculaire] Hybridation in situ et génération des sondes.  [...] Tu penses que c'est envisageable de me lancer là dedans à 11 mois de la fin de thèse Ca parait simple mais avec la biologie moléculaire j'ai tendance à me méfier.  [...]

[Biologie Moléculaire] Fabricants sondes / amorces PCR

Une question qui vous paraitra peut être stupide, mais je ne travaille pas dans un laboratoire. Je m'intéresse néanmoins à la biologie moléculaire.  [...] J'aimerais savoir si ces réactifs sont fabriqués par des entreprises spécialisées, où bien si les laboratoires qui utilisent la PCR fabriquent eux-mêmes leurs sondes / amorces.  [...]

[Biologie Moléculaire] Question sur le design de sondes Taqman pour la PCR en temps réel

[Biologie Moléculaire] Question sur le design de sondes Taqman pour la PCR en temps réel.  [...] J'aimerais transposer une sonde MGB en sonde BHQ. Elle possède une taille suffisante pour une sonde BHQ (20nt), mais son Tm se situe entre ceux des deux amorces. Il y a la possibilité de rallonger la sonde pour augmenter son Tm, mais est-ce vraiment nécessaire.  [...]